During an investigation of unrecorded prokaryotic species in Republic of Korea, a total of 53 bacterial strains belonging to the class Gammaproteobacteria were isolated from soil, seawater, tidal flats, rhizosphere, salt ponds, beach sand, urine, manure, sediment, and animal intestine (Russian grayling butterfly [Hipparchia autonoe], mouse [Mus musculus], and sea bass [Lateolabrax japonicus]). Strains were identified to species using the 16S rRNA gene sequence, showing high similarity (>98.7%) with the closest bacterial species and forming a robust clade in the neighbor-joining phylogenetic tree. The 53 strains of Gammaproteobacteria in this study have not been report previously in Korea. Therefore, we describe 27 genera of 16 families in 7 orders: 13 strains in the order Alteromonadales, 1 strain in the order Chromatiales, 11 strains in the order Enterobacterales, 7 strains in the order Oceanospirillales, 10 strains in the order Pseudomonadales, 8 strains in the order Vibrionales, and 3 strains in the order Xanthomonadales. Gram reaction, strain ID, isolation source, and morphological and basic biochemical characteristics are described for each species.
The aim of this study was to investigate the potential of lactic acid bacteria (LAB) strains as probiotics. Two strains were isolated from healthy chicken cecum and their acid and bile tolerance, residual organic acids, antibacterial activity against pathogenic bacteria, and immunomodulation activity were measured. Identification of the isolated strains was performed using the API 50CHL system and phylogenetic analysis using 16S rDNA sequencing. The isolates were determined to be Lactobacillus sakei strains. The acid tolerance of strains L2 and L8 was high enough that 75% of the inoculum survived in pH 2 for 2 h. The bile tolerance of both strains was observed at a 1% Oxgall concentration in MRS broth. The production of organic acids (lactic acid and acetic acid) and pH changes during growth were monitored and the maximum concentrations were obtained after 48 h of incubation. Culture supernatants of the two LAB strains showed strong antibacterial activity against pathogenic bacteria. The heat-killed LAB cells also induced high levels of immune cell proliferation compared with the control, and stimulated IL-6 and TNF-α production in mouse macrophages. Therefore, L. sakei strains L2 and L8 can be considered suitable probiotic bacteria.
The mammalian adenosine deaminase(ADA) gene was stably expressed in transgenic tobacco plane. The chimeric ADA gene 35S/35S/AMV/ADA/Tnos, has been constructed. This chimeric gene was introduced into the binary vector pRD400, which was thereafter mobilized into Agrobacterium tumefaiens strain MP90 harboring disarmed Ti-plasmid. The resulting strains were used to transform Nicofiana tabacum L. using the leaf disc. Incorporation of the chimeric gene into plant were confirmed by PCR and Northern blot analyses. Immunoblot analysis showed that ADA protein was successfully synthesized in the transgenic tobacco plants.
Carbapenem-resistant Enterobacteriaceae (CRE) that produce Klebsiella pneumoniae carbapenemase are increasingly reported worldwide and have become more and more resistant to nearly all antibiotics during the past decade. The emergence of K. pneumoniae strains with decreased susceptibility to carbapenems, which are used as a last resort treatment option, is a significant threat to hospitalized patients worldwide as K. pneumoniae infection is responsible for a high mortality rate in the elderly and immunodeficient individuals. This study used Lactobacillus fermentum as a candidate probiotic for treating CRE-related infections and investigated its effectiveness. We treated mice with L. fermentum originating from the vaginal fluid of a healthy Korean woman and evaluated the Lactobacilli's efficacy in preventive, treatment, nonestablishment, and colonization mouse model experiments. Compared to the control, pre-treatment with L. fermentum significantly reduced body weight loss in the mouse models, and all mice survived until the end of the study. The oral administration of L. fermentum after carbapenem-resistant Klebsiella (CRK) infection decreased mortality and illness severity during a 2-week observation period and showed that it affects other strains of CRK bacteria. Also, the number of Klebsiella bacteria was decreased to below 5.5 log10 CFU/ml following oral administration of L. fermentum in the colonization model. These findings demonstrate L. fermentum's antibacterial activity and its potential to treat CRE infection in the future.
Nam, Hajin;Kim, Yoo Yeon;Kim, Boyoung;Yoon, Won Kee;Kim, Hyoung-Chin;Suh, Jun Gyo
Laboraroty Animal Research
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제34권4호
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pp.311-316
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2018
Laboratory inbred mice are used widely and commonly in biomedical research, but inbred mice do not have a big enough gene pool for the research. In this study, genetic and morphometric analyses were performed to obtain data on the characteristics of a newly developing inbred strain (KWM/Hym) captured from Chuncheon, Korea. All of five Korean wild male mice have the zinc-finger Y (ZfY) gene. Also, all of 19 Korean wild mice used in this analysis have the AKV-type murine leukemia virus gene, indicating that Korean wild mice might be Mus musculus musculus. To identify the genetic polymorphism in KWM/Hym, SNP analysis was performed. In a comparison with 28 SNP markers, there was a considerable difference between KWM/Hym and several inbred strains. The homogeneity between KWM/Hym and the inbred strains was as follows: C57BL/6J (39.3%), BALB/c AJic (42.9%), and DBA/2J (50%). KWM/Hym is most similar to the PWK/PhJ inbred strain (96.4%) derived from wild mice (Czech Republic). To identify the morphometric characteristics of KWM/Hym, the external morphology was measured. The tail ratio of male and female was $79.60{\pm}3.09$ and $73.55{\pm}6.14%$, respectively. KWM/Hym has short and agouticolored hairs and its belly is white with golden hair. Taking these results together, KWM/Hym, a newly developing inbred mouse originated from wild mouse, might be use as new genetic resources to overcome the limitations of the current laboratory mice.
Purpose: C57BL/6 mice, which are among the most common backgrounds for genetically engineered mice, are resistant to the induction of periodontitis by oral infection with periodontal pathogens. This study aimed to develop a periodontitis model in C57BL/6 mice using coaggregation between human pathogens and the mouse oral commensal Streptococcus danieliae (Sd). Methods: The abilities of Porphyromonas gingivalis ATCC 33277 (Pg33277), P. gingivalis ATCC 49417 (Pg49417), P. gingivalis KUMC-P4 (PgP4), Fusobacterium nucleatum subsp. nucleatum ATCC 25586 (Fnn), and F. nucleatum subsp. animalis KCOM 1280 (Fna) to coaggregate with Sd were tested by a sedimentation assay. The Sd-noncoaggregating Pg33277 and 2 Sd-coaggregating strains, PgP4 and Fna, were chosen for animal experiments. Eighty C57BL/6 mice received oral gavage with Sd once and subsequently received vehicle alone (sham), Fna, Pg33277, PgP4, or Fna+PgP4 6 times at 2-day intervals. Mice were evaluated at 5 or 8 weeks after the first gavage of human strains. Results: Fnn, Fna, and PgP4 efficiently coaggregated with Sd, but Pg33277 and Pg49417 did not. Alveolar bone loss was significantly higher in the PgP4 group at both time points (weeks 5 and 8) and in all experimental groups at week 8 compared with the sham group. The PgP4 group presented greater alveolar bone loss than the other experimental groups at both time points. A higher degree of alveolar bone loss accompanied higher bacterial loads in the oral cavity, the invasion of not only PgP4 but also Sd and Fna, and the serum antibody responses to these bacteria. Conclusions: Periodontitis was successfully induced in C57BL/6 mice by oral infection with a P. gingivalis strain that persists in the oral cavity through coaggregation with a mouse oral commensal bacterium. This new model will be useful for studying the role of human oral bacteria-host interactions in periodontitis using genetically engineered mice.
Han Jin Oh;Jun Pyo Lee;Ji Hwan Lee;Yong Ju Kim;Jae Woo An;Se Yeon Chang;Young Bin Go;Dong Cheol Song;Hyun Ah Cho;Min Gyu Jeon;Yo Han Yoon;Jin Ho Cho
Korean Journal of Agricultural Science
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제49권1호
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pp.1-10
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2022
One hundred and twenty imprinting control region (ICR) mouse with initial body weights of 26 ± 2 g (5 weeks old) were assigned to six treatments for a two-week feeding trial to determine the effect of Pediococcus pentosaceus strains (PpS) which were isolated from three different types of Kimchi in ICR mice infected with Escherichia coli (Ec) or Salmonella Typhimurium (ST). Six groups constituted a normal control group without Ec or ST orally administrated (NC-; n = 20), a normal control group (NC+; n = 20), a group for which Lactobacillus plantarum was orally administrated (LP; n = 20), a group for which PpS A was orally administrated (PSA; n = 20), a group for which PpS B was orally administrated (PSB; n = 20), and a group for which PpS C was orally administrated (PSC; n = 20), the latter five groups constituted the Ec infected groups and the ST infected groups of 10 mice each. LP and PSC showed significantly (p < 0.05) improved growth performance compared to the other groups, except for NC- in the Ec infected mice group. NC+ showed significantly lower (p < 0.05) growth performance compared to the other groups, except for NC- in the ST infected mice groups. Regarding the Ec and Salmonella counts in the intestine, the LP and PSC groups had significantly lower (p < 0.05) counts than the NC+ and PSB groups. In conclusion, LP and PSC strains isolated from Kimchi can act as probiotics by inhibiting Ec and ST.
Electrocardiogram measures the electric impulses generated by the heart during its cycle. Recently genome-wide association studies on electrocardiogram traits revealed many relevant genetic loci. Therefore, these findings need to be validated and investigated to determine the underlying mechanisms using mouse models. Invasive radiotelemetry has been widely used to record the electrocardiogram in mice because it has several advantages over non-invasive measurements. However, radiotelemetry is expensive and requires complicated surgery. On the other hand, a non-invasive method using 3 electrodes (one for earth) for lead II is easy to establish and allows for rapid measurement. In this study, eleven mice were measured with this non-invasive method and no statistical difference among them was found in any ECG measurements. In addition, repeat measurement in the same mouse was performed in 9 sets of experiment and the results indicated that non-invasive method was reliable for reproducibility. Further it was shown that measurements for 1, 5, 10, and 15 minutes were not different so that a short recording such as 5 minutes was enough to estimate the ECG values including heart rate. Further this method was validated by measuring the ECG of Balb/c and FVB that were previously shown to differ in ECG values by radiotelemetry. Significant differences were found in heart rate, PR interval and corrected QT interval between these mouse strains. This study partially proved that non-invasive method also could provide the accuracy and reproducibility. Based on these results, the non-invasive ECG recordings of lead II is recommended as a useful method for quick test in mouse model.
Eun Jin Kim;Jonghyun Bae;Young-Jun Ju;Do-Bin Ju;Donghyun Lee;Seonghyeon Son;Hunseok Choi;Thandavarayan Ramamurthy;Cheol-Heui Yun;Dong Wook Kim
Journal of Microbiology and Biotechnology
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제32권11호
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pp.1396-1405
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2022
Cholera remains a major global public health problem, for which oral cholera vaccines (OCVs) being a valuable strategy. Patients, who have recovered from cholera, develop antibody responses against LPS, cholera toxin (CT), toxin-coregulated pilus (TCP) major subunit A (TcpA) and other antigens; thus, these responses are potentially important contributors to immunity against Vibrio cholerae infection. However, assessments of the efficacy of current OCVs, especially inactivated OCVs, have focused primarily on O-antigen-specific antibody responses, suggesting that more sophisticated strategies are required for inactivated OCVs to induce immune responses against TCP, CT, and other antigens. Previously, we have shown that the toxT-139F allele enables V. cholerae strains to produce CT and TCP under simple laboratory culture conditions. Thus, we hypothesized that V. cholerae strains that express TCP via the toxT-139F allele induce TCP-specific antibody responses. As anticipated, V. cholerae strains that expressed TCP through the toxT-139F allele elicited antibody responses against TCP when the inactivated bacteria were delivered via a mouse model. We have further developed TCP-expressing V. cholerae strains that have been used in inactivated OCVs and shown that they effect an antibody response against TcpA in vivo, suggesting that V. cholerae strains with the toxT-139F allele are excellent candidates for cholera vaccines.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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