Richadella dulcifica, a native shrub in tropical West Africa, gives red berries that have the unusual property of modifying a sour taste into a sweet taste. The red berries contain a taste-modifying protein named miraculin. A synthetic gene encoding miraculin was placed under the control of constitutive promoters and transferred to lettuce. High expression of miraculin was obtained, with accumulation of up to 1% total soluble protein in lettuce leaf. In addition, the miraculin expressed in lettuce possesses a taste-modifying activity.
Journal of mucopolysaccharidosis and rare diseases
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제5권1호
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pp.22-28
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2021
Mucopolysaccharidosis type III (MPS III) or Sanfilippo disease is an orphan-inherited lysosomal storage disease. It is one of the most common MPS subtypes. The classical presentation is an infantile-onset neurodegenerative disease characterized by intellectual regression, behavioral and sleep disturbances, loss of ambulation, and early death. Unlike other MPS, no disease-modifying therapy has been approved. Here, we review the curative therapy developed for MPS III, from historically ineffective hematopoietic stem cell transplantation and substrate reduction therapy to the promising enzyme replacement therapy or adeno-associated/lentiviral vector-mediated gene therapy. Preclinical studies are presented with recent translational first-in-man trials. We also present experimental research with preclinical mRNA and gene-editing strategies. Lessons from animal studies and clinical trials have highlighted the importance of early therapy before extensive neuronal loss. Disease-modifying therapy for MPS III will likely mandate the development of new early diagnosis strategies.
The authors attempted to examine the allelic association between the A1 allele of Dopamine $D_2$ receptor and schizophrenia, alcoholism, drug addiction in Koreans. Schizophrenic patients(n=31), alcoholism(n=65), drug addiction(n=18) and controls(n=52) were examined by case-control study for distribution of the TaqI polymorphism of the dopamine $D_2$ receptor gene in Korean population to minimize the effect of racial differencies in gene frequencies. In schizophrenics, the numbers of schizophrenics with A1A1, A1A2, A2A2 were 9(29.0%), 15(48.4%) and 7(22.6%) respectively and in alcoholics with A1A1, A1A2, A2A2 were 14(21.5%), 36(55.4%) and 15(23.1%) respectively and in drug addiction with A1A1, A1A2, A2A2 were 2(11.1%), 10(55.6%) and 6(33.3%) respectively and in controls with A1A1, A1A2, A2A2 were 4(7.6%), 24(46.2%) and 24(46.2%) respectively. The prevalence of the A1 allele in schizophrenics, alcoholics, drug addiction and controls were 77%, 76.9%, 67% and 53.8% respectively. And the frequency of the A1 allele in schizophrenics, alcoholics, drug addiction and controls were 0.53, 0.49 0.39 and 0.31 respectively. There was significant difference in the frequency of the A1 allele between schizophrenics, alcoholics and controls. We also classified our alcoholic population. For classification by severity, we used the median MAST score 30 in our samples. There was also significant difference in the frequency of the A1 allele between less severe group(0.42) and more severe group(0.57). This data suggest that the A1 allele is associated with schizophrenia and alcoholism in Koreans. Furthermore the prevalence of the A1 allele increassed in more severely affected alcoholics. The authors conclude that our data support an allelic association between the A1 allele at dopamine $D_2$ receptor and schizophrenia, alcoholism. These results suggest the A1 allele of the $DRD_2$ gene is associated with a number of behavior disorders in which it may act as a modifying gene rather than as the primary etiological agent.
Sweet and taste modifying proteins are natural alternatives to synthetic sweeteners and flavor enhancers, and have been used for centuries in different countries. Use of these proteins is limited due to less stability and availability. However, recent advances in biotechnology have enhanced their availability. These include production of sweet and taste modifying proteins in transgenic organisms, and protein engineering to improve their stability. Their increased availability in the food, beverage or medicinal industries as sweeteners and flavor enhancers will reduce the dependence on artificial alternatives. Production of transgenic plants using sweet and taste modifying genes, is an interesting alternative to the extraction of these products from natural source. In this review paper, we briefly describe various sweet and taste modifying proteins (such as thaumatin, monellin, brazzein, curculin and miraculin), their properties, and their application for plant development using biotechnological approaches.
세균의 항균제 내성율은 지난 몇십년 동안 지속적으로 상승하였으며 mobile genetic elements를 통한 항균제내성인자들의 전파는 다제내성세균의 출현 및 확산을 가중시켰다. 본연구에서는 임상검체에서 분리된 aminoglycoside에 비감수성 대장균 33주를 대상으로 mobile genetic elements를 통해 전파될 수 있는 aminoglycoside 내성인자를 조사하였다. 16S ribosomal RNA methyltransferases (RMTases)와 aminoglycoside-modifying enzyme (AME)유전자가 PCR과 DNA 염기서열분석을 통해 검출되었다. 그 결과 aac(3')-II 유전자(54.5%)를 포함하고 있는 균주가 제일 많았으며 그 다음으로 aph(3')-Ia 유전자(18.2%)가 많았고 aac(6')-Ib 유전자(15.2%)를 포함하는 균주도 있었다. RMTase 유전자는 본 연구에서는 검출되지 않았다. aac(3')-II 유전자를 포함하고 있는 18균주 중 17균주가 gentamicin에 내성을 보였으며 이중 16균주는 tobramycin에도 내성을 보였다. aac(6')-Ib 유전자를 포함하고 있는 5균주는 모두 tobramycin에 내성을 보였다. 본 연구에서 AME 유전자를 획득하는 것은 사람에서 분리된 대장균이 aminoglycoside에 내성을 나타내는 중요한 기전 중 하나임이 확인되었다. 사람으로부터 분리된 세균을 대상으로 지속적으로 항균제 내성인자를 조사하는 것은 내성세균의 확산을 막는데 필요할 것으로 사료된다.
Overproduction of intracellular ${\beta}$-glucosidase was attempted by modifying the promoter region of a ${\beta}$-glucosidase gene cloned from Cellulomonas fimi and expressing it in Bacillus subtilis DB 104. A strong engineered promoter, BJ27UΔ88, was fused to the ${\beta}$-glucosidase gene after removing its native promoter. An effective Shine-Dalgamo sequence (genel0 of phage T7) was inserted between the promoter and the ${\beta}$-glucosidase structural gene. The modified gene was overexpressed in B. subtilis and produced 1121.5 units of ${\beta}$-glucosidase per mg protein which is about $12\%$ of total intracellular protein. Secretion of overproduced intracellular ${\beta}$-glucosidase was attempted by using the signal sequence of the Bacillus endoglucanase gene as well as an in-frame hybrid protein of endoglucanase. The hybrid protein was normally secreted into the culture medium and still retained ${\beta}$-glucosidase activity.
International Journal of Industrial Entomology and Biomaterials
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제1권1호
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pp.53-58
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2000
A cDNA encoding the luciferase of firefly Luciola lateralis was cloned downstream from the polyhedrin gene promoter of Bombyx mori nucleopolyhedrovirus and expressed in B. mori cells (BmN-4). The coding soquence for luciferase was inserted into pBmKSK2 rectors) which was reconstructed from the polyhedrin-based transfer vector pBmKSKl by modifying cloning sites. Recombinant virus, BmK2-LUCDF, containing the luciferase gene was selected and purified in BmN-4 cells. The emission of luminescence by luciferase was only detected in BmK2-LUCDF-infected cell extracts. This result indicates that the cloned new luciferase gene of firefly L. lateralis can be expressed efficiently in baculovirus expression system and used as a useful reporter gene.
Hyoung Ju Lee;Sang-Moo Lee;Minseo Choi;Joo Hwan Kwon;Seon-Woo Lee
The Plant Pathology Journal
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제39권5호
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pp.417-429
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2023
Ralstonia solanacearum species complex (RSSC) is a soil borne plant pathogen causing bacterial wilt on various important crops, including Solanaceae plants. The bacterial pathogens within the RSSC produce exopolysaccharide (EPS), a highly complicated nitrogencontaining heteropolymeric polysaccharide, as a major virulence factor. However, the biosynthetic pathway of the EPS in the RSSC has not been fully characterized. To identify genes in EPS production beyond the EPS biosynthetic gene operon, we selected the EPS-defective mutants of R. pseudosolanacearum strain SL341 from Tn5-inserted mutant pool. Among several EPSdefective mutants, we identified a mutant, SL341P4, with a Tn5-insertion in a gene encoding a putative NDP-sugar epimerase, a putative membrane protein with sugar-modifying moiety, in a reverse orientation to EPS biosynthesis gene cluster. This protein showed similar to other NDP-sugar epimerases involved in EPS biosynthesis in many phytopathogens. Mutation of the NDP-sugar epimerase gene reduced EPS production and biofilm formation in R. pseudosolanacearum. Additionally, the SL341P4 mutant exhibited reduced disease severity and incidence of bacterial wilt in tomato plants compared to the wild-type SL341 without alteration of bacterial multiplication. These results indicate that the NDP-sugar epimerase gene is required for EPS production and bacterial virulence in R. pseudosolanacearum.
Locus control region (LCR) is a cia-acting element which regulates the transcription of genes in developmental stage and/or tissue-specific pattern. Typically, LCR consists of several DNase I hypersensitive sites (HSs), where the binding motifs for transcriptional activators are present. The binding of activators to the HSs recruits chromatin modifying complexes to the LCR, opening chromatin structure and modifying histones covalently through the locus. LCR forms close physical contact with target gene located at a distance by looping away intervening region. In addition, non-coding RNA is transcribed from LCR toward target genes in continuously acetylated active domain. These structural and functional features of LCR suggest that the LCR plays many roles in chromatin activation and transcriptional regulation.
벼(Oryza sativa L.)에서 세포 현탁 배양을 통한 miraculin 단백질의 생산을 위해 miraculin 유전자(AB512278)가 도입된 Agrobacterium tumefacience EHA105를 매개로 벼 캘러스에 형질전환하였다. 현탁배양세포주는 형질전환 캘러스를 이용하여 몇번의 선발과정 및 계대배양을 통해 선발하였고, 게놈 PCR 분석을 통해 miraculin 유전자가 벼 염색체에 안정적으로 도입된 것을 확인하였다. 또한, RT-PCR 분석을 통해 형질전환 세포주에서 도입된 miraculin 유전자가 과발현 되었다. 재조합 miraculin은 형질전환 현탁배양 HK-2 세포주에서 가장 높게 발현되어 total soluble protein (TSP) 대비 2.0%를 보였다. 이러한 결과는 형질전환 현탁세포배양이 miraculin과 같은 미각 수식 단백질의 대량생산 시스템을 구축하는데 이용 가능 할 것으로 사료된다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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