• Current Research on Agriculture and Life Sciences
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• 제6권
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• pp.145-156
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• 1988

본(本) 연구(硏究)는 생쥐에 대한 과배란반응(過排卵反應), 회수(回收)된 수정란(受精卵)의 양분율(兩分率), 양분(兩分)된 분할구(分割球)의 체외배양(體外培養) 및 이식후(移植後) 산자(産仔)로의 발달율(發達率)을 조사하기 위하여 CBA 및 C57BL 계통(系統)의 공시(供試)생쥐에서 얻어진 수정란(受精卵)을 0.5% protease로 투명대 제거 및 미세유리봉으로 양분(兩分)하여 얻어진 분할구(分割球)를 blastocyst로 배양(培養)하여 BALB/C 계통(系統)의 수란(受卵)생쥐에 이식(移植)하여 다음과 같은 결과(結果)를 얻었다. hCG 주사후(注射後) 36~42시간(時間), 48~54시간(時間), 62~66시간(時間), 72~78시간(時間)에 수정란(受精卵)을 회수(回收)한 결과(結果) 각각(各各) 2세포기(細胞期), 4세포기(細胞期), 8세포기(細胞期) 및 상실배기(桑實胚期)의 수정란(受精卵)이 대부분 회수(回收)되었으며 수당(首當) 평균(平均) 17.0개(個)의 난자(卵子)가 회수(回收)되었다. 회수후(回收後) 양분(兩分)한 8세포기(細胞期) 수정란(受精卵)의 양분율(兩分率)은 83.6%로서 상실배(桑實胚)의 65.5%에 비(比)해 유의적으로 높았으나 blastocyst로의 분할구(分割球)의 발달율(發達率)은 상실배(桑實胚)에서 얻어진 분할구(分割球)가 76.5%로서 8세포기(細胞期) 분할구(分割球)의 60.9%에 비(比)해 유의적으로 높았다. 한편 배양(培養)된 분할구(分割球)와 intact embryo에 있어서 세포기(細胞期)에 따라 각각(各各) 수란(受卵)생쥐당(當) 2개(個), 10개(個), 15개(個)씩 이식(移植)하였을 때 공(共)히 15개(個)씩 이식(移植)한 경우 수태율(受胎率)이 가장 높았으나 세포기(細胞期)에 따른 수태율(受胎率)에 있어서 유의적인 차이는 없었다. 배양(培養)된 분할구(分割球)와 intact embryo의 이식(移植)후 새깨생산율(生産率)에 있어서 8세포기(細胞期)에서는 intact embryo를, 상실배(桑實胚)에서도 intact embryo를 이식(移植)하였을때 새끼 생산율(生産率)은 각각(各各) 37.6% 및 43.4%로서 각각(各各) 배양(培養)된 분할구(分割球)를 이식(移植)하였을때 보다 새끼생산율(生産率)이 유의적으로 높았다.

• Reproductive and Developmental Biology
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• 제30권4호
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• pp.255-261
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• 2006

There are replete numbers of reports which have apparently shown that established patterns of methylation are critical for normal mammalian development. Here, we report expression of the DNA methyltransferases (Dnmts) family during mouse early development. Transcription of Dnmt1o occurs in one-cell and morula stage embryos, whereas Dnmtls transcripts were detectable in all cells and tissues examined during the study. Dnmt3a1 transcript was detected in all cells and Dnmt3a2 transcript was particularly detected in the oocyte and 1-cell stages. Low level Dnmt3b1 transcripts were expressed ubiquitously in oocyte, 1-cell, and preimplantation embryos except $2{\sim}4cell$ stages. Dnmt3b3 transcripts were only detected in E7.5 embryo and ovary. Furthermore, Dnmt31 transcripts were detectable in all cells and tissues examined. Unlike Dnmtl, both Dnmt3a and Dnmt3b proteins existed in the nucleus of preimplantation embryos till the morula stage. These Results suggest that differences Dnmts expression level exist and genomic DNA methylation patterns may be determined partly through differential expression of Dnmts during early development.

• 한국응용과학기술학회지
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• 제39권3호
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• pp.442-453
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• 2022

다양한 동물 모델이 인간 질병, 의약품의 효능 및 작용 메커니즘을 연구하는 데 사용되고 있다. Zebrafish(Danio rerio)는 여러 가지 장점이 있어 인간 질병에 대한 중개 연구의 모델로 점점 더 폭넓게 활용되고 있다. 본 논문은 Pubmed, Google Scholar, Scopus에서 2020년 12월까지 최근 10년간 zebrafish 모델, 천연물(한약), in vivo 스크리닝의 키워드를 사용하여 저널에 게재된 논문을 검토하여 필요한 정보를 얻었다. 이 리뷰에서 우리는 천연물(한약) 연구에 대한 다양한 제브라피쉬 질병 모델의 최근 경향에 대해 논의하였다. 특히, 암, 안질환, 혈관 질환, 당뇨병 및 합병증, 피부질환에 중점을 두었고, zebrafish 배아를 사용하여 이들 질병에 대한 의약품의 분자 작용 메커니즘에 관해 언급하였다. Zebrafish는 실험실에서 임상 연구까지의 격차를 줄이는 데 중추적 역할을 할 수 있는 중요한 동물 모델이다. Zebrafish는 의약품이나 화장품 개발, 질병의 병인론을 이해하기 위해 사용되고, 이로 인해 생의학 연구에서 설치류의 사용을 줄이는 데 크게 기여하고 있다.

• Clinical and Experimental Reproductive Medicine
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• 제23권1호
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• pp.103-108
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• 1996

Through the previous studies(I,II), it was observed that human follicular fluid(HFF) was more effective than human fetal cord serum(HFCS) on promoting meiotic resumption of oocytes and improving embryonic development of mouse in vitro. On the basis of these results, we have gradually exchanged HFCS with HFF as protein supplement in human ART. This study was performed to investigate the efficiency of HFF on improving the pregnancy rate in ART. Oocytes were retrieved transvaginally from patients treated with pituitary suppression with GnRH-agonist and ovarian stimulation with human menopausal gonadotro-pin(HMG) and pure follicle stimulating hormone(FSH). Aspirated oocytes were rinsed and cultured in TCM-199 containing HFF, and the concentrations of HFF were adjusted to 10, 20, and 30% according to the use for insemination, embryo growth and embryo transfer, respectively. As possible as, we tried to do embryo transfer into fallopian tube to mimic the coincidence of the cell stage with the place of sojourn in vivo, so we performed various ART programs(IVF & ET; in vitro fertilization, ZIFT; zygote intra fallopian-tube transfer, ZIFT & ET) according to the tubal conditions of patients. On the while, intra cytoplasmic sperm injection(ICSI) was used to assist IVF of the patients who had shown poor standard IVF results by immunological or severe male factor. Of the 255 cycles of ART programs using HFF as protein supplement, 118 cycles were turn out to be succeeded in pregnancy(46.2%, per cycle, p<0.05), while 21 pregnancies were achieved in the 69 cycles using HFCS(30.4%). The 255 cycles using HFF were subdivided into cycles with the type of ART programs, and each pregnancy rate of the ART programs were 44.7% (IVF & ET, 76/170 cycles), 53.4%(ZIFT, 31/58 cycles) and 40.7% (ZIFT & ET, 11/27 cycles), respectively. In the 61 ICSI cycles using HFF, 28 cycles succeed in pregnancy(45.9%), while 7 pregnancies were obtained in the 17 ICSI cycles using HFCS. Also the ongoing pregnancy rate in the group using HFF(78.8%, 93/118 cycles) was higher than that in the group using HFCS(61.9%). Therefore, we found that the use of HFF as protein supplement was more suitable and effective than the use of HFCS to improve the pregnancy rate in ART.

• 대한수의학회지
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• 제55권3호
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• pp.181-184
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• 2015

Ciliary rootlet coiled coil protein (CROCC), the structural component that originates from the basal body at the proximal end of the ciliary rootlet, plays a crucial role in maintaining the cellular integrity of ciliated cells. In the current study, we cloned Xenopus CROCC and performed the expression analysis. The amino acid sequence of Xenopus laevis was related to those of Drosophila, cow, goat, horse, chicken, mouse and human. Reverse transcription polymerase chain reaction analysis revealed that CROCC mRNA encoding a coiled coil protein was present maternally, as well as throughout early development. In situ hybridization indicated that CROCC mRNA occurred in the animal pole of embryo during gastrulation and subsequently in the presumptive neuroectoderm at the end of gastrulation. At tailbud stages, CROCC mRNA expression was localized in the anterior roof plate of the developing brain, pharyngeal epithelium connected to gills, esophagus, olfactory placode, intestine and nephrostomes of the pronephric kidney. Our study suggests that CROCC may be responsible for control of the development of various ciliated organs.

• Clinical and Experimental Reproductive Medicine
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• 제21권1호
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• pp.77-81
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• 1994

To improve in vitro embryonic cell development, this study was desigend to culture in vitro fertilized early embryos of mouse in two different systems; conditioned medium alone and ampullary cells co-culture. Thirty two of 83 embryos(38.6%) were blocked in the 2 cell stage by co-culture, as compared to forty of 42 embryos(95.2%) in control group for 24hours culture. And all the embryonic cells cultured for conditioned medium alone were blocked for 48 hours culture. Twenty seven of 46 embryos (58.7 %) which overcome culture block in 2 cell stage by cocultured were developed morular and expanded blastocyst, and ninteen of 46 embryos(26.1 %) underwent hatching for 96 hours culture. The cellular fragmented rates for embryo were 26.2% in medium alone; 10 fragmented blastomere were graded mild status and 1 fragmented blastomere in severe status. On the other hand, the fragmented rate for 48 hours co-cultured were 15.7%03/83); 8 fragmented embryos were graded mild status, moderate status in 3 fragmented embryos and severe in 2 fragmented embryos respectively. In conclusion, the co-culture of embryos with ampullary cells is good to improve quality of embryos and overcome of culture block as well as development of cell cleavage.

• Molecules and Cells
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• 제40권8호
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• pp.558-566
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• 2017

Regular monitoring on experimental animal management found the fluctuation of ART outcome, which showed a necessity to explore whether superovulation treatment is responsible for such unexpected outcome. This study was subsequently conducted to examine whether superovulation treatment can preserve ultrastructural integrity and developmental competence of oocytes following oocyte activation and embryo culture. A randomized study using mouse model was designed and in vitro development (experiment 1), ultrastructural morphology (experiment 2) and functional integrity of the oocytes (experiment 3) retrieved after PMSG/hCG injection (superovulation group) or not (natural ovulation; control group) were evaluated. In experiment 1, more oocytes were retrieved following superovulation than following natural ovulation, but natural ovulation yielded higher (p < 0.0563) maturation rate than superovulation. The capacity of mature oocytes to form pronucleus and to develop into blastocysts in vitro was similar. In experiment 2, a notable (p < 0.0186) increase in mitochondrial deformity, characterized by the formation of vacuolated mitochondria, was detected in the superovulation group. Multivesicular body formation was also increased, whereas early endosome formation was significantly decreased. No obvious changes in other microorganelles, however, were detected, which included the formation and distribution of mitochondria, cortical granules, microvilli, and smooth and rough endoplasmic reticulum. In experiment 3, significant decreases in mitochondrial activity, ATP production and dextran uptake were detected in the superovulation group. In conclusion, superovulation treatment may change both maturational status and functional and ultrastuctural integrity of oocytes. Superovulation effect on preimplantation development can be discussed.

• 한국가축번식학회지
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• 제27권1호
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• pp.69-75
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• 2003

본 연구의 목적은 inbred 마우스 (C57BL/6J)의 수정란을 이용하여 형질전환마우스를 생산할 때, 수정란이식의 효율성을 증진시키기 위한 것이다. C57BL/6J 및 BCF1 마우스로부터 과배란처리 방법에 의해 수정란을 얻고, DNA를 1 세포기 수정란에 미세 주입한 다음, 1세포기 또는 2 세포기의 수정란을 가임신된 마우스의 한쪽 또는 양쪽 난관에 각각 이식하였다. 1세포기의 수정란을 0.75 d.p.c. 가임신된 마우스의 한쪽 난관에 이식했을 때, 임신율이 C57BL/6J는 68.8$\pm$7.83%, BCF1은 48.3$\pm$14.22% 이었고, 이식한 수정란 당 산자의 발달율은 C57BL/6J가 11.9$\pm$5.51%, BCF1은 10.5$\pm$8.03%로 성적이 저조하였다. 그러나, 2세포기의 수정란을 0.5 d.p.c. 가임신된 마우스의 양쪽 난관에 이식했을 때, 임신율이 C57BL/6J는 94.4$\pm$9.64%, 13CFl은 100$\pm$0% 이었고, 이식한 수정란 당 산자의 발달율은 C57BL/6J가 22.1 $\pm$0.4%, BCF1은 21.8$\pm$0.38%였다. 따라서 C57BL/6J 마우스의 2세포기 수정란을 0.5 d.p.c. 가임신된 마우스의 양쪽 난관에 이식하는 것이, BCF1마우스와 유사한 성적을 얻어 경쟁력이 있는 것으로 판단되었다. 이러한 결과에 영향을 미치는 인자가 여러 가지 있을 것으로 판단되지만, C57BL/6J 마우스의 2세포기 수정란을 0.5 d.p.c.가임신된 마우스의 양쪽 난관에 이식하는 방법이 다른 방법보다 형질전환마우스를 생산하는데 효율성이 더 높은 것으로 본 실험에서 확인되었다.

• 한국가축번식학회지
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• 제20권4호
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• pp.379-384
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• 1997

외인성 성선자극 호르몬에 의한 과배란처리는 난모세포의 질, 수정, 배발달, 착상, 임신유지 등에 해로운 영향을 수반하는 광범위한 배란전후의 호르몬 분비이상을 야기한다. 최근 본 연구에서 흰쥐에서의 IGF-1이 착상전 및 자궁의 환경적 조절에 미치는 잠재적 역할을 확인하였다. 그 결과는 IGF-1이 아마도 탈락막의 조절과 배발달에 적합한 자궁환경유지에 중요한 역할을 수행한다는 것을 보여주었다. 과배란후 배의 손실과 착상의 실패는, 본 연구에서 관찰되었듯이 부분적인 자궁내 IGF-1의 작용저해에 기인하리라 사료된다. 또한 본 연구진들은 생쥐의 배에서 염색체 이상빈도에 대한 과배란을 유도하는 성선자극 호르몬의 영향에 대한 연구를 수행하였다. PMSG 5, 10 및 15 I.U.를 투여하여 과배란된 생쥐에서 생쥐의 수정란과 8-16 세포기 배의 염색체 분석을 실시하였다. 이수체(aneuploidy), 다배체(polyploidy) 또한 염색체의 구조적 이상은 4개군에서 관찰되었따. 그러나 다배체만이 과배란과 상관관계가 있엇따. PMSG 10, 15 I.U. 처리군에서 다배체 발생율은 각각 2.9%와 10.5%였다. 더욱이 PMSG 용량에 따른 배의 다배체 발생빈도 사이에는 투여량에 따른 상관관계가 확인되었다(P<0.0001). 과배란과 성선자극호르몬은 양의 상관관계가 있었으며 염색체와 과배란의 정도에는 투여량에 따른 상관관계가 있었다. 과배란된 난모세포의 발달 잠재력은 모축의 내분비적 환경뿐만 아니라 생존에 필요한 내인성 요인들 즉 유전적 상태 그리고 난자의 전체적 성숙등에 연관되어 있다고 사료된다.

• 한국동물학회지
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• 제38권4호
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• pp.550-556
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• 1995

c-myc proto-oncogene은 여러 세포들의 분화와 형질전화에 뿐만 아니라 정상세포의 분열조절에도 관여한다고 알려져왔다. 특히 생쥐의 초기배아에서 c-myc mRNA가 발현되고 antisense c-myc oligomer의 미세주입에 의해 배발생이 억제된다는 연구결과는 c-myc이 초기배아의 발생 및 분열에 관여하는 것을 시사한다. 그러나 최근까지 초기배아에 존재하는 c-myc promoter의 기능적 활성화에 관한 연구는 미진하였다. 이를 위하여, c-myc promoter와 대장균의 lacZ 유전자를 결합시킨 두 종류의 vector(pcmyc-Gall, pcmyc-Ga12)를 만들어 수정란의 전핵에 미세주입한 후, 배 발생에 따른 c-myc promoter의 활성화를 lacZ 유전자의 산물인 $\beta$-galactosidase 에 의한 X-gal 염색으로 조사하였다. 미세주입된 초기 배아는 2세포기 배아를 포함하는 여러 발생단계에서 $\beta$-galactosidase 의 활성을 보였다. 이는 c-myc 유전자가 배아의 게놈유전자로부터 발현되며, 또한 궁극적으로 초기 배아의 발생과정에 중요한 역할을 하고 있음을 시사하고 있다.