1) In order to obtain a microbial strain having a strong yeast cell wall lytic activity, about 156 isolates capable of forming clear zones on baker's yeast-peptone-bouillon agar plate were obtained from soil, mud and water samples and a strain K-42 with the highest lytic activity was identified as Bacillus circulans. 2) Effect of carbon sources on the lytic enzyme production by the K-42 strain was in the decreasing order of maltose>glucan>xylose>control in 2-day culture and of lactose>galactose>glucan>control in 3-day culture. Effect of inorganic nitrogen sources was in the decreasing order of ammonium acetate>sodium nitrate>control in 2-day culture and of ammonium chloride>ammonium oxalate>control in 3-day culture, whereas organic nitrogen sources except milk casein showed an increase in 2-day culture and a decrease in 3-day culture. Synergistic effect of carbon sources and nitrogen sources was not observed. 3) The enzyme production by the K-42 strain was greatly affected by pH change of the culture medium, thus a high lytic activity could be maintained by keeping the pH range of $7{\sim}8$ and adding carbon or nitrogen sources. 4) Optimum conditions for the lytic activity of the K-42 strain were obtained at $pH\;7{\sim}8$ and $60^{\circ}C$ and the extent of hydrolysis toward heated yeast cell wall was 65%.
Spills of $M/V$ Hebei Spirit on $7^{th}$ December 2007 caused a seriously damage to the ecosystem of Korean coast. Of these, microbial communities (i.e., attached benthic micro-algae) were reported to be sentive to the environmental change so it can be used for ecological risk assessment. Our experiment was designed to examine the ecological risk assessments for oil pollutant using benthic attached algal community on the artificial substrates of acrylic plates. Field monitoring in the culture system was conducted in Jangmok Bay. The abundances of attached micro-algae on artificial substrates gradually increased with increasing of sampling times. Among them, diatoms were the most important colonizer of coastal water, with the genera $Cylindrotheca$ and $Navicular$ most abundant. In particular, developed the culture system has correctly measured qualitative and quantitative abundance of attached micro-algae because same acrylic plates as artificial substrates were used. Thus, this culture system may be directly applied to the ecological risk experiments of microbial community structure from oil pollutants.
Kim, Gwang Ho;Ahn, Dong-Gyu;Park, Jong Rak;Choi, Gang Hun;Kim, Jong Tye;Kim, Ki Won;Jeong, Sang Hwa
Journal of the Korean Society for Precision Engineering
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v.30
no.2
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pp.137-142
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2013
The indiscriminate use of the fossil fuel has caused serious environmental pollutions such as the shortage of energy and global warming. Microalgae have being emphasized as $3^{rd}$ generation biomass which makes the carbon dioxide reduce effectively as well as produces the biofuel. Large scale production of microbial biomass by continuous culture is a quite challenging issue, because off-line optimization strategies of a microbial process utilizing a model-based scheme give rise to many difficult problems. In this paper, the static and simple control method which was able to be applied in time-variant growth environment and large scale of algae culture was studied. The significant disturbances in on-line measurement of cell density were reduced by Savitzky-Golay FIR smoothing filter. Dunaliella salina was cultivated continuously in a flat panel photobioreactor by the on-off control of the turbidostat process.
Kim, Yeong-Jin;Cho, Hyo-Jin;Yu, Sun-Nyoung;Kim, Kwang-Youn;Kim, Hyeung-Rak;Ahn, Soon-Cheol
Korean Journal of Fisheries and Aquatic Sciences
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v.40
no.6
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pp.356-361
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2007
Recently, the development of various culture-independent identification techniques for environmental microbes has greatly enhanced our knowledge of microbial diversity. In particular, denaturing gradient gel electrophoresis (DGGE) of 16S rDNA fragments, generated using the polymerase chain reaction (PCR) is frequently used to examine the diversity of environmental bacterial populations. This method consists of direct extraction of the environmental DNA, amplification of the 200-600 bp 16S rDNA fragments with universal primers, and separation of the fragments according to their melting point on a denaturing gradient gel. In this study, we investigated the seaside microbial community in coastal areas of Busan, Korea, using culture-independent techniques. First, marine genomic DNA was extracted from seawater samples collected at Songjeong, Gwangahn, and Songdo Beaches. Then, PCR was used to amplify the bacterial 16S rDNA using universal primers, and DGGE was used to separate the amplified 500 bp 16S rDNA fragments. Finally, the tested 16S rDNA genes were further analyzed by sequencing. Based on these experiments, we found that DGGE analysis clearly showed variation among the regional groups. It can be used to monitor rapid changes in the bacterial diversity of various environments. In addition, the sequence analysis indicated the existence of many unculturable bacteria, in addition to Arcobacter, Pseudoaltermonas, and Vibrio species.
This research is performed for a biological control of Chinese cabbage clubroot, we isolated an antagonistic bacterium AC-3 against Plasmodiophora sp., causal pathogens of cabbage clubroot. The isolated strain was identified as Streptomyces sp. by culture morphology, biochemical reactions, and homology research based on l6S rDNA sequences. Streptomyces sp. AC-3 produced chitinase (9.3 units/$m\ell$) in culture broth. So Plasmodiophora sp. mycelia changed abnonnal swelling, curling and branching mycelia by Streptomyces sp. AC-3 culture. In a field infected by Plasmodiophora sp., the treatment of a organic fertilizer added 2% Streptomyces sp. AC-3 microbial inoculant, it resulted in about 50% reducing the severity of cabbage clubroot significantly on cabbage plants compared with treated organic fertilizer plants. Additional disease such as sclerotinia rot, fusarium wilt and pythium rot were also significantly reduced by the treatment of the organic fertilizer added Streptomyces sp. AC-3 microbial inoculant.
Insecticidal crystalline toxin producing Bacillus thuringiensis BT17 strain was isolated and identified as B. thuringiensis serovar colmeri by 16S rRNA analysis. BT17 strain produced crystalline ${\delta}$-endotoxin against to Lepidopteran larvae effectively on the culture broth of soybean meal and skim milk, $30^{\circ}C$ and 36 h shaking culture of 280 rpm. The maximum colony forming unit achieved when the culture was continued for 24 h, but the number of crystals increased until 36 h in the 200 L fermentor. Liquid type of biological insecticide product was made, and after 3 months storage in $20^{\circ}C$ the number of crystals was increased up to twice than beginning. Biocontrol effect of BT17 insecticide product was better in Plutella xylostella than in Spodoptera exigua, and the toxicity to animals was negligible.
Han, Jae Woo;Kim, Bomin;Oh, Mira;Choi, Jaehyuk;Choi, Gyung Ja;Kim, Hun
Mycobiology
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v.48
no.4
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pp.326-329
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2020
Valuable natural compounds produced by a variety of microorganisms can be used as lead molecules for development of new agrochemicals. Furthermore, high-throughput in vitro screening systems with specific modes of action can increase the probability of discovery of new fungicides. In the current study, a rapid assay tested with various microbes was developed to determine the degree of respiratory inhibition of Saccharomyces cerevisiae in two different liquid media, YG (containing a fermentable carbon source) and NFYG (containing a non-fermentable carbon source). Based on this system, we screened 100 fungal isolates that were classified into basidiomycetes, to find microbial secondary metabolites that act as respiratory inhibitors. Consequently, of the 100 fungal species tested, the culture broth of an IUM04881 isolate inhibited growth of S. cerevisiae in NFYG medium, but not in YG medium. The result is comparable to that from treatment with kresoxim-methyl used as a control, suggesting that the culture broth of IUM04881 isolate might contain active compounds showing the inhibition activity for respiratory chain. Based on the assay developed in this study and spectroscopic analysis, we isolated and identified an antifungal compound (-)-oudemansin A from culture broth of IUM04881 that is identified as Oudemansiella venosolamellata. This is the first report that (-)-oudemansin A is identified from O. venosolamellata in Korea. Taken together, the development of this assay will accelerate efforts to find and identify natural respiratory inhibitors from various microbes.
Feasibility of microbial culture media using by-product of salt fermented kanary was investigated. Gram negative strain, Escherichia coli, and Gram positive strain, Bacillus subtilis, and bioluminescent Photobacterium Phosphoreum were incubated with kanary by-Product media (KB media). Compared with LB media, KB media had enough carbon source, but lacked nitrogen source and growth factor. When 0.5% of peptone as a nitrogen source and 0.3% of yeast extract as nitrogen and growth factor source were fortified in KB media, the cell population rate was similar to LB media. Also, when 0.5% of yeast extract was fortified to KB media, it showed the same result as in LB media. The price of KB media with fortification of 0.5% peptone and 0.3% yeast extract, and 0.5% of yeast extract is only 46 and 19% of that of LB media, respectively. These results showed that kanary by-Product could be a good and cheaper bacterial culture media if small amount of nitrogen source and growth factor were added.
As the first stage of development of an artificial skin, fibroblasts were cultured in the collagen matrices to make a living dermal equivalent. Mouse embryonic fibroblasts were incorporated into a collagen matrices on plastic dishes containing concentrated DMEM culture media supplemented with sodium bicarbonate, hepes, antibiotics and fetal bovine serum. As the growth stimulation components, glycosaminoglycans were added: hyaluronic acid, chondroitin sulfate, heparin, chitosan were incorporated into the media at a concentration of either 1% or 5% w/w/ to collagen in order to investigate the effect on development of dermal equivalent. After the few days of incubation, gel matrics were contracted and firm dermal equivalent were formed. And the keratinocytes were cultured on top of dermal equivalent and make a three dimensional artificial skin tissue.
Culture-independent approaches, based on 16S rDNA sequences, are extensively used in modern microbial ecology. Sequencing of the clone library generated from environmental DNA has advantages over fingerprint-based methods, such as denaturing gradient gel electrophoresis, as it provides precise identification and quantification of the phylotypes present in samples. However, to date, no method exists for comparing multiple bacterial community structures using clone library sequences. In this study, an automated method to achieve this has been developed, by applying pair wise alignment, hierarchical clustering and principle component analysis. The method has been demonstrated to be successful in comparing samples from various environments. The program, named CommCluster, was written in JAVA, and is now freely available, at http://chunlab.snu.ac.kr/commcluster/.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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