Several skin sensitizers, like 2,4-dinitrofluorobenzene (DNFB), are known to provoke contact hypersensitivity responses after topical application. Here, we show that DNFB can upregulate macrophage inflammatory protein-2 (MIP-2) expression in RAW 264.7 cells via a mechanism that is largely dependent on mitogen-activated protein kinase (MAPK) signaling pathways. ELISA-based transcription factor activation assays and chromatin immunoprecipitation assays revealed that functional interaction between AP-1 and MIP-2 promoter element is necessary for MIP-2 gene expression by DNFB. Interestingly, topical application of DNFB to NC/Nga mice increased MIP-2 expression in dermis, suggesting that MIP-2 contributes to the leukocyte infiltration associated with atopic dermatitis. These results provide additional insight of the mechanism of contact hypersensitivity induced by contact sensitizers.
Youn, Cha Kyung;Park, Seon Joo;Lee, Min Young;Cha, Man Jin;Kim, Ok Hyeun;You, Ho Jin;Chang, In Youp;Yoon, Sang Pil;Jeon, Young Jin
Biomolecules & Therapeutics
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v.21
no.4
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pp.258-263
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2013
We demonstrate herein that silibinin, a polyphenolic flavonoid compound isolated from milk thistle (Silybum marianum), inhibits LPS-induced activation of macrophages and production of nitric oxide (NO) in RAW 264.7 cells. Western blot analysis showed silibinin inhibits iNOS gene expression. RT-PCR showed that silibinin inhibits iNOS, TNF-${\alpha}$, and $IL1{\beta}$. We also showed that silibinin strongly inhibits p38 MAPK phosphorylation, whereas the ERK1/2 and JNK pathways are not inhibited. The p38 MAPK inhibitor abrogated the LPS-induced nitrite production, whereas the MEK-1 inhibitor did not affect the nitrite production. A molecular modeling study proposed a binding pose for silibinin targeting the ATP binding site of p38 MAPK (1OUK). Collectively, this series of experiments indicates that silibinin inhibits macrophage activation by blocking p38 MAPK signaling.
During the screening for inhibitors of nitric oxide production in LPS-activated macrophage, RAW 264.7 cells, two coumarins were isolated from chloroform extract of the root of Polygonum cuspidatum. They were identified as decursin (1) and decursinol angelate (2) on the basis of spectroscopic methods. The $IC_{50}$ values of these compounds on NO production were $0.76\;{\mu}M$ (1) and $2.6\;{\mu}M$ (2), respectively. However, the iNOS activity was not inhibited by treatment with these compounds. Their inhibitory effect on NO production seems to result from the suppression of iNOS induction through the suppression of NF-kB activity.
This research was undertaken to find the in vitro inflammatory action of the essenetial oil (CS-oil) extracted from Chrysanthemum sibiricum (Compositae) herbs. We investigated the effects of the CS-oil not only on the formation NO, $PGE_2$, and $TNF-{\alpha}$ but also on inducible nitric oxide synthase and cyclooxygenase-2 (COX-2) in lipopolysaccharide (LPS)-induced murine macrophage RAW 264.7 cells. The data obtained were consistent with the modulation of iNOS enzyme expression. A similar fashion was also observed when LPS-induced $PGE_2$ release and COX-2 expression were tested. The significant inhibitory effects were shown in concentration-dependent manners. In addition, CS-oil also mildly but significantly reduced the formation of TNF-a. These findings support the application of CS-oil as an antiinflammatory essential oil.
Lee Seok Won;Lee Soo Jin;Park Jeon Ran;Kim Ha na;Ahn Kyoo Seok;Kim Jung-Hyo;Baek Nam-in;Kim Sung Hoon
Journal of Physiology & Pathology in Korean Medicine
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v.18
no.1
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pp.230-235
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2004
We previously reported that the phytoprotein extracted from Acanthopanax senticosus (PA) had anti-carcinogenic anti-metastatic activity via increase of inhibition of gap junctional intercellular communication. In the present study investigated the immunomodulatory mechanism of phytoprotein isolated from the stem bark of Acanthopanax sentic (PA). PA was found to significantly stimulate macrophages producing TNF-α and IL-1β in vitro. It also showed tumori activity indicating that PA had the ability to stimulate macrophage directly. Moreover, PA induced the CDB/sup +/ CTL cy responses to recognize antigen on the B16-BL6 melanoma cells. Treatment of PA with B16-BL6 melanoma cells increased the proliferation of splenocytes compared with untreated control. These results demonstrate that PA immunomodulatory activity suggesting a useful anti-tumor agent applicable to treatment and prevention of cancer.
Kim, Jun Ho;Kim, Mi-Yeon;Kim, Jong-Hoon;Cho, Jae Youl
Biomolecules & Therapeutics
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v.23
no.5
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pp.414-420
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2015
Flavonoids, such as fisetin (3,7,3',4'-tetrahydroxyflavone), are plant secondary metabolites. It has been reported that fisetin is able to perform numerous pharmacological roles including anti-inflammatory, anti-microbial, and anti-cancer activities; however, the exact anti-inflammatory mechanism of fisetin is not understood. In this study, the pharmacological action modes of fisetin in lipopolysaccharide (LPS)-stimulated macrophage-like cells were elucidated by using immunoblotting analysis, kinase assays, and an overexpression strategy. Fisetin diminished the release of nitric oxide (NO) and reduced the mRNA levels of inducible NO synthase (iNOS), tumor necrosis factor (TNF)-${\alpha}$, and cyclooxygenase (COX)-2 in LPS-stimulated RAW264.7 cells without displaying cytotoxicity. This compound also blocked the nuclear translocation of p65/nuclear factor (NF)-${\kappa}B$. In agreement, the upstream phosphorylation events for NF-${\kappa}B$ activation, composed of Src, Syk, and I${\kappa}B{\alpha}$, were also reduced by fisetin. The phospho-Src level, triggered by overexpression of wild-type Src, was also inhibited by fisetin. Therefore, these results strongly suggest that fisetin can be considered a bioactive immunomodulatory compound with anti-inflammatory properties through suppression of Src and Syk activities.
Aloe is a popular and effective agent used to cosmetic ingredient. It could replace artificial pigment on make-up base product and it is highly probable that might be useful as ingredients of multi-functional color cosmetic. In this study, we made a makeup base containing aloe extract and tested the effectiveness, safety and stability. Contents of polyphenol and flavonoid from the aloe extract were measured. To determine the antimicrobial effect from the aloe we used the paper disc diffusion method. We assessed the safety of make-up base containing aloe to cultured macrophage RAW 264.7 cells by MTT assay. Polyphenol contents of aloe extract and flavonoid respectively were 48 mg/g and 10 mg/g, in the 10 % concentration aloe extract. In case of aloe make-up base, the clear zone against Stapylococcus epidermidis was 9~11 mm and Stapylococcus aureus was also 9~11 mm. Growth activity of macrophage RAW 264.7 cells was over 80% in all concentration of make-up base containing aloe and general make base product. In conclusion aloe extract may be able to substitute the synthetic pigments and considered to be uses for ingredients multi-functional color cosmetic's ingredient.
Journal of the Korean Society of Food Science and Nutrition
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v.29
no.2
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pp.307-311
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2000
The purpose of this study was to identify excellent immune-enhancing substance from Korean wheats(Eunpa, Gueru, Alchan, Topdong, Suwon 267, Gobun) compared with imported ones(Australian standard white, ASW; Dark northern spring, DNS). Phagocytic activities of PBS (phosphate buffered saline, pH 7.4) and EA(ethanol-acetic acid) extracts from the wheats were determined using mouse macrophage J774 cell line. In order to set the optimal experimental condition up, the cultured cells were tested in varying experimental conditions. About two to five times higher phagocytic activity was shown in EA extract of Korean wheats compared to that of imported wheats. PBS extracts of wheats did not show increased phagocytic activity compared to control that did not add any extract. The EA extract of Gobun wheat showed the highest phagocytic activity. From the experiment we found that the optimal experimental condition was shown in two hours of reaction time and 0.05mg amout of EA extract added to J774 cells.
The Journal of Korean Medicine Ophthalmology and Otolaryngology and Dermatology
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v.23
no.1
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pp.75-93
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2010
Objectives : This study was carried out to investigate the effects of Phellinus igniarius Quel extract on the Anti-inflammatory, Anti allergy, Anti-oxidant and Anti-wrinkle. Methods : To investigate in vitro anti-oxidant activity assay, ethanol extracts of medicinal plants tested by DPPH method. In the next experiment, to investigate anti-inflammatory test, the RAW 264.7 macrophage cells was cultured using DMEM including the 10% FBS. To study anti-allergic effect, we blended cultured Human Mast Cells(HMC-1), and then observe TNF-$\alpha$, IL-8 by ELISA Results : Phellinus igniarius Quel extract has the effects of anti-inflammation and anti-allergy, which may be due to its inhibitory potential on the macrophage activation. Furthermore, Phellinus igniarius Quel extract has the anti-wrinkle effects through the inhibitory potential on the collagnease, elastase and gelatinase activities. Conclusions : The above results suggest that Phellinus igniarius Quel extract could be applicable for improvement of several skin functions.
This study was designed to investigate the intracellular signaling pathways and immunoenhancing effect of macrophage activation by crude polysaccharides (CPP) extracted from citrus peels. CPP did not affect the cytotoxicity of RAW264.7 cells, but showed dose-dependent effects on cell viability. Also, CPP showed high production of chemokine (nitric oxide (NO)) and cytokines (interleukin (IL)-6 and tumor necrosis factor (TNF)-α). CPP increased IL-6, TNF-α, and inducible nitric oxide synthase (iNOS) mRNA expression dose-dependently. CPP also strongly induced the phosphorylation of the ERK, p38, and IκBα pathways in RAW 264.7 cells. In anti-pattern recognition receptors (PRRs) experiments, the effect of CPP on NO production was strongly suppressed by neutralizing toll-like receptor (TLR)2, TLR4, and Dectin1 antibodies, whereas IL-6 and TNF-α production by CPP was mainly suppressed by mannose receptor (MR). Therefore, these results suggest that CPP treatment-induced NO production was regulated by the ERK, p38, and NF-κB pathways through TLR2, TLR4, and Dectin1 receptors, whereas IL-6 and TNF-α production was primarily regulated by the ERK, p38, and NF-κB pathways through MR receptors.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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