Park, Jong-Hyeon;Kim, Su-Mi;Bang, Min-Woo;Lee, Kwang-Nyeong;Ko, Young-Joon;Lee, Hyang-Shim;Shim, Hang-Sub;Cho, In-Soo
Korean Journal of Veterinary Research
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v.49
no.3
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pp.237-242
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2009
Bovine enteroviruses (BEVs) were separated into two groups, BEV-1 and BEV-2. BEVs, found in cattle worldwide, usually cause asymptomatic infections and are excreted in the feces of infected animals. Antibodies against BEV have been found in different species including human, cattle, sheep, goats, dogs, horses and monkeys in the world. This study aimed to investigate prevalence of the neutralizing antibodies for BEVs in human and animals in Korea. Antibodies against BEV-1 in humans, cattle, pigs, goats, horses and dogs were shown to be 46.8%, 48.3%, 70.6%, 11.5%, 11.5% and 6.3% respectively. Also, antibodies against BEV-2 were shown to be 98.7%, 68.1%, 89.2%, 59.4%, 9.4% and 96.9% respectively. We found that the neutralizing antibodies against these viruses are common in Korea. The prevalences of antibodies against BEV-1 were lower than those against BEV-2 in humans and in all animals except horses. These results showed that the BEV is considered endemic in cattle in many regions in Korea.
Gene-manipulated mice were discovered for the first time about a quarter century ago. Since then, numerous sophisticated technologies have been developed and applied to answer key questions about the fundamental roles of the genes of interest. Functional genomics can be characterized into gain-of-function and loss-of-function, which are called transgenic and knock-out studies, respectively. To make transgenic mice, the most widely used technique is the microinjection of transgene-containing vectors into the embryonic pronucleus. However, there are critical drawbacks: namely position effects, integration of unknown copies of a foreign gene, and instability of the foreign DNA within the host genome. To overcome these problems, the ROSA26 locus was used for the knock-in site of a transgene. Usage of this locus is discussed for the gain of function study as well as for several brilliant approaches such as conditional/inducible transgenic system, reproducible/inducible knockdown system, specific cell ablation by Cre-mediated expression of DTA, Cre-ERTM mice as a useful tool for temporal gene regulation, MORE mice as a germ line delete and site specific recombinase system. Techniques to make null mutant mice include complicated steps: vector design and construction, colony selection of embryonic stem (ES) cells, production of chimera mice, confirmation of germ line transmission, and so forth. It is tedious and labor intensive work and difficult to approach. Thus, it is not readily accessible by most researchers. In order to overcome such limitations, technical breakthroughs such as reporter knock-in and gene knock-out system, production of homozygous mutant ES cells from a single targeting vector, and production of mutant mice from tetraploid embryos are developed. With these upcoming progresses, it is important to consider how we could develop these systems further and expand to other animal models such as pigs and monkeys that have more physiological similarities to humans.
Proceedings of the Microbiological Society of Korea Conference
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2001.11a
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pp.77-81
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2001
Microsporidia in humans emerged with the AIDS epidemic. Enterocytozoon bieneusi is the most significant species' and causes chronic diarrhea, wasting, papillary stenosis, acaculous cholecystitis, bile duct dilatation and sclerosing cholangitis and is responsible for $30-50\%$ of all cases of in people with AIDS. Microsporidiosis has been reported in immunosuppressed, and in immunologically normal individuals. Variety of study has revealed the mode of transmission and possible reservoir of E. bieneusi. Its sites of infection suggest that transmission occurs by ingestion. Transmission has been speculated to occur via infected animals to human, person to person. There is evidence that E. bieneusi occurs in pigs, monkeys, and possibly other animals such as cattle, dogs, cats, llamas and rabbits. E. bieneusi from infected humans has been transmitted experimentally to macaques and to pigs. These observations reflect indirectly the zoonotic nature of E. bieneusi and indicate that cross species transmission is a real possibility. Meanwhile, In recent report, thirty-two percent of the pigs were found to be positive with rates higher over the summer months in US.
Gender differences in the trace elements of monkey sino-atrial (SA) node were investigated in a process of age-dependent alterations. Sixty hearts from Japanese and rhesus monkeys (30 male and 30 female) used were aged ranging from 1-day- to 30-year-old. The elements were analyzed using an inductively coupled plasma-atomic emission spectrometer (ICP-AES). Advancing age decreased all the trace elements. Ca, P, S and Mg significantly decreased. The correlation coefficients of Ca and P were $-0.178{\pm}0.081$ (p<0.05) and $-0.088{\pm}0.022$ (p<0.05) in male (n=30), and $-0.095{\pm}0.026$ (p<0.05) and $-0.069{\pm}0.017$ (p<0.05) in female (n=30), respectively. The age-dependent coefficients for Fe/Ca, Zn/Ca, Fe/P, Fe/S, Zn/S, Fe/Mg and Zn/Mg were exhibited markedly in male, but all was less in female. In gender-related differences, only a ratio of P/Ca (p<0.05) was significantly observed with ageing. The trace elements such as Cu, Se and Sn were less detected in the SA nodes. These results indicate that the age-dependent changes in the ratios of elements are appeared more rapidly in male monkey SA node, and the gender difference is observed in ratio of P/Ca. The different attenuations may be involved with the age- and gender-related SA nodal functions.
The mechanism of cytotoxicity of doxifluridine, a prodrug fluorouracil (5-FU), has been ascribed to the misincorporation of fluoropyrimidine into RNA and DNA and to the inhibition of the nucleotide synthetic enzyme thymidylate synthase. Increased understanding of the mechanism of 5-FU has led to the development of strategies that increases its anticancer activity or predicts its sensitivity to patients. Using GeneChip?? Rhesus Macaque Genome arrays, we analyzed gene expression profiles of doxifluridine after two weeks repeated administration in cynomolgus monkey. Kegg pathway analysis suggested that cytoskeletal rearrangement and cell adhesion remodeling were commonly occurred in colon, jejunum, and liver. However, expression of genes encoding extracellular matrix was distinguished colon from others. In colon, COL6A2, COL18A1, ELN, and LAMA5 were over-expressed. In contrast, genes included in same category were down-regulated in jejunum and liver. Interestingly, MMP7 and TIMP1, the key enzymes responsible for ECM regulation, were overexpressed in colon. Several studies were reported that both gene reduced cell sensitivity to chemotherapy-induced apoptosis. Therefore, we suggest they have potential as target for modulation of 5-FU action. In addition, the expression of genes which have been previously known to involve in 5-FU pathway, were examined in three organs. Particularly, there were more remarkable changes in colon than in others. In colon, ECGF1, DYPD, TYMS, DHFR, FPGS, DUT, BCL2, BAX, and BAK1 except CAD were expressed in the direction that was good response to doxifluridine. These results may provide that colon is a prominent target of doxifluridine and transcriptional profiling is useful to find new targets affecting the response to the drug.
microRNAs (miRNAs) are non-coding RNA molecules involved in the regulation of gene expression. miRNAs inhibit gene expression by binding to the 3' untranslated region (UTR) of their target gene. miRNAs can originate from transposable elements (TEs), which comprise approximately half of the eukaryotic genome and one type of TE, called the long terminal repeat (LTR) is found in class of retrotransposons. Amongst the miRNAs derived from LTR, hsa-miR-3681 was chosen and analyzed using bioinformatics tools and experimental analysis. Studies on hsa-miR-3681 have been scarce and this study provides the relative expression analysis of hsa-miR-3681-5p from humans, chimpanzees, crab-eating monkeys, and mice. Luciferase assay for hsa-miR-3681-5p and its target gene SHISA7 supports our hypothesis that the number of miRNA binding sites affects target gene expression. Especially, the variable number tandem repeat (VNTR) and hsa-miR-3681-5p share the binding sites in the 3' UTR of SHISA7, which leads the enhancer function of hsamiR-3681-5p to inhibit the activity of VNTR. In conclusion, hsa-miR-3681-5p acts as a super-enhancer and the enhancer function of hsa-miR-3681-5p acts as a repressor of VNTR activity in the 3' UTR of SHISA7.
Most of the endogenous retroviral genes integrated into the primate genome after the split of New World monkeys in the Oligocene era, approximately 33 million years ago. Because they can change the structure of adjacent genes and move between and within chromosomes they may play important roles in evolutionas well as in many kinds of disease and the creation of genetic polymorphism. Comparative analysis of HERVs (human endogenous retroviruses) and their LTR (long terminal repeat) elements in the primate genomes will help us to understand the possible impact of HERV elements in the evolution and phylogeny of primates. For example, HERV-K LTR and SINE-R elements have been identified that have been subject to recent change in the course of primate evolution. They are specific elements to the human genome and could be related to biological function. The HERV-M element is related to the superfamily of HERV-K and is integrated into the periphilin gene as the truncated form, 5'LTR-gag-pol-3'LTR. PCR and RT-PCR approaches indicated that the insertion of various retrotransposable elements in a common ancestor genome may make different transcript variants in different primate species. Examination of the HERV-W elementrevealed that env fragments were detected on human chromosomes 1, 3-7, 12, 14, 17, 20, and X, whilst the pol fragments were detected on human chromosomes 2-8, 10-15, 20, 21, X, and Y. Bioinformatic blast search showed that almost full-length of the HERV-W family was identified on human chromosomes 1-8, 11-15, 17, 18, 21, and X. Expression analysis of HERV-W genes (gag, pol, and env) in human tissues by RT-PCR indicated that gag and pol were expressed in specific tissues, whilst env was constituitively expressed in all tissues examined. DNA sequence based phylogenetic analysis indicated that the gag, pol and env genes have evolved independently during primate evolution. It will thus be of considerable interest to expand the current HERV gene information of various primates and disease tissues.
In this review, we have tried to summarize the evidence and molecular characterization indicating that $20{\alpha}$-hydroxysteroid dehydrogenase ($20{\alpha}$-HSD) is a group of the aldo-keto reductase (AKR) family, and it plays roles in the modulation and regulation of steroid hormones. This enzyme plays a critical role in the regulation of luteal function in female mammals. We have studied the molecular expression and regulation of $20{\alpha}$-HSD in cows, pigs, deer, and monkeys. The specific antibody against bovine $20{\alpha}$-HSD was generated in a rabbit immunized with the purified recombinant protein. The mRNA expression levels increased gradually throughout the estrous cycle, the highest being in the corpus luteum (CL) 1 stage. The mRNA was also specifically detected in the placental and ovarian tissues during pregnancy. The $20{\alpha}$-HSD protein was intensively localized in the large luteal cells and placental cytotrophoblast villus, glandular epithelial cells of the endometrium, syncytiotrophoblast of the placenta, the isthmus cells of the oviduct, and the basal part of the primary chorionic villi and chorionic stem villus of the placenta and large luteal cells of the CL in many mammalian species. Further studies are needed to determine the functional significance of the $20{\alpha}$-HSD molecule during ovulation, pregnancy, and parturition. This article will review how fundamental information of these enzymes can be exploited for a better understanding of the reproductive organs during ovulation and pregnancy.
Kim, Eun-ok;Kim, Eun;Oh, Yoon-i;Shin, Kwang-soon;Kim, Hyun-soo;Kim, Chul-joong
Korean Journal of Veterinary Research
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v.42
no.1
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pp.101-108
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2002
The p27 coding region of the SIVmac239 isolate was amplified by PCR and cloned into an expression vector, pMAL-cri, which expressed high levels of the p27 protein from Escherichia coli. The purified p27 protein was used for detection of anti-SIV antibodies with the sera from 11 macaques and 21 marmosets by immunoblot assay of which one macaque was suspicious for the SIV infection. The optimum conditions of ELISA was studied by the check board system with the recombinant purified p27 protein. For the plate coating, 200ng/well of the purified p27 was satisfactory. The conjugate was diluted 1:1000. The sera from the 32 monkeys were negative for the anti-SIV by ELISA.
Williams, J. Koudy;Mariya, Silmi;Suparto, Irma;Lankford, Shannon S.;Andersson, Karl-Erik
International Neurourology Journal
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v.22
no.4
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pp.260-267
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2018
Purpose: A major question remaining in approaches to tissue engineering and organ replacement is the role of native mobilized native cells in the regeneration process of damaged tissues and organs. The goal of this study was to compare the cell mobilizing effects of the chemokine CXCL12 and cell therapy on the urinary sphincter of nonhuman primates (NHP) with chronic intrinsic urinary sphincter dysfunction. Methods: Either autologous lenti-M-cherry labeled skeletal muscle precursor cells (skMPCs) or CXCL12 were injected directly into the sphincter complex of female NHPs with or without surgery-induced chronic urinary sphincter dysfunction (n=4/treatment condition). All monkeys had partial bone marrow transplantation with autologous lenti-green fluorescent protein (GFP) bone marrow cells prior to treatment. Labeled cells were identified, characterized and quantified using computer-assisted immunohistochemistry 6 months posttreatment. Results: GFP-labeled bone marrow cells (BMCs) were identified in the bone marrow and both BMCs and skMPCs were found in the urinary sphincter at 6-month postinjection. BMCs and skMPCs were present in the striated muscle, smooth muscle, and lamina propria/urothelium of the sphincter tissue. Sphincter injury increased the sphincter content of BMCs when analyzed 6-month postinjection. CXCL12 treatment, but not skMPCs, increased the number of BMCs in all layers of the sphincter complex (P<0.05). CXCL12 only modestly (P=0.15) increased the number of skMPCs in the sphincter complex. Conclusions: This dual labeling methodology now provides us with the tools to measure the relative number of locally injected cells versus bone marrow transplanted cells. The results of this study suggest that CXCL12 promotes mobilization of cells to the sphincter, which may contribute more to sphincter regeneration than injected cells.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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