The quality control of natural products is principal key to guarantee the Good Manufacturing Practices (GMP) and Good Clinical Practices (GCP) for the functional food, pharmaceuticals and cosmeceuticals in the industry. In this study, we examined the quantitative analysis of berberine as marker substance of Coptidis Rhizoma by high performance liquid chromatography-photodiode array detector (HPLC-DAD). The HPLC method was validated and met all the requirements for the quality control analysis recommended by FDA and ICH. The berberine was separated on a Xterra $C_{18}$ column ($5{\mu}m$, $4.6{\times}250mm$) using mobile phase consisting of distilled water and acetonitrile with $KH_2PO_4$ (3.4 g) and $Na_2SO_4$ (1.7 g). Calibration curve of berberine has been estimated (y = 42293.47x-41589 with the correlation coefficient 0.9999). The amount of berberine was calculated as 4.25%. And berberastine, palmatine, columbamine, jatrorrhizine, epiberberine, berberine and coptisine in the Coptidis Rhizoma were identified by high performance liquid chromatography - electrospray ionization-mass spectrometer (HPLC-ESI-MS) method.
In our previous study, we found uracil, adenosine, protocatechuic acid, syringin (eleutheroside B) and scoparone (6, 7-dimethoxycoumarin) in the Oplopanax elatus Nakai Stem. High-performance liquid chromatography (HPLC) -UV was used to quality and quantify the internal marker compounds in the O. elatus extract after validation of method with linearity, limit of detection (LOD), limit of quantitation (LOQ), accuracy and precision. The specificity assessment visually confirmed that the substance was detected without the introduction of other substances. The established method showed high linearity of the calibration curve and coefficient of correlation ($R^2$) of over the 0.999. HPLC was reported as five standard compounds equivalent using the following linear equation based on the calibration curve. The accuracy of measurement was 84.34 ~ 119.74% and the relative standard deviation (RSD) value was 0.28 ~ 1.60%. In addition, our established method showed high repeatability. The RSD value was 1.10 ~ 6.81%. So, we found the amount of the internal marker compounds in the O. elatus extract. These results demonstrated that can be used to quality evaluation of the O. elatus.
This study investigated the fate of dissolved organic matter (DOM) in a water reclamation facility (WRF) in Korea. The WRF consists of coagulation, sedimentation, microfiltration, and reverse osmosis (RO) components. The production capacity of WRF is 90,000 m3/day. The reclaimed water is reused as industrial water. We also characterized DOM in raw, processed, and finished waters based on analysis of dissolved organic carbon (DOC), ultraviolet absorbance at 254 nm (UVA254), fluorescence excitation emission matrix (FEEM), and DOC fractions via liquid chromatography-organic carbon detection (LC-OCD). Based on the results of DOC, UVA254, and FEEM analyses, neither the coagulation/sedimentation nor the microfiltration at the WRF effectively removed DOM. The RO process removed more than 94% of DOM. The raw water (i.e., secondary treated effluent obtained from a wastewater treatment plant) exhibited tryptophan-like peaks, which are a promising marker of wastewater, in the FEEM analysis. Coagulation and microfiltration failed to eliminate the wastewater marker, whereas RO completely removed it. The raw water also carried high levels (89.4%) of hydrophilic and low-molecular weight substances, which are difficult to remove via coagulation-sedimentation or microfiltration. Humic substance was a major component of the hydrophilic fractions. Based on the LC-OCD analysis, RO effectively removed the humic and polymeric materials from DOM.
In this study, baicalin, as a marker substance of Scutellariae Radix, was quantitatively analyzed by a high performance liquid chromatography-photodiode array detector (HPLC-DAD). We identified wogonoside, baicalein, and wogonin in the Scutellariae Radix by a high performance liquid chromatography-electrospray ionization-mass spectrometer (HPLC-ESI-MS). The baicalin was separated on a Xterra C18 column ($5{\mu}m$, $4.6{\times}250mm$) using mobile phase consisting of 38% acetonitrile in 0.68% phosphoric acid. The baicalin spectrum in the Scutellariae Radix extracts was coincided by comparing with UV-visible spectrum (200-550 nm) of baicalin standard in the library. The amount of baicalin in Scutellariae Radix was 10.46%, which is higher than KFDA's guideline. The marker substances of Scutellariae Radix showed a strong base peak $[M]^+$ in the positive detection mode following as; baicalin (m/z; $271[MH^+-sugar]^+$, $447[M+H]^+$), wogonoside (m/z; $285[MH^+-sugar]^+$, $461[M+H]^+$), baicalein (m/z; $271\;[M+H]^+$), wogonin (m/z; $285[M+H]^+$). These results are consistent with the fragment pattern and molecular weight of standard components from literature.
The influences of the acute hemorrhage on the intestinal functions were studied in the rabbits subjected to acute bleeding, amounting 1.5-2% of the body weight. The motility and the absorptive capacity of the ileum were compared before and after the bleeding. Transfusion of shed blood was also performed in order to see whether the deteriorations were reversible or not. The tension developed in the direction of the longitudinal axis of the ileum was recorded through an appropriate transducer, and the frequency of the rhythmic contraction was counted throughout the procedure. Test solution, 10ml in amount, was placed in the loop of the ileum, and the samples were drawn at zero time and at 20 minutes. Triplicated procedures were repeated on the same loop;namely, before and after bleeding and after transfusion. The test solution was composed of 200 mg% urea, 218 mEq/l of NaCl and 150 mg% of polyethylene glycol (PEG) No. 4,000 in distilled water. The latter substance was used as a marker substance for the volume change of the loop. The results obtained were as follows; 1. The motility of the ileum suffered little effects by acute hemorrhage. However, minor fluctuations were seen in the frequency of the rhythm, showing a slight tendency of decreasing rhythmicity, and it was reversed by transfusion. 2. Diminution of absorptive capacity of urea was noticed in acute hemorrhage and it was interpreted as the consequence of the secondary effect of the retardation of the active transport mechanism governing the sodium transport 3. Absorption rate of the sodium ion was dropped in the hemorrhage, suggesting the indispensable need of the blood supply. 4. Osmolarity of the luminal fluid remained higher in the case of acute hemorrhage. 5. There was a tendency of retaining more fluid in the intestinal lumen in acute hemorrhage, comparing with that observed prior to the bleeding. 6. The deteriorations in the absorptive capacity were restored by transfusion of shed blood.
Objectives : Allergy is an immune dysfunction caused by degranulation from mast cells in the early phase of allergic disease. The purpose of this study was to investigate the anti-allergic effect of fermented Angelicae gigantis Radix in human mast cell line, HMC-1. Method : The Angelicae gigantis Radix was fermented by Lactobacillus acidophilus. The cell toxicity of fermented Angelicae gigantis Radix(FAGR) was determined by MTT assay. The release of ${\beta}$-hexosaminidase from HMC-1 stimulated by phorbol-12-myristate 13-acetate (PMA) plus A23187 was determined by ${\beta}$-hexosaminidase assay. Also, the concentrations of cytokines (interleukin-$1{\beta}$, -6, -8 and tumor necrosis factor-alpha) were measured by enzyme-linked immunosorbent assay. The gene expression of COX-2 from HMC-1 stimulated by phorbol-12-myristate 13-acetate (PMA) plus A23187 was determined by reverse transcription polymerase chain reaction. The release of histamine on substance P-stimulated HMC-1 was measured by histamine assay. Result : The FAGR suppressed the release of ${\beta}$-hexosaminidase, a marker of degranulation, from HMC-1 stimulated by PMA plus A23187. The FAGR inhibited the production of interleukin-$1{\beta}$, -6, -8 and tumor necrosis factor-alpha. The FAGR inhibited the expression of COX-2 mRNA. The FAGR suppressed the release of histamine on substance P-stimulated HMC-1. Conclusion : These results provide that FAGR may be beneficial in the treatment of allergic inflammatory disease.
Objectives The aim of this study was to identify the effect of Baekho-tang extract on epidermal barrier recovery and inflammation relief in atopic dermatitis-induced mice through Endocanabinoid system (ECS) regulation. Methods In this study, we used 4-week-old NC/Nga mice were divided into 4 group: lipid barrier elimination group (LBEG), palmitoylethanolamide treated group after lipid barrier elimination (PEAT), Baekho-tang extract treatment group after lipid barrier elimination (BHTT) and control group (Ctrl). Each group was assigned 10 animals. We identified that cannabinoid receptor (CB) 1, CB2, CD (Cluster of Differentiation) 68, inducible nitric oxide synthase (iNOS), substance P and Matrix metallopeptidase 9 (MMP-9) through our immunohistochemistry. Results We discovered that when compared to PEAT, 8-hydroxydeoxyguanosine, a marker of oxidative stress in the epidermal barrier, and CB1 and CB2, markers of ECS modulation, were less activated in BHTT. These results led to an anti-inflammatory response in BHTT, with a significant decrease in several inflammatory mediators such as CD 68, iNOS, substance P and MMP-9 compared to PEAT and LBEG. Conclusions These results suggest that the Baekho-tang extract can reduce the inflammation of atopic dermatitis by restoring the structural damage of the skin lipid barrier through ECS modulation.
Objectives: We took breast milk samples and analyzed them using HPLC and LC/MS/MS, to evaluate the effects of taking Saenghwa-tang during breastfeeding on breast milk. Methods: The study participants were 20 lactating women who admitted in Korean medical postpartum care center. Breast milks were collected from paticipants who have been administrated Saenghwa-tang for more than 3 days. We used HPLC and LC/MS/MS for the determinations of amygdalin, liquiritins, 6-gingerol, decursin and decursinol angelate in Saenghwa-tang. Results: 1. Participants' $Mean{\pm}S.D$ (standard deviation) of age is $31.05{\pm}1.96$, and 15 participants had normal delivery and 5 participants had cesarean delivery. 12 participants were primipara and 8 participants were multipara. $Mean{\pm}S.D$ of lactating date is $9.4{\pm}0.94$. 2. Using HPLC, we learned LOQ level peak that matches the peak retention time of standard components of Saenghwa-tang was not detected from 20 breast milk samples. 3. Using LC/MS/MS, decursin of Angelicae Gigantis Radix was detected from HMSP 02, HMSP 04, HMSP 06, HMSP 11, and the each concentrations are 16, 2, 64, 11 ppb. Liquiritin of Glycyrrhizae Radix was not detected from HMSP 13~HMSP 18. Conclusions: Data obtained by this approach shows that this method is reliable and suitable for determining the safety of taking Saenghwa-tang during breastfeeding.
Kim, Se-Gun;Poudel, Amrit;Kim, Do-Kuk;Choi, Jong-Won;Park, Hee-Juhn;Lee, Young-Suk;Lee, Hyun-Sun;Min, Byung-Sun;Jung, Hyun-Ju
Natural Product Sciences
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제17권2호
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pp.117-122
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2011
We investigated the effect of Orostachys japonicus extracts on serum lipids, leptin and insulin level in hyperlipidemic rats. Also, diacylglycerol acyltransferase (DGAT) activity and thiobarbituric acid reactive substance (TBARS) were assessed. Inhibitory effect of DGAT related to triglyceride synthesis emerged approximately 96% in EtOAc fraction and showed 90% and 67%, respectively, in CHCl3 and BuOH fractions. Furthermore, the EtOAc and BuOH fractions inhibited 81% and 77%, respectively, in glycerol-3-phosphate acyl transferase (GPAT). Hyperlipidemia and obesity marker, contents of leptin and insulin on serum of hyperlipidemic rats, decreased 50% and 25%, respectively, compared with control group in treated EtOAc fraction. The oxidative stress marker, a concentration of TBARS, showed decrease of approximately 30% in treated EtOAc fraction. Moreover, high density lipoprotein (HDL)-cholesterol contents on serum of rats fed a hyperlipidemic diet were increased 10% and low density lipoprotein (LDL)-cholesterol decreased 50% as well as triglyceride amount of feces multiplied approximately two times more than control group in treated EtOAc fraction. The data suggest that the fractions of O. japonicus may be a potent biomaterial for treatment of hyperlipidemia or obesity.
Purpose: To investigate the expression of malondialdehyde (MDA), lipid peroxidation marker for oxidative stress (OS), in autoimmune Sjögren's syndrome (SjS) by utilizing the SjS-prone C57BL/6.NOD-Aec1Aec2 (B6DC) mouse and the SjS patient plasma samples. Methods: The MDA concentrations in the lysates of the submandibular gland, liver, and serum samples from the SjS-prone B6DC mouse model were compared with those from the C57BL/6J as a control. A thiobarbituric acid reactive substance (TBARS) assay kit was used to measure MDA. Plasma samples from five SjS patients and five control subjects were also evaluated. Results: The MDA concentrations in experimental animals and controls were not significantly different. There were no significant differences between the plasma of SjS patients and of controls. Conclusions: The expression of MDA was investigated in the organs from the SjS-prone B6DC mouse for the first time and in the plasma samples of SjS patients. No significant differences were observed between SjS and control samples when MDA was the target molecule with the TBARS assay. MDA may not be a reliable marker to measure OS contrary to the published studies involving OS of SjS.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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