Yun, Yeo Hong;Oh, Man Hwan;Kim, Jun Young;Kim, Seong Hwan
Journal of Microbiology and Biotechnology
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제27권5호
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pp.1010-1022
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2017
Hybrid histidine kinase is part of a two-component system that is required for various stress responses and pathogenesis of pathogenic fungi. The Tco1 gene in human pathogen Cryptococcus neoformans encodes a hybrid histidine kinase and is important for pathogenesis. In this study, we identified a Tco1 homolog, UmTco1, in the maize pathogen Ustilago maydis by bioinformatics analysis. To explore the role of UmTco1 in the survival of U. maydis under environmental stresses and its pathogenesis, ${\Delta}umtco1$ mutants were constructed by allelic exchange. The growth of ${\Delta}umtco1$ mutants was significantly impaired when they were cultured under hyperosmotic stress. The ${\Delta}umtco1$ mutants exhibited increased resistance to antifungal agent fludioxonil. In particular, the ${\Delta}umtco1$ mutants were unable to produce cytokinesis or conjugation tubes, and to develop fuzzy filaments, resulting in impaired mating between compatible strains. The expression levels of Prf1, Pra1, and Mfa1, which are involved in the pheromone pathway, were significantly decreased in the ${\Delta}umtco1$ mutants. In inoculation tests to the host plant, the ${\Delta}umtco1$ mutants showed significantly reduced ability in the production of anthocyanin pigments and tumor development on maize leaves. Overall, the combined results indicated that UmTco1 plays important roles in the survival under hyperosmotic stress, and contributes to cytokinesis, sexual development, and virulence of U. maydis by regulating the expression of the genes involved in the pheromone pathway.
복숭아순나방(Grapholita molesta)은 두 가지 주요 성페로몬 성분(Z-8-dodecenyl acetate and E-8-dodecenyl acetate)을 갖고 있다. 이 성페로몬 성분의 생합성 과정 분석은 포화지방산의 10번 탄소에 이중결합을 합성하는 불포화효소($10{\Delta}$ DES)가 종 특이적 광학이성체 형성에 필수적이라고 제시하였다. 그러나 이 효소의 분자적 특징에 대해서 분석되지 않았다. 본 연구는 복숭아순나방 성페로몬 샘의 전사체에서 $10{\Delta}$ DES로 추정된 불포화효소(Gm-comp1575)의 단백질 기능 영역을 분석하였다. Gm-comp1575 유전자는 370개의 아미노산 서열 정보를 암호하고 있으며 분자량은 약 43.2 kDa 그리고 등전위점(pI)은 8.77로 추정되었다. 이 불포화효소는 4개의 막투과영역을 지니고 있으며, 6개의 탄수화물 결합 위치가 아미노 말단과 세포내 영역에서 갖는 것으로 추정되었다. 분자계통분석은 Gm-comp1575가 다른 종에서 알려진 $10{\Delta}$ DES와 유사성이 높은 것으로 밝혀졌다. Gm-comp1575 전사체는 암컷 성페로몬 샘 및 다른 복부 조직에서 발현되었다. 이 유전자 발현에 대한 RNA 간섭 처리는 처녀 암컷으로 하여금 사과원에서 수컷을 유인하는 능력을 크게 감소시켰다. 이러한 결과는 Gm-comp1575가 복숭아순나방의 성페로몬 생합성과 관련이 있는 유전자라고 제시하고 있다.
복숭아순나방(Grapholita molesta (Busck))의 교미교란제인 SPLAT$^{(R)}$와 Isomate$^{(R)}$-ROSSO의 교미교란효과를 각각 영천과 경산 및 청송과 영주에서 조사하였다. 성페로몬 트랩을 이용하여 4월 말부터 5월 말까지 야외 집단의 발생정도를 조사한 결과, 네 지역에서 모두 월동세대 개체군이 발생함을 확인하였다. 두 가지 형태의 교미교란제는 분석시기 10일 전에 포장에 처리되었으며, 두 교미교란제 모두는 수컷의 성유인물 탐지능력을 억제시켰다. 그러나 이 두 가지 교미교란제를 비교하면 SPLAT 형태가 Isomate 형태보다 교란 효과가 높았다. 이러한 교미교란 효과는 조사기간 동안 복숭아순나방의 피해로 여겨지는 신초 피해를 억제하는 능력과 높은 상관성을 가졌다.
Hybrid histidine kinase is a part of two-component system that is required for various stress responses and pathogenesis of pathogenic fungi. In the present study, Tco1, a homologue of human pathogen Cryptococcus neoformans Tco1 encoding a hybrid histidine kinase, was identified in corn smut pathogen Ustilago maydis by bioinformatic analysis. To explore the role of Tco1 in the virulence of U. maydis, mutants in which the tco1 gene was partially deleted were constructed by allelic exchange. The U. maydis tco1 mutants did show unaltered growth rate on axenic medium but were unable to produce conjugation tubes and develop fuzzy filaments, resulting in impaired mating of compatible strains. The expression levels of prf1, pra1, and mfa1 which are involved in the pheromone pathway significantly decreased in the tco1 mutants. In inoculation tests to host, the tco1 mutants showed significantly reduced ability in the production of anthocyanin pigments and tumor development on maize leaves. Overall, the combined results indicated that Tco1 plays important roles in sexual development and virulence of U. maydis by regulating the expression of the genes involved in the pheromone pathway.
Cleisostoma scolopendrifolium is an orchid species solely pollinated by the male bee Megachile yasumatsui. Although C. scolopendrifolium is an endangered species in Korea, little is known about its pollination mechanisms or the profiles of its chemical attractants. This study provides evidence that the Cleisostoma orchid attracts male bees as pollinators by mimicking female mating signals. We found 13 hydrocarbons in the Cleisostoma orchid flower presumed to be involved in sex pheromone mimicry: five alkanes (tricosane, pentacosane, heptacosane, nonacosane, and hentriacontane), compounds of cuticular hydrocarbons which function as chemical cues for the recognition of mates and species in social insects; and eight alkenes ((z)-9-tricosene, (z)-9-pentacosene, (z)-11-pentacosene, (z)-9-heptacosene, (z)-11-heptacosene, (z)-9-nonacosene, (z)-11-nonacosene, and (z)-11-hentriacontene) which serve as sex pheromones in several insects. We suggest that these hydrocarbons play a key role in the pollination mechanism between Cleisostoma orchids and Megachile bees.
Thirty second parity sows of the synthetic Nepalese Pakhribas genotype were used to investigate factors which might improve the occurrence and expression of estrus. The experiment had two sequential elements. In part 1, a change in suckling pattern was applied during lactation, and in part 2, different estrus detection methods were evaluated after weaning. All sows received the same pattern of weaning, which imitated the progressive weaning system used in Nepalese villages. Piglets from each litter were weaned at three ages (6, 7 and 8 weeks of age) in the proportion of 0.5 at 6 weeks followed by 0.25 at each of the subsequent weanings. In the first lactation treatment, the suckling pattern was left undisturbed, similar to the practice used in the villages in which the remaining piglets after first weaning are allowed continuous suckling. In the other treatment, the remaining piglets after first weaning were allowed to suckle their sows only during the night, whilst in the day time (09:00-16:00) they were excluded from the sow but left free to roam around. After weaning, estrus detection procedures were carried out in the absence or presence of two different boar stimuli: a synthetic boar pheromone spray or fresh boar urine. These were applied sequentially in a sequence of testing that alternated for each sow on a daily basis. The weaning to re-mating interval was significantly longer for the unrestricted suckling treatment. All sows were re-mated within 30 days after first weaning in the restricted suckling treatment groups, whereas only 71% of sows were re-mated within 30 days after weaning in the unrestricted suckling treatment groups ($x^2=3.877$, 1df, p<0.05). Both boar pheromone spray and boar urine increased the estrus detection probability, with no significant differences between the two stimuli treatments.
Park, Dae-Sik;Jeanette M., Mc-Guire;Heather L., Eisthen
Animal cells and systems
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제8권2호
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pp.81-87
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2004
Male red-spotted newts, Notophthalmus viridescens, use chemical cues to locate and select potential mates. To investigate whether large and small males respond differentially to chemical cues from conspecifics, we conducted a series of two-choice Y-maze tests with odorant stimuli from two large females (LF/LF), one large versus one small female (LF/SF), and one large female placed with four males versus one small female (LF+4M/SF). We found that males responded more rapidly in a LF/LF choice situation than in those involving LF/SF or LF+4M/SF. In addition, small males chose more quickly than did large males. These results suggest that both body size and odorant context affect the speed of odorant responses. By responding differentially to conspecific chemical cues, small males may arrive earlier at a courting area, increasing their chances of successfully guarding and mating with a female.
복숭아순나방(Grapholita molesta)은 핵과류과실에 일차 피해를 주는 해충이다. 이를 해결하기 위해 종합적병해충관리 [IPM]의 일환으로써 전세계적으로 교미교란제가 농가에 적용되고 있다. 왁스, 폴리에틸렌 튜브, 에어로졸 형태의 다양한 교미교란제가 상업화되었다. 이 연구에서는 복숭아순나방 성페로몬 방출기로써 에스테르왁스와 폴리프로필렌(PP)필름백을 구성하는 방출기를 기존의 파라핀 왁스와 폴리에틸렌(PE) 재질의 필름과 비교하여 페로몬의 방출거동을 분석했다. PE재질의 필름백은 성페로몬의 방출이 불규칙한 반면, PP필름백에서 성페로몬은 시간에 따라 일정하게 방출하는 패턴을 얻었다. 이러한 결과를 토대로 Japan 왁스_PP 필름 방출기(Japan_PP)를 제작하였고, 약 5개월 동안 복숭아과수원에 적용한 결과 98% 이상의 교미교란 효과가 검증되었다.
교미교란(mating disruption, MD) 기술이 사과에 피해를 주는 복숭아순나방(Grapholita molesta) 방제에 널리 사용되고 있다. 복숭아순나방과 복숭아순나방붙이를 동시에 교미교란(simultaneous MD, SMD)하는 기술이 최근에 개발되었다. 본 연구는 이 SMD 기술을 현장에 접목하는 데 필요한 요인들을 결정하기 위해 수행되었다. SMD 처리 농도를 결정하기 위해 각 처리 지점에 10 mg의 성페로몬을 여러 가지 밀도로 사과나무에 처리하였다. 처리된 세 농도 가운데 두 나무마다 하나의 SMD 처리가 비교적 안정적으로 MD 효과를 유지하였다. 이러한 SMD 효과는 왁스 및 polyethylene 제형 모두에서 나타났다. 두 사과나무마다 하나의 SMD 처리 농도로 3월 말에 1회 처리한 경우 수확기까지 복숭아순나방과 복숭아순나방붙이에 대해 효과적 교미교란을 유지시켰다. 인근 무처리 과수원에서 SMD 처리 과수원으로 이주하여 들어오는 교미된 암컷의 이입을 막기 위해 울타리 처리 기술이 적용되었다. 암컷 유인제를 개발하기 위해 6종류의 사과 과실 추출물에 포함된 화합물 가운데 terpinyl acetate (TA)가 선발되었다. 서로 다른 TA 농도 처리에서 0.05%가 성충 유인에 가장 효과적이었다. TA와 설탕을 혼합한 것을 암컷유살제(female attract-to-kill technique, FAKT)라 명명하였다. 사과 과수원 가장자리를 따라 6 m 간격으로 FAKT를 설치한 울타리 처리는 교미된 암컷을 포획하였고, 이들은 난황형성과정을 진행하고 있는 난모세포를 지니고 있었다. FAKT가 가미된 SMD 처리는 높은 MD 효율을 유지하는 것은 물론이고 SMD 단독 처리에 비해 신초 피해를 현격하게 줄였다.
We assessed the regulation of cryparin, a class II hydrophobin, using three representative mitogen-activated protein kinase (MAPK) pathways in Cryphonectria parasitica. Mutation of the CpSlt2 gene, an ortholog of yeast SLT2 in the cell wall integrity (CWI) pathway, resulted in a dramatic decrease in cryparin production. Similarly, a mutant of the CpBck1 gene, a MAP kinase kinase kinase gene in the CWI pathway, showed decreased cryparin production. Additionally, mutation of the cpmk1 gene, an ortholog of yeast HOG1, showed decreased cryparin production. However, mutation of the cpmk2 gene, an ortholog of yeast Kss1/Fus3, showed increased cryparin production. The easy-wet phenotype and accumulation of the cryparin transcript in corresponding mutants were consistent with the cryparin production results. In silico analysis of the promoter region of the cryparin gene revealed the presence of binding motifs related to downstream transcription factors of CWI, HOG1, and pheromone responsive pathways including MADS-box- and Ste12-binding domains. Real-time reverse transcriptase PCR analyses indicated that both CpRlm1, an ortholog of yeast RLM1 in the CWI pathway, and cpst12, an ortholog of yeast STE12 in the mating pathway, showed significantly reduced transcription levels in the mutant strains showing lower cryparin production in C. prasitica. However, the transcription of CpMcm1, an ortholog of yeast MCM1, did not correlate with that of the mutant strains showing downregulation of cryparin. These results indicate that three representative MAPK pathways played a role in regulating cryparin production. However, regulation varied depending on the MAPK pathways: the CWI and HOG1 pathways were stimulatory, whereas the pheromone-responsive MAPK was repressive.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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