Park, Seung-Won;Kang, Seok-Woo;Goo, Tae-Won;Kim, Seong-Ryul;Lee, Gwang-Gill;Paik, Soon-Young
BMB Reports
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제43권7호
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pp.480-484
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2010
The Bombyx mori Microarray Database (BmMDB; http://silkworm.swu.edu.cn/microarray) provides information for tissue-specific gene expression by using the whole-genome oligonucleotide microarray in the silkworm. We analyzed the tissue-specific expression patterns in the silk gland, fat body, and midgut five days of fifth instar larvae during the development of B. mori. To verify the tissue-specific expression, analysis was conducted using quantitative Real-time RT-PCR and the highly expressed endogenous Actin RNA as an intrinsic reference. Finally, we confirmed five genes, (sw15872, sw00692, sw20990, sw05300,and sw2250), out of 18 candidates expressed in two different tissues, which was consistent with the data published by Dr. Xiang's group, thereby supporting the BmMDB. Further studies for promoter regions of candidate genes can be applied in creating transgenic silkworms as biomedical insects for use in producing biomaterials, and to serve as well-characterized models for understanding the mechanism for the genetic regulation of tissue-specific development.
The oral cavity is humid environment mainly due to the continuous salivary flow. The reaction of oral mucosa to fluid flow is important for homeostasis and pathogenesis. The objective of this study is the screening the change of gene expression after the application of fluid induced shear stress (FISS) on the gingival fibroblast using cDNA microarray assay. The immortalized human gingival fibroblasts were grown and FISS was applied using a cone viscometer at a rotational velocity of 40 rpm, respectively for periods of 2 and 4 hours. The synthesis of cDNA was done from the extracted total RNA and cDNA microarray assay was done subsequently. The genes that showed over 1.6 in the Cy3/Cy5 or the Cy5/Cy3 value were regarded as genes influenced significantly by the FISS application ion (/M/>0.7). The " RUNX-1" was increased its expression in 2 hours group and " RUN and SH3 domain containing 1" was increased its expression in 4 hours group. The "CC020415", "cyclin L1", "interferon regulatory factor1", "early growth response 1", "immediate early response 2", and "immediate early response 3" genes were increased their expression in 2 and 4 hours after FISS application. In conclusion, we could find many genes that were probably related to the FISS application. Interestingly, most of them were placed in similar molecular pathways and these findings improve the reliability of chip data and usefulness in overall screening. From this experiment, we could find many items for further study and it will make improvement in the understanding of intracellular events in response to FISS.
PCD (programmed cell death) is important mechanism for development, homeostasis and disease. To analyze the gene expression pattern in brain cells undergoing PCD in response to serum deprivation, we analyzed the cDNA microarray consisting of 2,300 genes and 7 housekeeping genes of cortical cells derived from mouse embryonic brain. Cortical cells were induced apoptosis by serum deprivation for 8 hours. We identified 69 up-regulated genes and 21 down-regulated genes in apoptotic cells. Based on the cDNA microarray data four genes were selected and analyzed by RT-PCR and northern blotting. To characterize the role of UNC-51-like kinase (ULK2) gene in PCD, we investigated cell death effect by ULK2. And we examined expression of several genes that related with PCD. Especially GAPDH was increased by ULK2. Theses findings indicated that ULK2 is involved in apoptosis through p53 pathway.
Purpose: Under different culture conditions, periodontal ligament (PDL) stem cells are capable of differentiating into cementoblast-like cells, adipocytes, and collagen-forming cells. Several previous studies reported that because of the stem cells in the PDL, the PDL have a regenerative capacity which, when appropriately triggered, participates in restoring connective tissues and mineralized tissues. Therefore, this study analyzed the genes involved in mineralization during differentiation of human PDL (hPDL) cells, and searched for candidate genes possibly associated with the mineralization of hPDL cells. Methods: To analyze the gene expression pattern of hPDL cells during differentiation, the hPDL cells were cultured in two conditions, with or without osteogenic cocktails (${\beta}$-glycerophosphate, ascorbic acid and dexamethasone), and a DNA microarray analysis of the cells cultured on days 7 and 14 was performed. Reverse transcription-polymerase chain reaction was performed to validate the DNA microarray data. Results: The up-regulated genes on day 7 by hPDL cells cultured in osteogenic medium were thought to be associated with calcium/iron/metal ion binding or homeostasis (PDE1A, HFE and PCDH9) and cell viability (PCDH9), and the down-regulated genes were thought to be associated with proliferation (PHGDH and PSAT1). Also, the up-regulated genes on day 14 by hPDL cells cultured in osteogenic medium were thought to be associated with apoptosis, angiogenesis (ANGPTL4 and FOXO1A), and adipogenesis (ANGPTL4 and SEC14L2), and the down-regulated genes were thought to be associated with cell migration (SLC16A4). Conclusions: This study suggests that when appropriately triggered, the stem cells in the hPDL differentiate into osteoblasts/cementoblasts, and the genes related to calcium binding (PDE1A and PCDH9), which were strongly expressed at the stage of matrix maturation, may be associated with differentiation of the hPDL cells into osteoblasts/cementoblasts.
Benzo[a]pyrene is a representative ecotoxicant in marine environment and a model compound of polycyclic aromatic hydrocarbons, which has an ability to bioaccumulate in aquatic organisms. This study aimed to identify molecular biomarkers suitable for assessing environmental pollution using a microarray technique. We examined the effects of benzo[a]pyrene on gene expressions in the rockfish, Sebastes schlegeli. We constructed the subtractive cDNA library with hepatic RNA from benzo[a]pyrene-exposed and non-exposed control fish. From the library 10,000 candidate clones were selected randomly and cDNA microarray was constructed. We determined benzo[a]pyrene-responsive genes using a high-density microarray. Statistical analysis showed that approximately 400 genes are significantly induced or reduced by benzo[a]pyrene treatment ($2\;{\mu}m$). Especially gene expression changes of 4 candidate clones among the up- or down-regulated genes were investigated in 6, 12 and 24 hr BaP-exposed fish groups. Many methods have been developed to monitor marine environmental status, which depend on quantifying the levels of the toxic components in polluted seawater or on ecological accessing, such as species diversity or richness. However, those methods could not provide information on physiological or genetic changes induced by such environmental stresses. Comparing with the conventional methods, these data will propose that benzo[a]pyrene-responsive genes can be useful for biological risk assessment of polycyclic aromatic hydrocarbons on marine organism at molecular level.
cDNA microarray experiments permit us to investigate the expression levels of thousands of genes simultaneously and to make it easy to compare gene expression from different populations. However, researchers are asked to be cautious in interpreting the results because of the unexpected sources of variation such as systematic errors from the microarrayer and the difference of cDNA dye intensity. And the scanner itself calculates both of mean and median of the signal and background pixels, so it follows a selection which raw data will be used in analysis. In this paper, we compare the results in each case of using mean and median from the raw data and normalization methods in reducing the systematic errors with arm's skin cells of old and young males. Using median is preferable to mean because the distribution of the test statistic (t-statistic) from the median is more close to normal distribution than that from mean. Scaled print tip normalization is better than global or lowess normalization due to the distribution of the test-statistic.
Diethylnitrosamine (DEN) is a nitrosamine compound that can induce a variety of liver lesions including hepatic carcinoma, forming DNA-carcinogen adducts. In the present study, microarray analyses were performed with Affymetrix Murine Genome 430A Array in order to identify the gene-expression profiles for DEN and to provide valuable information for the evaluation of potential hepatotoxicity. C57BL/6NCrj mice were orally administered once with DEN at doses of 0, 3, 7 and 20 mg/kg. Liver from each animal was removed 2, 4, 8 and 24 hrs after the administration. The histopathological analysis and serum biochemical analysis showed no significant difference in DEN-treated groups compared to control group. Conversely, the principal component analysis (PCA) profiles demonstrated that a specific normal gene expression profile in control groups differed clearly from the expression profiles of DEN-treated groups. Within groups, a little variance was found between individuals. Student's t-test on the results obtained from triplicate hybridizations was performed to identify those genes with statistically significant changes in the expression. Statistical analysis revealed that 11 genes were significantly downregulated and 28 genes were upregulated in all three animals after 2 h treatment at 20 mg/kg. The upregulated group included genes encoding Gdf15, JunD1, and Mdm2, while the genes including Sox6, Shmt2, and SIc6a6 were largely down regulated. Hierarchical clustering of gene expression also allowed the identification of functionally related clusters that encode proteins related to metabolism, and MAPK signaling pathway. Taken together, this study suggests that match with a toxicant signature can assign a putative mechanism of action to the test compound if is established a database containing response patterns to various toxic compounds.
Shahdoust, Maryam;Hajizadeh, Ebrahim;Mozdarani, Hossein;Chehrei, Ali
Asian Pacific Journal of Cancer Prevention
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제14권1호
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pp.111-116
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2013
Background: Cigarette smoking is the major risk factor for development of lung cancer. Identification of effects of tobacco on airway gene expression may provide insight into the causes. This research aimed to compare gene expression of large airway epithelium cells in normal smokers (n=13) and non-smokers (n=9) in order to find genes which discriminate the two groups and assess cigarette smoking effects on large airway epithelium cells.Materials and Methods: Genes discriminating smokers from non-smokers were identified by applying a neural network clustering method, growing self-organizing maps (GSOM), to microarray data according to class discrimination scores. An index was computed based on differentiation between each mean of gene expression in the two groups. This clustering approach provided the possibility of comparing thousands of genes simultaneously. Results: The applied approach compared the mean of 7,129 genes in smokers and non-smokers simultaneously and classified the genes of large airway epithelium cells which had differently expressed in smokers comparing with non-smokers. Seven genes were identified which had the highest different expression in smokers compared with the non-smokers group: NQO1, H19, ALDH3A1, AKR1C1, ABHD2, GPX2 and ADH7. Most (NQO1, ALDH3A1, AKR1C1, H19 and GPX2) are known to be clinically notable in lung cancer studies. Furthermore, statistical discriminate analysis showed that these genes could classify samples in smokers and non-smokers correctly with 100% accuracy. With the performed GSOM map, other nodes with high average discriminate scores included genes with alterations strongly related to the lung cancer such as AKR1C3, CYP1B1, UCHL1 and AKR1B10. Conclusions: This clustering by comparing expression of thousands of genes at the same time revealed alteration in normal smokers. Most of the identified genes were strongly relevant to lung cancer in the existing literature. The genes may be utilized to identify smokers with increased risk for lung cancer. A large sample study is now recommended to determine relations between the genes ABHD2 and ADH7 and smoking.
본 논문에서는 유전자 사이의 상관계수가 높은 마이크로어레이 데이타에 대하여 제안하는 알고리즘을 통해 상관계수가 낮은 유전자들의 부집합을 만들고, 이에 대해 적합 함수를 통한 평가로 기존 방법론이 가지는 한계를 극복할 수 있도록 하였다. 기존 방법론은 개별 특징의 평가를 통해 중복 특징을 제거하며, 상관계수에 대한 고려가 없어 선택된 유전자 부집합들의 상관계수가 논은 문제가 있었다. 이에 따라 제안하는 알고리즘은 특징간의 관계를 평가하는 Feature Wrapping 기법을 활용하여, 추출된 유전자 부집합에 포함된 유전자 사이의 상관관계가 낮고, 클래스 구분력이 높은 특징을 갖도록 하였다.
The main aim of this study is to select the optimal set of genes from microarray cancer datasets that contribute to the prediction of specific cancer types. This study proposes the enhancement of the feature selection filter algorithm based on Joe's normalized mutual information and its use for gene selection. The proposed algorithm is implemented and evaluated on seven benchmark microarray cancer datasets, namely, central nervous system, leukemia (binary), leukemia (3 class), leukemia (4 class), lymphoma, mixed lineage leukemia, and small round blue cell tumor, using five well-known classifiers, including the naive Bayes, radial basis function network, instance-based classifier, decision-based table, and decision tree. An average increase in the prediction accuracy of 5.1% is observed on all seven datasets averaged over all five classifiers. The average reduction in training time is 2.86 seconds. The performance of the proposed method is also compared with those of three other popular mutual information-based feature selection filters, namely, information gain, gain ratio, and symmetric uncertainty. The results are impressive when all five classifiers are used on all the datasets.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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