This experiment carried out to compare the protective effects of some antioxidants to hydroxyl radicals in embryonic mouse whole brain tissue culture. The ICR mouse whole brain (13 embryonic day) was cultured in hydroxyl radical system in which radicals were generated by 20 mU / ml glucose oxidase (GO). In this experiment, to make ferrous iron from ferric iron, iron as an accelerator, and ascorbic acid as a reductant were used. For comparison of the protective effects to hydroxyl radicals, antioxidants such as desferrioxamine (DFX), laccase. water or ethanol extracts from Rhus Vemiciflua Stokes (RVS), and $\alpha$-tocopherol were used, because they relate to metal ion. The results of this experiment showed that all antioxidants protected effectively the cytotoxicity from hydroxyl radicals in the brain cultures. More than 70% of cell viabilities among different antioxidants was at 1 mM DFX, 1.43 $\mu\textrm{m}$ laccase, 12.5 $\mu\textrm{m}$ water extract, 12.5 $\mu\textrm{m}$ ethanol extract and 50 $\mu\textrm{m}$$\alpha$-tocopherol individually, compared with 20 mU/ml GO alone. In comparison to the antioxidative activities of antioxidants, laccase and extracts from RVS showed strong antioxidative effects even at low concentration.
This study was designed to investigate the changes in the properties of the neuronal setm cells or progenitor cells associated with age-related decline in neurogenesis of the hippocampal dentate gyrus (DG). Active whole cells cycle marker Ki67 (a marker of whole cell cycle)-positive and S phase marker bromodeoxyuridine (BrdU)-positive. Neural stem cells gradually were reduced in the hippocampal subgranular zone (SGZ) in an age-dependant manner after birth (from P1 month to P1 year). The ratio of BrdUpositivecells/Ki67-positive cells was gradually enhanced in an age-dependent manner. The ratio of Ki67-positive cells/accu-mulating BrdU-positive cells at 3 hrs after BrdU injection was injected once a day for consecutive 5 days gradually decreased during ageing. TUNEL- and caspase 3 (apoptotic terminal caspase)-positive cells gradually decreased in the dentate SGZ during ageing and immunohistochemical findings of glial fibrillary acid protein (GFAP) were not changed during ageing. NeuN, a marker of mature neural cells, and BrdU-double positive cells gradually decreased in an age-dependent manner but differentiating ratio and survival rate of cells were not changed at 4 wks after BrdU injection once a day for consecutive 5 days. The number of BrdU-positive cells migrated from the hippocampal SGZ into granular layer and its migration speed was gradually declined during ageing. These results suggest that the adult neurogenesis in the mouse hippocampal DG gradually decrease through reducing proliferation of neural stem cells accompanying with cells cycle change and reduced cells migration rather than changes of differentiation.
The purpose of this study is to investigate the effects of silkworm extracts (SWE) on reactive oxygen species formation in mice (C57BL/6). Mice were administrated intraperitoneally with SWE (20 mg/kg/day) for 14 days. All animals were sacrificed 24 hours after the last SWE treatment and then extracted the blood and brain tissue in mouse. The researcher measured several parameters related to reactive oxygen species formation, malondialdehyde (MDA) and hydrogen peroxide ($H_2O_2$) contents in serum, whole brain, cerebral cortex and cerebellum. The results showed that MDA content of pre-SWE treatment was decreased significantly in serum, mitochondrial and cytosolic fraction of whole brain and cerebellum (P<0.01). The $H_2O_2$ content of pre-SWE treatment was decreased significantly in mitochondrial fraction of whole brain, cerebral cortex and cerebellum (P<0.01). These results suggest that SWE plays an important role for inhibition of oxidative damage of cells as well as antioxidant effect, aging delay and cells protected from irradiation.
BEST family is a class of Ca2+-activated Cl- channels evolutionary well conserved from bacteria to human. The human BEST paralogs (BEST1-BEST4) share significant amino acid sequence homology in the N-terminal region, which forms the transmembrane helicases and contains the direct calcium-binding site, Ca2+-clasp. But the cytosolic C-terminal region is less conserved in the paralogs. Interestingly, this domain-specific sequence conservation is also found in the BEST1 orthologs. However, the functional role of the C-terminal region in the BEST channels is still poorly understood. Thus, we aimed to understand the functional role of the C-terminal region in the human and mouse BEST1 channels by using electrophysiological recordings. We found that the calcium-dependent activation of BEST1 channels can be modulated by the C-terminal region. The C-terminal deletion hBEST1 reduced the Ca2+-dependent current activation and the hBEST1-mBEST1 chimera showed a significantly reduced calcium sensitivity to hBEST1 in the HEK293 cells. And the C-terminal domain could regulate cellular expression and plasma membrane targeting of BEST1 channels. Our results can provide a basis for understanding the C-terminal roles in the structure-function of BEST family proteins.
The amphetamine derivative 3, 4-methylenedioxymethamphetamine (MDMA) has become a popular recreational drug, and has also been shown to cause serotonergic neurotoxicity. This report shows that MDMA impairs brain development in a whole mouse embryo culture. The results of quantitative real-time PCR analysis showed that autophagy-related protein 5 (Atg5) expression is elevated in mouse embryo and neuroblastoma cells after MDMA treatment. This elevated Atg5 expression interferes with the neuronal differentiation of neuroblastoma cells such as SH-SY5Y and PC12 cells. Thus, our results suggest that the use of MDMA during pregnancy may impair neuronal development via an induction of Atg5 expression.
목적 : 마우스 대뇌조직에 방사선이 조사되었을 경우 아포토시스와 세포주기의 조절작용에 어떤 영향을 미치는 지를 연구하고자 하였다. 대상 및 방법 : 8주간 성숙된 C57B1/6J 마우스의 전뇌에 코발트 방사선조사기로 25 Gy의 방사선을 단일 조사하였다. 방사선조사후 1, 2, 4, 8, 24시간 간격으로 마우스를 경추 탈구사시킨 후 뇌조직을 채취하였다. 채취한 뇌조직을 TUNEL 분석법에 의하며 아포토시스 유도 수준을 평가하였으며 Western blotting법을 이용하여 유전자 산물인 p53, Bcl-2, Bax 그리고 세포주기 조절인자인 cyclin Bl, Dl, E, cdk2, cdk4, $p34^{cdc2}$를 분석하였다. 세포주기의 변화는 유세포분석법에 의하여 분석되었다. 결과 : 아포토시스는 방사선조사후 8시간에서 최고치를 보였고 아포토시스 지수는 $24.0{\pm}0.25$ (p<0.05)였다. 세포주기에서 조절인자의 변화는 cyclin D1를 제외하고는 특이하지 않았다. 결론 : 마우스의 전뇌에 방사선을 조사한 결과 아포토시스는 대뇌의 상의하(subependyma)에서 주로 일어났으며 세포주기의 조절인자에는 영향을 미치지 않는 것으로 판명되었다.
Son, Yeonghoon;Jeong, Ye Ji;Kwon, Jong Hwa;Choi, Hyung-Do;Pack, Jeong-Ki;Kim, Nam;Lee, Yun-Sil;Lee, Hae-June
Journal of electromagnetic engineering and science
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제15권3호
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pp.151-157
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2015
The increasing use of mobile phones has raised public concern about the possible biological effects of radiofrequency electromagnetic field (RF-EMF) exposure on the human brain. To investigate the potential effect of RF-EMF exposure on the brain, we examined the behaviors and hippocampal morphology of C57BL/6 mice after sub-chronic exposure to RF-EMFs with a relatively high SAR level (5.0 W/kg). We applied a 2-hour daily exposure of WCDMA 1,950 MHz using a reverberation chamber that was designed for whole-body exposure for 60 days. In the behavioral tests, RF-EMF did not alter the physical activity or long-term memory of mice. Moreover, no alteration was found in the neuronal and glial cells in the hippocampus by RF-EMFs. In this study, we showed that sub-chronic whole body RF exposure did not produce memory impairment and hippocampal morphological alteration in C57BL/6 mice.
Kim, Mun-Ki;Lee, Si-Joon;Vasudevan, Anju;Won, Chung-Kil
대한수의학회지
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제59권4호
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pp.201-205
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2019
This study presents neurogenesis and neuronal migration patterns of gamma-aminobutyric acid-ergic (GABAergic) neurons during mesencephalic development of mouse. After neurons from embryonic day (E) 10-16 were labelled by a single injection of 5-bromo-2'-deoxyuridine (BrdU), immunohistochemistry was performed. Neurogenesis were mainly generated in the mesencephalic region at E10 to E13. After E14, BrdU positive cells were observed only in the dorsal mesencephalon. GABAergic neurons were mainly originated in the ventrolateral region of the mesencephalon at the early embryonic stage, especially at E11 to E13. E10-labeled cells showed positive for GABAergic neuron in the basal plate of the mesencephalon at E13. At E15, GABAergic neurons were observed in the entire basal plate and some regions of the ventral and dorsal mesencephalon. They were present in the whole basal plate, the ventral and dorsal mesencephalon of E17, spreading more outward of the mesencephalon at P0. Our study demonstrates that major neurogenesis of GABAergic neurons occurs at E11 to E13. However, neuronal migration continues until neonatal period during mesencephalic development.
Kim, Mun-ki;Lee, Si-Joon;Vasudevan, Anju;Won, Chungkil
Journal of Biomedical and Translational Research
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제19권4호
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pp.125-129
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2018
Dopaminergic neurons are one of the major neuronal components in the brain. Mesencephalon dopamine (DA) neurogenesis takes place in the ventricular zone of the floor plate, when DA progenitors divide to generate postmitotic cells. These cells migrate through the intermediate zone while they differentiate and become DA neurons on reaching the mantle zone. However, neurogenesis and neuronal migration on dopaminergic neurons remain largely unexplored in the mesencephalon development. This study presents neurogenesis and neuronal migration patterns of dopaminergic neurons during mesencephalic development of the mouse. Neurons from embryonic day (E) 10-14 were labelled by a single injection of 5-bromodeoxyuridine and immunohistochemistry was performed. The neurogenesis occurred mainly at the E10 and E11, which was uniformly distributed in the mesencephalic region, but neurons after E13 were observed only in the dorsal mesencephalon. At the postnatal day 0 (P0), E10 generated neurons were spread out uniformly in the whole mesencephalon whereas E11-originated neurons were clearly depleted in the red nucleus region. DA neurons mainly originated in the ventromedial mesencephalon at the early embryonic stage especially E10 to E11. DA neurons after E12 were only observed in the ventral mesencephalon. At E17, E10 labelled neurons were only observed in the substantia nigra (SN) region. Our study demonstrated that major neurogenesis occurred at E10 and E11. However, neuronal migration continued until neonatal period during mesencephalic development.
옻나무를 극성이 각각 다른 chloroform, n-hexane, ethanol에 침지한후 추출물질에 따라 항산화력을 DPPH 및 thiocyanate 방법으로 측정했으며, 쥐 뇌세포를 배양하여 glucose oxidase (GO)에 의해 생성되는 hydroxy radical에 대한 항산화 효과를 측정하였다. DPPH및 thiocyanate 방법에 의한 항산화력은 에탄올 추출물의 항산화력이 다른 용매로 추출한 것에 비해 높았고, column을 이용해 100drop씩 분획하여 얻은 에탄을 추출물 5개 peak중 peak II의 항산화력이 thiocyanate 방법으로 측정한 결과 다른 peak에 비해 컸으며, peak III와 IV의 항산화력은 적었고, peak I과 V의 항산화력은 매우 약하게 나타났다. 항산화 효과에 있어서 쥐 뇌세포에 에탄올 추출물 (30 mg/mL)로서, GO 20 mU/mL system의 hydroxy radical에 대한 에탄올 추출물의 항산화 효과를 측정한 결과는 GO 20 mU/mL만을 처리한 구에서는 쥐 뇌세포의 생존율이 56%인데 반하여, 옻나무 에탄을 추출물을 $1\;{\mu}L\;(297\;{\mu}g/mL)$와 $2\;{\mu}L\;(588\;{\mu}g/mL)$ 첨가시 생존율은 대조구에 비해 각각 59%와 68%였으며, $4\;{\mu}L\;(1,154\;{\mu}g/mL)$ 첨가시 74%, $7\;{\mu}L\;(1,963\;{\mu}g/mL)$와 $10\;{\mu}L\;(2,727\;{\mu}g/mL)$ 첨가시 각각 83% 및 95%로서 높은 생존율을 보였다. 이것은 에탄올 추출물 $10\;{\mu}L\;(2,727\;{\mu}g/mL)$첨가에 있어서 hydroxy radical에 대한 항산화 효과를 대조구에 비교할 때 $P{\leq}0.01$의 유의성을 보여주었다. 한편 에탄올 추출물과 천연항산화제인 ascorbic acid, ${\alpha}-tocopherol$, catalase의 항산화 효과를 비교한 결과 쥐 뇌세포 생존율이 대조구에 비해 $10\;{\mu}L\;(2,727\;{\mu}/mL)$ 에탄올 추출물 첨가시 95%이었고, $10\;{\mu}g/mL$, $20\;{\mu}g/mL$ catalase에서는 각각 98%와 99%였으며, 50 uM, 100uM ascorbic acid는 각각 83%와 88%, 50 uM, 100 uM ${\alpha}-tocopherol$에서는 각각 72%, 77%로 나타났다. 따라서 에탄을 추출물 $273\;{\mu}g/mL$은 $1\;{\mu}/mL$ catalase에 상응되는 항산화력을 가지고 있다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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