The combined effects of water-soluble fraction of Moschus (ME) and anti-tumor drug mitomycin C on the proliferation of human tumor cell-lines were estimated by MTT colorimetric assay. ME inhibited the proliferation of Hep G2, A540, HeLa, KHOS-NP and Balb/c 3T3 cells. Also, ME increased the cytotoxicity of mitomycin C on Hep G2, A549 and HeLa cells. In addition, ME enhanced the cell viability of murine splenocytes and human lymphocytes at the concentration of 100㎍/㎖. These results indicate that ME inhibits the proliferation of human tumor cells and increases the cytotoxicity of mitomycin C without cytoxicity on immune cells.
The immunopotenciating effects of ethanol extract, butanol fraction and petroleum ether extract of Korean Ginseng on the immunotoxicity of mitomycin C were investigated in mice. A single administration of mitomycin C induced an apparent but relatively transient reduction of spleen weight, hemagglutination titer, Arthus reaction, RFC and natural killer cell activity. Ethanol extract of Ginseng significantly restored spleen weight, HA titer, RFC and natural killer cell activity. Butanol fraction of Ginseng significantly restored HA titer, RFC and natural killer cell activity. Petroleum ether extract of Ginseng very significantly restored spleen weight, Arthus reaction, DTH, RFC and natural killer cell activity.
녹내장 누공수술의 대표적 수술인 섬유주절제술의 주된 실패요인인 여과포의 섬유화를 막아 수술성공율을 향상시키기 위해 항대사 물질인 Mitomycin C를 수술실패 위험이 높은 녹내장 환자 20명 25안을 대상으로 섬유주절제술중에 사용하여 섬유주절제술의 보조제로서의 Mitomycin C의 효과를 알아보았다. 전체 대상안의 수술전 평균 안압은 $38.6{\pm}6.6mmHg$였으며 수술 후 최종 평균안압은 $11.7{\pm}3.8mmHg$로 26.9mmHg의 안압감소를 나타내었다. 수술 성공율은 40세 이하의 원발광우각녹내장에서는 8안중 7안 (88%), 포도막염에 의한 속발 녹내장에서는 6안중 5안(83%), 신생혈관녹내장에서는 5안중 4안(80%)에서 성공하였고 유년녹내장과 과거 수술 기왕력이 있는 녹내장 및 무수정체녹내장에서는 6안 모두 (100%)에서 성공함으로서 전체적으로는 25안중 22안에서 성공하여 88%의 성공율을 나타내었다. 수술 후 시력 변화는 25안중 24안(96%)에서 수술전 시력에 비해 변함이 없거나 다소 호전되었으며 1안(4%)에서 시력 소실을 보였다. 술후 합병증은 전방출혈이 5안(20%), 얕은 전방이 4안(16%), 저안압증이 4안(16%), 점상각막염이 3안(12%), 결막봉합파열이 2안(8%), 낭포화된 여과포가 1안(4%), 맥락막 박리 1안(4%)에서 발생하였다. 결론적으로 섬유주절제술에서 Mitomycin C의 부가적 사용은 수술 실패 위험이 높은 녹내장에서 효과적이고 비교적 안전하게 사용할 수 있으나 장기간 경과 관찰을 통하여 안전하고 효과적인 사용법에 대한 다양한 연구가 필요할 것으로 사료된다.
To investigate the cytotoxicity and genotoxicity of the DNA alkylating agnet, mitomycin C and the antimetabolite, 5-Fluorouracil (5-FU) in cultured rat fibroblasts, the colorimetric assay of netural red (NR) for cytotoxicity and for genotoxicity, sister chromatid exchange (SCE) assay and the measurement of the rate of DNA synthesis were performed in cells cultured in media containing various concentrations of mitomycin C and 5-FU. The uptake ability of neutral red decreased does-dependently. NR90 and NR50 values of mitomycin C were 1.49 nM and 6.87mM and 5-FU were 38.4mM AND 284.4Mm respectively.
이 실험은 Ehrlich 종양세포를 이식한 후 5-fluorouracil, mitomycin 및 acriflavine-guanosin 복합제(AG60)을 투여하였을 때, 위점막 점액상피세포의 미세구조적 변화를 연구하고자 시행하였다. 실험동물로는 ICR생쥐를 사용하였으며 정상대조군 이외의 종양대조군, 5-fluorouracil, mitomycin C 및 AG60 투여군의 동물들은 샅부위 피부밑조직에 각각 $1{\times}10^7$의 Ehrlich 종양세포를 이식하였다. 각각의 실험군은 종양세포를 이식한 다음날부터 5-fluorouracil (30 mg/kg), mitomycin C ($400{\mu}g/kg$) 및 AG60 (30 mg/kg)을 격일 간격으로 한번씩 피부밑조직에 주사하였다. 종양대조군은 종양세포이식 후에 0.2 mL의 생리식염수를 피부밑조직에 주사하였고 정상대조군은 종양세포를 이식하지 않은 동물을 사용하였다. 종양대조군을 비롯한 실험군은 생리식염수 또는 각각의 약제를 격일 간격으로 7회씩 투여한 다음날, 에테르(ether) 마취하에 앞배벽을 열어 위조직을 절취하였다. 절취한 조직은 2.5% 글루타르알데히드(glutaraldehyde)-1.5% 파라포름알데히드(paraformaldehyde) 혼합액에 고정한 후, 1% 오스뮴사산화물(osmium tetroxide)용액에 다시 고정한 후 탈수과정을 거쳐 애럴다이트(araldite) 혼합액에 포매하였다. 포매된 위점막 조직은 얇은 절편을 만들었으며, 각 절편은 우라닐아세테이트(uranyl acetate)용액과 구연산납(lead citrate)용액으로 대조염색한 후, 전자현미경으로 비교 관찰하였다. 5-fluorouracil 투여군은 종양대조군에 비해 점액상피세포에 수초구조(myelin figure)가 자주 관찰되고, 분비과립이 세포질을 포함한 막성구조에 싸여 속공간으로 함께 분비되는 부분분비현상이 보일 정도로 손상을 받았다. 그리고 mitomycin C 역시 수초구조가 자주 관찰되고 분비과립을 함유한 세포질이 속공간으로 돌출되는 등의 미세구조적 변화를 보였다. 그러나 AG60의 경우는 수초구조와 다소포체가 비교적 자주 관찰되는 외에는 별다른 미세구조적 변화를 관찰할 수 없었다. 이상의 결과를 종합해보면 mitomycin C, 5-fluorouracil 및 AG60을 반복 투여 하면 위점막 점액상피세포의 분비기능이 억제되었음을 시사하는 미세구조적 변화를 보였다. 그러나 세포의 손상 정도가 mitomycin C와 5-fluorouracil 투여군에 비해 AG60 투여군에서 매우 경미하였으므로 AG60은 위점막 점액상피세포의 분비기능에 큰 손상을 주지 않는 약제라고 생각된다.
신생혈관녹내장에 대한 MMC 섬유주절제술의 효과와 그 예후에 영향을 미치는 요인에 대해 알아보고자 하였다. 신생혈관녹내장으로 진단하고 MMC 섬유주절제술을 시행한 55명, 62안을 대상으로 의무기록을 후향적으로 조사하였다. 수술 성공 여부의 기준은 술후 안압하강제 사용에 관계없이 술후 최종 안압이 21 mmHg이하이며 시력상실이 없는 경우를 성공으로 판정하였고, 술전 시력이 광각이상의 환자에서 광각이 소실된 경우와 광각무인 환자에서 안구위축이 발생한 경우 및 안압하강을 위해 추가적 녹내장수술을 시행한 경우는 수술실패로 판정하였다. 평균 $23.9{\pm}16.2$개월의 추적 관찰 후 전체 62안 중 37안(60%)이 수술성공으로 판정되었다. Kaplan-Meier 생존분석을 이용한 수술 후 6개월, 12개월, 24개월, 36개월의 누적 수술성공률은 각각 85%, 71%, 57%, 52%이었다. 당뇨망막병증이 있는 경우가 다른 원인을 가진 경우보다 수술성공률이 더 높았고(p=0.005), 범망막광응고술을 시행한 경우에서 시행하지 않은 경우보다 수술성공률이 더 높았다(p=0.015). 하지만, 범망막광응고술의 시행여부는 Cox proportional hazard regression 분석법에 의해 섬유주절제술 실패의 의미있는 위험인자로 작용하지는 않았다. 결론적으로 신생혈관녹내장은 원인질환이 당뇨망막병증의 경우 MMC를 사용한 섬유주절제술의 예후가 다른 원인질환에 의한 경우보다 양호하였으며, MMC를 이용한 섬유주절제술이 방수유출장치삽입술이나 모양체광응고술에 앞서 일차적 수술로 유용하다고 생각한다.
Bacillu circulans F-2를 포함한 B.circulans의 prophage와 bacteriocin을 검출하기 위하여, mitomycin C를 처리하고 전자현미경상, plaque 형성능(plaque-forming activity), 세균세포살균능(killing activtiy)을 실험했다. killing activity 양성균으로부터 서당밀도균배원심(sucrose gradient centrifugation)을 통해 bacteriophage-like particle의 존재를 확인하였다. 이들 입자들은 형태학적으로 phage tail 또는 T4 phage와 닮은 구조를 가지고 있었다.
Mitomycin C(MMC) has been used as an anticancer drug and behaves as an alkylating agent forming covalent cross-link between complementary strands of double strand DNA. The purpose of this research was to determine number of DNA adducts, formed in vivo by Mitomycin C, in mouse organs. DNAs from liver, lung, brain and pancreas were isolated and used for $^{32}P$-postlabelling. The labeled nucleotides were separated by 2D-TLC and subjected to autoradiography. Numbers of MMC-DNA adducts were 9,9,5,4 in liver, pancreas, lung and brain, respectively.
In this study, the micronucleus test with peripheral blood using acridine orange coated slides was evaluated in mice treated with mitomycin C(MMC) at doses of 0.5, 1.0 and 1.5 mg/kg body weight. The peripheral bloods were obtained at 0, 24, 48 and 72h after treatment. The frequencies of micronucleated reficulocytes(MNRET) in the MMC-treated groups increased dose-dependently, and showed a peak time at 48h after treatment. We also performed the sex differences of MNRET frequency in 0.5 mg/kg MMC treated group, and we observed no sex differences in this experiment. And we evaluated the usefulness of a direct acting clastogen, N-methyl-N-nitrosourea and a indirect acting clastogen, benzo(a) pyrene as the positive control in this supravital micronucleus test. They also caused a significant increase in MNRET frequencies. These results suggest that the supravital staining micronucleus test using MNRET can be useful tool to evalulate the quantitative and qualitative assessment of genotoxicity in vivo compared to classical in vivo micronucleus test using bone-marrow cells.
Potential antimutagenic activities of vegetable plants were investigated. 24 vegetables which are frequently consumed by Korean people were extracted with 70% ethyl alcohol to prepare the extract samples. Then those samples were added to the culture media containing mitomycin C($O.3\;{\mu}g/ml$) and the SOS-Chromotest was performed. Positive control, mitomycin C alone, showed about 330 units of ${\beta}$-galactosidase activities. Among 24 vegetable samples, Saxifraga oblougifolia Nakai (취나물, Saxifragaceae) and Platycodon grandiflorum A. De Candolle(도라지, Campanulaceae) showed 136 and 155 units, respectively when mitomycin C was treated. These results indicate that Saxifragae Herba and Platycodi Radix possess protecting action from mutagenic activity produced by mitomycin C.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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