토끼의 골격근 homogenate에서 23,000$\times$G, 60 분간의 원심분리와 얻은 근 microsome의 ATPase 활성, 근수축에 대한 이완작용, 및 Ca 의 흡수작용을 여러 가지 조건에서 측정하였다. ATPase 활성은 Ca++ Mg++ 양 이온의 존재에 의하여 활성화되며 , 5 mM Mg++ 의 존재하에서는 Ca++ 의 최적농도는 0.1mM이다. Oxalate의 존재하에서는 1 mM 의 Ca++ 이 최적농도이므로 oxalate의 작용은 불용성 Ca-oxalate의 작용은 불용성 Ca-oxalate를 microsome vesicle so 및 medium 내에 침전시켜 유리 Ca++ 농도를 저하시키는 것이라고 생각된다. Microsome의 이완작용은 조제후 120 시간까지 시간에 따라 감소되어 가나, 그이 ATPase 활성은 거의 변화가 없는 것으로 보아 Ca++ + Mg++ -의존성 ATPase 는 이완작용에는 직접 관련이 없는 것으로 해석된다. Oxalatedmlwhswo는 microsome의 Ca++ 흡수량을 현저히 증대시키며 동시에 흡수포화에 도달하는 시간을 지연시킨다. Oxalate의 이러한 효과도 Ca-oxalate의 형성에 기인하는 것으로 해석된다. Microsome 내에 축적되는 Ca 의 량은 ATP 농도가 커질수록 많아진다. 그러나 축적된 Ca 의 량과 ATP 농도사이에 화학정량론적 관계는 없는 것같다.
AEY의 acetone 추출물이 mouse liver microsome의 산화에 미치는 영향을 조사하였다. Mouse liver microsome에 함유된 단백질 AEY 처리가 CEY 처리구에 비해 상대적으로 7~48%정도가 증가하였다. 지방산 분석 결과, CEY 처리에 비해 AEY 처리구에서 stearic acid를 포함하는 포화지방산의 함량비가 상대적으로 높았으며, oleic acid, linoleic acid 등을 함유하는 불포화지방산의 함량비가 현저히 감소하였다. AEY 처리구는 F $e^{2+}$가 관여하는 Asc/F $e^{2+}$, NADPH/F $e^{+2}$ 를 산화유도물질로 사용한 경우에 TC와 비슷하거나 보다 강력한 항산화 효과를 보였다. ABIN이나 CuOOH가 산화유도물질로 작용할 시에는 AEY처리에 의해 유의성있는 항산화 효과가 나타나지 않았다.
항균제 nitrofurantion에 의한 폐독작용의 생화학적 기전을 규명하기 위한 연구 일환으로 in vitro에서 폐장 microsome 지질의 과산화 및 반응성 산소 radical $(O^{-}_{2}{\cdot},\;H_2O_2,\;OH{\cdot},\;^1O_2)$의 생성에 대한 nitrofurantion의 영향과 양자 간의 상호 관련성을 검토하였다. Nitrofurantion은 호기성 반응 조건에서 돼지 폐장 microsome의 NADPH 의존성 지질 과산화를 용량 의존적으로 증가시킬 뿐 아니라 $O^{-}_{2}{\cdot},\;H_2O_2$ 및 두 radical의 상호 작용으로 2차적으로 형성되는 $OH{\cdot}$의 생성 또한 촉진하였으며 $^1O_2$생성은 관찰되지 않았다. 이와 같은 폐장 microsome지질 과산화 증가는 SOD 및 catalase에 의하여 억제될 뿐만 아니라 $OH{\cdot}$ 제거 물질인 mannitol, thiourea에 의하여도 현저히 억제되었으며, $^1O_2$ 제거 물질에 의하여는 영향을 받지 않았던 한편 염기성 반응 조건에서는 nitrofurantoin에 의한 지질 과산화가 관찰되지 않았다. 이상의 결과로 미루어 보아 nitrofurantoin은 폐장 microsome의 NADPH 의존적이 반응성산소 radical $(O^{-}_{2}{\cdot},\;H_2O_2$ 및 $OH{\cdot})$의 생성을 증가시키며 이들 중 특히 $OH{\cdot}$ 에 의한 microsome막 지질 과산화를 촉진하는 것으로 결론지었고, 이와 같은 in vivo 현상은 nitrofurantion의 in vitro 폐독작용의 기전을 설명하는 일부가 될 것으로 사료하였다.
Using Ames'Salmonella/microsome system, mutagenicity of antirichomonal nitrofuran, nitroimidazole, and nitrothiazole derivatives was examined. Nitrofurantoin, nifuratel, furazolidone, metronidazole, nimorazole, ornidazole, and aminitrozole showed potent mutagenicity en $TA_100$ strain which is a base substitute mutant and contains R-factor plasmid pKM101 without microsomal enzyme activation. In addition, nifuratel, furazolidone, metronidazole, and ornidazole also induced frameshift mutation in $TA_98$ strain.
Paraquat 독성작용에 있어서 mitochondria의 잠재적인 역할을 평가하기 위하여, 이 약물의 산소 radical 생성과 지질과산화 반응에 미치는 영향을 mouse간의 submitochondrial particle 과 microsome에서 비교하여 보았다. Submitochondrial particle 사용시 NADH를, microsome 사용시 NADPH를 전자공여체로 이용한 경우 paraquat는 두 분획에서 superoxide anion과 hydrogen peroxide의 생성을 증가시켰다. 동일한 조건하에서 paraquat는 hydroxyl radical의 생성을 시사하는 methional로 부터 ethylene의 생성을 증가시켰다. 그러나, paraquat에 의한 이들 각각의 효과는 microsome에서 보다 submitochondrial particle에서 약간 낮았다. 한편, 두 분획 모두에서 paraquat는 지질과산화 반응을 촉진시켰다. Submitochondrial particle과 microsome에서의 Paraquat에 의한 지질과산화반응은 i) 두 분회에서 지질과산화는 SOD에 의해서 부분적으로 억제됨을 보였고, DETAPAC(iron chelator)에 의해서는 완전히 억제되었고, catalase와 hydroxyl radical scavenger에 의해서는 억제되지 아니하였으며, ii) 반응내 $ADP-Fe^{3+}$ 첨가로 paraquat에 의한 지질과산화는 더욱 증가되었지만 methional로 부터 ethylene 생성은 감소하여 hydroxyl radical 생성과 지질과산화 사이에는 상관성이 없음으로 보아 같은 기전을 통해 촉진됨을 알 수 있었고 이러한 촉진작용은 perferryl ion을 통하여 일어나리라 추측되었다. Submitochondrial particle에서 paraquat에 의해 촉진된 산소라디칼 생성과 지질과산화 반응은 p-hydroxymercuribenzoate(NADH dehydrogenase 억제제)에 의하여 억제되었으나 다른 respiratory chain 차단제들에 의해서는 거의 영향을 받지 않음으로 보아 mitochondria에서의 paraquat의 redox-cycling은 CoQ 보다는 NADH dehyrogenase와 관련이 있음을 시사하였다. 이상의 결과로 보아 산소 radical의 생성과 지질과산화를 유도하는 paraquat의 redox-cycling은 microsome에서와 마찬가지로 mitochondria에서도 일어나며, 이결과 생체내에서의 paraquat의 독작용에 관여함을 짐작할 수 있다.
본 연구에서는 미생물을 이용하여 개발한 발효 스쿠알렌의 안정성 향상을 위하여 마이크로좀-SQ20 (Microsome-SQ20)을 제조하고, 이에 대한 물리적 거동 및 특성과 효능효과에 대하여 연구하였다. 마이크로좀-SQ20의 외관은 투명한 액체로 고유의 냄새를 가지고 있었다. 색상은 무색이고, 비중은 0.928, pH는 5.82 (20%용액)로 화장품에 사용하는데 적합한 나노에멀젼이 형성되었다. 스쿠알렌의 주성분 함량은 20.05%로 안정하게 봉입이 된 것을 확인할 수 있었다. 마이크로좀-SQ20을 0.1% 수용액화하여 측정한 입자크기는 134.8 nm로 bluish한 유화상을 얻었다. F-SQ(Fermented squalene)과 MF-SQ(Microsome squalene)의 DPPH라디칼에 의한 항산화 효과는 각각 80.72%, 81.5%로, L-ascorbic acid와 비교하여 동등한 효과를 보였다. F-SQ 및 MF-SQ은 10 ppm에서 각각 150.3%, 129.9%의 세포생존율을 나타냈다. SQ, F-SQ, MF-SQ의 elastase 저해능은 10 ppm에서 각각 8.7%, 10.33%, 8.7%의 저해능력을 가지고 있음을 알 수 있었다. MMP-1 저해능력은 SQ, F-SQ, MF-SQ 모두 10 ppm에서 각각 1.55%, 41.44%, 31.79%를 나타내 F-SQ의 collagenase 저해능이 우수한 것을 알 수 있었다.
In this study, we experimented the influence of three herbal medicines, which are Saussurea lappa Clarke, Poncirus trifoliata Rafin, Citrus aurantium Linne, which are called 'Yigiyak(理氣藥)' on drug metabolizing enzyme cytochrome P450 3A4 in Human Liver Microsome. Above all, the reason for this study is that herbal medicines can be assumed that herbs might have interactions with drugs, other herbs, alcohol and chemicals whether those are much better synergy effects than expected effects when the medicine was treated alone or not. As a result, we showed that all of five traditional herbal medicines had no CYP 3A4 inhibition effect on 10, 20, 30, 40, $50{\mu}g/m{\ell}$ doses in Human Liver Microsome even Saussurea lappa Clarke showed a little inhibition as about 93% and 79% inhibition rate of control. However, this result are mostly not enough to prove that SLC has a CYP 3A4 inhibition effect. Moreover, it is not that those rates showed that those herbal medicines have CYP 3A4 induction effect. In conclusion, the result could support that those herbal medicines are more safe than chemical drugs even if this is the basic step to prove that result. Therefore, more specific studies to support this result, which are Kinetic study, cell and animal study then finally until clinical research, are required.
동면동물인 한국관박쥐(Korean greater horseshoe bat)와 비롱면 롱물인 토끼의 근소포체가 지니는 생리 및 근조직의 형태적 특징을 비교해 보고자 본 실험을 수행하여 다음과 같은 결론을 내렸다 Caffeine과 Mgcl2는 농도별로 처리하고, p연와 온도에 변화를 주는 등 각각의 생리조건하에서 한국관박쥐와 토끼 대흉근 근소포체 마이크로솜의 C32' 흡수정도가 다르게 나타났으며, Ca2'ATPase 활성 역시 상이함을 보였는데. 이로 미루어 보아 in vivo 상태에서 두 동물의 근소포체가 지니는 생리적 특성에 차이가 있을 것으로 추측된다. 형태학적 측면에서도 근심유의 수기와 미토콘드리아의 크기에 있어서 뚜렷한 차이를 발견할 수 있었는데. 이는 두 동물의 대흉근이 수행하는 운동의 종류와 관련이 있을 것으로 생각된다.
19 pesticides including 12 insecticides, 2 herbicides and 5 fungicides have been tested for mutagenic activity in the Salmonella/microsome system. It was found that insecticides, DDVP, Trichlorfon, Sumithion, Naled, fungicide, TMTD and herbicide NIP induced base substitute mutation and herbicide MO frameshift mutation. Mutagenicity of Sumithion and NIP was appeared only after rat microsomal enzyme activation and that of TMTD was increased after the microsomal enzyme activation.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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