• 생명과학회지
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• 제8권2호
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• pp.189-196
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• 1998

다양한 동물세포로부터 그 cDNA가 dlining된 glycosylphosphatidylinositol-linked ADP-ribosyltransferase는 공통적으로 carboxy말단에 풍부한 glutamic acid motif (EEEVLP)를 소유하고 있다. 유사한 motif가 mouse 임파구의 ADP-ribosyltransferase(Yac-2)에서 발견되어진다. Yac-2는 ADP-ribosyltransferase 활성 뿐 아니라 NDA glycohyrolase의 활성도 소유하고 있다. yac-2에 있어, Glutamic acid가 풍부한 motif의 역할을 알아보기 위해 site-directed mutagensis가 수행 되었다. 돌연변이체인 E22OQ, E22OA, E222Q, E222A는 ADP-ribosyltransferase에 대해 불활성을 보였다. 이러한 결과는 Yac-2의 220번과 222번의 glutamic acid가 ADP-ribosyltransferase와 NDA glycohydrolase 활성에 필수적임을 나타내는 것으로, 이는 carboxy말단의 glutamic acid들이 Yac-2 효소의 활성에 중요한 역할을 함을 시사하는 것이라 하겠다.

• 생명과학회지
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• 제8권5호
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• pp.486-491
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• 1998

mouse의 임파구로부터 두 종류의 ADP-ribosyltransferase (Yac-1과 Yac-2)가 클로닝되어 특성을 규명한 바 있다. Yac-2는 ADP-ribosyltransferase 활성 뿐 아니라 높은 NAD glycohydrolase 활성도 가지고 있다. Yac-2는 두 보존된 glutamic acids 사이인 221번 위치에 arginine를 소유하고 있다. 두 효소 활성에 대한 Arg-221의 중요성을 조사하기 위해 Arg-221이 Glutamic acid (R221E)와 Alanine (R221A)으로 돌연변이 되었다. 돌연변이체인 R221E와 R221A는 두 효소에 대해 야생형과 유사한 활성을 나타내었으며 이러한 결과는 Yac-2의 Arg-221이 ADP-ribosyltransferase와 NAD glycohydrolase의 활성에 필수적인 역할을 하지 않음을 시사해준다.

• 생명과학회지
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• 제8권1호
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• pp.102-108
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• 1998

Gltcosylphosphatidylinositol (GPI)에 의해 고정된 단백질의 초기 형태는 골지체에서의 직접적인 processing을 수행하기 위한 아미노와 카르 복시 말단의 hydrophobic signal sequence를 소유하고 있다. 앞서, mouse 임파구로부터 NAD;arginine ADP-ribosyltransferase (Yac-1)가 클로닝되었으며 Yac-1 transferase의 아미노산 배열을 추정해 본 결과, hydrophobic 아미노와 카르복시 말단을 포함하고 있었으며 이는 GPI-anchroed 단백질들의 알려진 signal sequence와 일치하였다. 미 transferase는 야생형의 cDNA로 transfection된 NMU (rat mammary adenocarcinoma) cell의 표면에 존재하였으며 phosphoatidylinosotol-specific phospholipase C에 의해 방출되어졌다. 카르복시 말단의 hydrophobic sequence가 없는 돌연변이체는 수용성이며 분비성인 transferase를 생산하였다. 이러한 사실은 카르복시 말단의 sequence가 없는 돌연변이체는 수용성이며 분비성인 transferase를 생산하였다. 이러한 사실은 카르복시 말단의 sequence가 GPI의 부착에 중요함을 나타내준다.

• Journal of Life Science
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• 제10권1호
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• pp.20-23
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• 2000

Mono-ADP-ribosylation, catalyzed by ADP-ribosyltransferases, is a post-translational modification of proteins in which the ADP-ribose moiety of NAD is transferred to an acceptor protein. Previously, we have identified and cloned a glycosylphosphatidylinositol-linked ADP-ribosyltransferase (Yac-1) from mouse lymphoma cells. Yac-1 enzyme contains three regions (region I,II,III) similar to those found in several bacterial toxins and vertebrate ADP-ribosyltransferases. Site-directed mutagenesis was performed to verify the role of Glu 233 in region III. Mutants E233Q, E233D and E233A were inactive for ADP-ribosyltransferase activity. Thus Glu 233 in Yac-1 is essential for enzyme activity, suggesting that Glu 233 in Glu-rich motif near the carboxy terminus plays a catalytic role in ADP-ribosyltransferase activity.