This experiment was conducted to establish the micropropagation of Calanthe discolor through multiple shoot formation from the culture of leaf, corm and root explants. Frequency of adventitious shoot formation from leaf explants was higher than those of corms and root explants. Frequency of adventitious shoot formation on medium with various concentrations of BA (0. 1.0, 3.0, and 5.0 mg/L) and NAA (0, 0.1, 0.5, and 1.0 mg/L) was tested. The maximun induction of adventitious shoot was obtained on half strength Murashige and Skoog (MS) medium supplemented with 3.0 mg/L BA and 1.0 mg/L NAA after 6 weeks of culture. Multiple shoots were transferred onto half strength MS medium with various concentrations of GA3 (0, 0.1, 0.5, 1.0, 3.0, and 5.0 mg/L). The number and length of multiple shoots on medium were highest on medium with 3.0 mg/L GA3. All the adventitious shoot grew well and rooted on half strength MS medium with 3.0 mg/L NAA. The plantlets were acclimatized up to 100% on sand with TKS-II or pearlite with TKS-II.
Kim, Young Jin;Park, Tae Il;Kim, Hyun Soon;Park, Ho Ki;Chon, Sang Uk;Yun, Song Joong
Journal of Plant Biotechnology
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v.6
no.1
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pp.39-43
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2004
A successful, efficient system for multiple shoot induction and plant regeneration of soybean (Glycine max) was established. Four soybean genotypes were compared for organogenic responses on various media cultured under light conditions. The adventitious shoots (98%, 2.6 shoots/cotyledon) directly from one-day-old cotyledon after germination induced by the hormone treatment and its efficiency was higher than any other conditions. The optimal medium for the induction of multiple shoots from cotyledon in Pungsannamulkong(shoot formation rate, 98%), Lx 16 (83%) and IIpumgeomjeongkong(63%) was MS medium supplemented with 2 mg/L BAP, but for Alchankong(75%), MS medium supplemented with 1mg/L zeatin and 1mg/L IAA, 3% sucrose, 4% Phytagel. Higher root induction (88%) was observed from the shoots placed on rooting medium (hormone-free MS basal). Plantlets were transferred onto the same medium supplemented with 1% activated charcoal for further development. With this treatment, regenerated plantlets were obtained within 7-8 weeks (shoot induction for 4 weeks, rooting and shoot elongation for 3-4 weeks).
Plants regenerated from in vitro cultures carry chromosomal variations, especially in long-term culture. Reducing the duration of plant tissue culture is one of the ways to reduce genetic and epigenetic changes. In this study, we reduced the duration of long-term culture and repeat subculture using small bulblets derived from bulb scales in two lily cultivars. The adventitious bulblets derived from bulb-scale tissue were cultured on three different media containing Murashige and Skoog (MS) basal medium supplemented with 1 g/L Charcoal, MS medium containing 0.3 mg/L IAA and 0.4 mg/L BA hormone with or without Charcoal, respectively. About seven weeks later, the number of newly propagated multiple shoots in the two media, A and B media, showed little differentiation. Compared to both media, the number of propagated multiple shoots increased 5-fold in MS medium containing 0.3 mg/L IAA and 0.4 mg/L BA hormone without Charcoal (C medium). The number of propagated multiple shoots ranged from 5 to 6 and 4 to 6 with an average of 5 in TropicalPink and GreenStar cultivars, respectively. The flow cytometric measurements indicated no variation in the ploidy level between control and in vitro propagated plants.
In sweet potato cultivars 'Mokpo #29' and 'Sanchunza', shoots from extplants were formed 100% on the MS medium with 0.1 ㎎/L NAA and 2.0 ㎎/L BA after 30 days of culture and roots produced from the base of stem at frequencies of 66.7% ('Mokpo #29') and 69.2% ('Sanchunza'), respectively, The media with 0.5∼4.0 ㎎/L BA were produced the greatest frequency of multiple shoot and the most of shoots developed rapidly into normal plantlets with rooting within 60 days of culture. Whereas the cultivar 'Keumsi' failed to produce normal shoot multiplication on the medium with cytokinins alone because of callusing of adventitious shoots. When single shoots with 1 to 2 nodes were excised from the multiple shoot or shoots covered with callus devoid of root and transferred to MS medium with 4.0 ㎎/L BA or kinetin. Host divided shoots showed the callus induction at the stem base and it was enable to obtain regenerated plantlets with shoot and root normally.
Mature nodal segments of 2-year-old greenhouse stock plant were cultured on Murashige and Skoog basal medium supplemented with the different kinds and various concentrations of cytokinins to produce multiple shoots in in vitro condition. The most adventitious shoots were produced from excised ends of nodal segments. The highest average number $(24.6\;{\pm}\;4.6)$ of shoots was produced with the combination of BA 1.0mg/L and TDZ 0.1mg/L in MS medium. In addition, several shoots were formed from lenticels of bark cambium with the same treatment. These concentrations promoted high shooting capability upto $94.6\%$ and NAA was the best cytokinin among five different PGR sources.
Digitalis purpurea L. is a medicinal herb and have been used to congestive heart failure, mycocardial infarction, edema, angina etc. A protocol has been developed for in vitro propagation of adventitious shoot buds directly from leaf segments of D. purpurea Leaf explants of D. purpurea directly formed shoot buds when cultured on a MS medium supplemented with $2\;mg/l$ BA and $0.1\;mg/l$ IAA for 5 weeks. Adventitious shoots were multiplied by subculturing on the $B_5$ medium and shoot elongation was developed by subculturing on the WPM medium. Root formation from the shoot regenerated was achieved on MS basal medium containing 1 mg/ IBA.
Multiple shoots of garlic (Allium sativum L.) were propagated in bioreactors containing MS medium supplemented with 2% sucrose for 3 weeks. Microbulbs were induced on MS medium supplemented with 0.1mg/L NAA and 11% sucrose for 9 weeks. For multiple shoot proliferation, leaves in the shoot must be removed before cultures. When the multiple shoots were cultured without removal of leaves, more than 90% of hyperhydricity and no microbulb formation were observed. Histological observation also indicated irregular size and shape of the cells in hyperhydricity of the shoot. Microbulbs were strarted to form from the shoot after 7 weeks of culture by protuberance of adventitious shoot buds followed by inner periclinal divisions and simultaneous anticlinical division in the epidermis of meristematic bulge. Analysis of ploidy level indicated no phenotypic variations in both multiple shoots and microbulbs induced from the mother plant, suggesting genetic homogeneity among the regenerants.
This study was conducted to examine the effect of BA and NAA on adventitious bud induction from in vitro germinants E. pellita. The capacity of adventitious bud formation greatly depends on juvenility and explants origin; the more juvenile materials are the better ability to form adventitious buds even in in vitro raised plantlets. In case of in vitro germinants, 7 day old plantlets showed a better morphological response than did 14 day old ones in the induction of adventitious buds. The capacity to show morphological response was in decreasing order : cotyledons> petioles> roots. Ho adventitious buds formed when root segments were used as culture material. And optimum medium appeared to be MS + 0.5 mg/L BA and 0.2 mg/L NAA. Adventitious buds could be developed into multiple shoots and regenerated normal plantlets on DKW medium plus 0.2 mg/L BA and 0.01 mg/L NAA.
Adventitious multiple shoots were developed from leaf, petiole and internode explants of Geophila reniformis D. Don. on MS medium supplemented with various concentrations of $N^6$-benzylaminopurine (BAP) or Kinetin (KIN) alone or in combination with indole-3-acetic acid (IAA). Leaf showed maximum organogenetic potential, followed by petiole and internode. Murashige and Skoog (MS) medium supplemented with 22.22 $\mu{M}$ BAP and 4.57 $\mu{M}$ IAA induced maximum shoot buds from leaf explants. Internodal segments showed low potential of direct organogenesis. The regenerated shoots rooted the best in presence of 10.75 - 13.44 $\mu{M}$$\alpha$-naphthalene acetic acid (NAA) along with 2.22 $\mu{M}$ BAP, and were successfully established in the field with a survival rate of 89.11%.
This study was carried out to induce plant regeneration via shoot formation from sucker explants of Rubus fruticosus L. To induce adventitious shoots, sucker explants were sterilized in $1.2\%$ NaOCl solution, and cultured on the MS solid medium supplemented with kinetin (0.5, 1.0, 3.0 mg/L) and BA (0.5, 1.0, 3.0 mg/L), respectively. As above, to induce adventitious shoots, sucker explants were cultured on the MS solid medium supplemented with IBA (0, 0.1, 1.0 mg/L) and BA (0, 0.1, 1.0, 2.0 mg/L). After 4 weeks of culture, the highest frquency $(100\%)$ of shoot formation from sucker explants was obtained from the medium with 1.0 mg/L BA. The highest shoot number per explant from in vitro shoot explants was 5.3. After 10 weeks of culture, the number of shoot per explant was increased. The highest frequency $(85\%)$ of root formation was obtained at 0.5 mg/L glycine medium, when the explant with shoot were cultured on the MS medium containing glycine at various concentrations from 0 to 2.0 mg/L. The survival rate of the plantlets after transfer to plastic pots containing sand, soil, and vermiculite (1:1:1, vol.) was $95\%$. The results indicate that micropropagation procedure can be applied for an efficient mass propagation of Rubus fruticosus.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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