Western blot analysis was performed to diagnose vivax malaria using stage-specific recombinant antigens. Genomic DNA from the whole blood of a malaria patient was used as templates to amplify the coding regions for the antigenic domains of circumsporozoite protein (CSP-1), meroxoite surface protein (MSP-1), apical merozoite antigen (AMA- 1), serine repeat antigen (SERA), and exported antigen (EXP- 1) of Plasmodium vivax. Each amplified DNA fragment was inserted into a pGEX-4T plasmid to induce the expression of GST fusion protein in Escherichia coli by IPTG. The bacterial cell extracts were separated on 10% SDS-PAGE followed by western blot analysis with patient sera which was confirmed by blood smear examination. When applied with patient sera, 147 (91.9%) out of 160 vivax malaria, 12 (92.3%) out of 13 falciparum malaria, and all 9 vivax/falciparum mixed malaria reacted with at least one antigen, while no reactions occurred with 20 normal uninfected sera. In the case of vivax malaria, CSP-1 reacted with 128 (80.0%) sera, MSP-1 with 102 (63.8%), AMA-1 with 128 (80.0%), SERA with 115 (71.9%), and EXP-1 with 89 (55.6%), respectively. We obtained higher detection rates when using S antigens (91.9%) rather than using each antigen solely (55.6 - 80%), a combination of 2 (76.3 - 87.5%), 3 (85.6 - 90.6%), or 4 antigens (89.4 - 91.3%). This method can be applied to serological diagnosis, mass screening in endemic regions, or safety test in transfusion of prevalent vivax malaria.
This study was conducted to investigate the quality of pumpkin paste added with different starches during storage at $4^{\circ}C$ for 8 days. Pumpkin paste was evaluated for pH, carotenoid, syneresis, color values, texture, and sensory characteristics. The properties of the pumpkin paste were studied on three different starches (CON: control, MCP: cow pea starch, MMB: mung bean starch, and MSP: sweet potato starch). The initial pH of the pumpkin paste with starches were 6.13~6.16. The pH of pumpkin paste increased as the starches added increased. The carotenoid content of CON was higher in the pumpkin paste processing. The change of syneresis significantly increased with the storage period, and the amount of change of MCP and MMB added with starch was smaller than CON without the added starch. The Hunter's L-values of the pumpkin paste increased, whereas the a- and b-value decreased as the amount of starches added increased. The results of the textural analysis showed that the hardness of MCP and MMB was different from that of other pumpkin paste, showing a lower value such as 38.26 g, 38.93 g, while CON and MSP was 40.43 g and 42.49 g, respectively. A sensory evaluation indicated that starches could enhance the overall texture characteristics of pumpkin paste. In terms of the overall acceptance of the pumpkin paste, the experimental group with MCP scored the best.
Lee, Jun Hee;Lee, Jung Wook;Jung, Kyung Sik;Kim, Ki Uk;Lee, Tae Kun;Lee, Kyung Woo;Na, Min-Ah;Jeon, Doo Soo;Choi, Young Min;Kim, Yun Seong;Lee, Min Ki;Park, Soon Kew
Tuberculosis and Respiratory Diseases
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v.55
no.4
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pp.378-387
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2003
Background : Promoter methylation of tumor suppressor genes is one of the key epigenetic changes in many human cancers. The aim of this study was to evaluate the promoter methylation status of the Death-associated protein(DAP) kinase gene, which played an important role in lung cancer, in the serum DNA of primary lung cancer patients. Methods : This study investigated the aberrant methylation of DAP kinase in the serum of 65 primary lung cancer patients by methylation-specific PCR (MSP). Results : Methylation in the serum was detected in 29 of 65(44.6%) for DAP kinase. There was no statistical association between methylation of DAP kinase and age, smoking history, histologic type, or stage. Methylation of DAP kinase was found more frequently in men (p=0.044). Conclusions : This study suggests that the aberrant methylation of the DAP kinase promoter is readily detectable in the serum DNA of lung cancer patients using MSP analysis.
Human infections due to the monkey malaria parasite Plasmodium knowlesi is increasingly being reported from most Southeast Asian countries specifically Malaysia. The parasite causes severe and fatal malaria thus there is a need for urgent measures for its control. In this study, the level of polymorphisms, haplotypes and natural selection of full-length pkmsp8 in 37 clinical samples from Malaysian Borneo along with 6 lab-adapted strains were investigated. Low levels of polymorphism were observed across the full-length gene, the double epidermal growth factor (EGF) domains were mostly conserved, and non-synonymous substitutions were absent. Evidence of strong negative selection pressure in the non-EGF regions were found indicating functional constrains acting at different domains. Phylogenetic haplotype network analysis identified shared haplotypes and indicated geographical clustering of samples originating from Peninsular Malaysia and Malaysian Borneo. This is the first study to genetically characterize the full-length msp8 gene from clinical isolates of P. knowlesi from Malaysia; however, further functional characterization would be useful for future rational vaccine design.
Seasonal differences of the cultivable bacterial communities associated with the marine sponge, Hymeniacidon sinapium, between spring and summer were analyzed through the Amplified Ribosomal DNA Restriction Analysis (ARDRA). For the cultivation of the bacterial isolates, modified Zobell and MA media were used. The 16S rDNA of individual strains were amplified and fragmented by using two restriction enzymes, HaeIII and MspI. As a result, 23 ARDRA types from the spring sponge and 28 types from the summer sponge were obtained. The partial sequencing result of 1 to 3 selected strains from each types showed over 94% similarities with the known species from the public database. The bacterial communities from the sponge, captured on spring, contained 4 phyla: Actinobacteria, Alphaproteobacteria, Gammaproteobacteria, and Firmicutes. There were 5 phyla observed from the bacterial communities associated with the sponge, captured on summer: Alphaproteobacteria, Betaproteobacteria, Gammaproteobacteria, Firmicutes, and Bacteroidetes. Gammaproteobacteria was predominant group in both spring and summer, accounted for 33.8% of total in spring and 67.4% in summer, showed increase pattern on summer. Because Firmicutes and Actinobacteria participated in 30.2% and 8.3% of the spring sponge while they represented only 6.9% and 0% of the summer sponge, both bacterial groups showed decrease drift on summer. Betaproteobacteria (4.7%) and Bacteroidetes (4.7%) were only observed on the sponge captured on summer. On the sponge, Hymeniacidon sinapium, more diverse bacterial communities were shown on summer than on spring, and even from the same sponge, there were seasonal differences.
Journal of information and communication convergence engineering
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v.12
no.3
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pp.145-153
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2014
The improvements of embedded processors make future technologies including wireless sensor network and internet of things feasible. These applications firstly gather information from target field through wireless network. However, this networking process is highly vulnerable to malicious attacks including eavesdropping and forgery. In order to ensure secure and robust networking, information should be kept in secret with cryptography. Well known approach is public key cryptography and this algorithm consists of finite field arithmetic. There are many works considering high speed finite field arithmetic. One of the famous approach is Montgomery multiplication. In this study, we investigated Montgomery multiplication for public key cryptography on embedded microprocessors. This paper includes helpful information on Montgomery multiplication implementation methods and techniques for various target devices including 8-bit and 16-bit microprocessors. Further, we expect that the results reported in this paper will become part of a reference book for advanced Montgomery multiplication methods for future researchers.
A replication initiation gene was identified and its nucleotide sequence has been determined from a 3.8 kb, chloramphenicol acethyltransferase conferring R-plasmid pSBK203 of Staphylococcus aures. Location of the replication related region of pSBK 203 was determined by interuption with pUC 119 at XBaI and MspI sites which resulted in inactivation of replication in Bacilius subtilis. Base sequence of this region revealed on open reading frame of 942 base pairs, which encoded a 314 amino acid protein. Base sequence homology with other rep of pT181 family plasmids such as pT181, pC221, pC223, pS194, pU112, and pCW7 was ranged from 78% to 97% and the predicted amino acid sequence homology was from 72% to 95%.
Genetic diversity among 27 isolates of Rhizoctonia solani, which were obtained from diseased crops in Korea and classified into 9 intraspecific groups by anastomosis test and cultural characteristics, was studied by PCR-RFLP. Gene regions of nuclear 17S ribosomal DNA and internal transcribed spacers including 5.8S rDNA of the isolates were amplified with polymerase chain reaction and digested with 12 restriction enzymes. Differences of restriction patterns were not shown among isolates within each intraspecific groups, however, each anastomosis group and culturala type sowed unique restriction fragment length polymorphisms by restriction patterns using HaeIII, Cfr13I and MspI. The results suggest that PCR-FRLP of rDNA using three restriction enzymes could be used to differentiate intraspecific groups of Rhizoctonia solani in Korea.
Purpose: Methylation of gene regulatory elements plays an important role in gene inactivation without genetic alteration. Gastric cancer is one of the tumors that exhibit a high frequency of CpG island hypermethylation. The purpose of this study was to investigate the occurrence of CpG island hypermethylation in gastric carcinoma in relation to H. pylori infection, CIMP and clincopathologic variables. Materials and Methods: We investigated the promoter methylation Status of six genes (hMLH1, p16, p14, COX-2, MGMT, E-cadherin) and CIMP in 36 gastric carcinoma tissues as well as in nontumor tissues. CIMP status was investigated by examining the methylation status of MINT 1, 2, 12, 25 and 31. The methylation status of the promoter was examined by methylation-specific PCR (MSP) and H. pylori infection was examined by histological diagnosis after staining with Warthin-Starry silver. Results: Among the 36 gastric carcinoma tissues, DNA hypermethylation was detected in the following frequencies: 14 (38.9%) for p14, 13 (36.1%) for p16, 8 (22.2%) for MGMT, 10 (27.8%) for COX-2, 21 (58.3%) for E-cadherin, and 6 (16.7%) for hMLH1. The frequencies for MINT1 and MINT25 hypermethylation were significantly higher in tumor tissues than in nontumor tissues. 16 (44.4%) of the 36 gastric carcinoma tissues were positive for the CIMP CIMP-H tumors were associated with older patients and larger tumor size than CIMP-L tumors. We found a significant association between the presence of the CIMP and hypermethylation of p16. Hypermethylation of p16 and MINT2 were significantly different when compared by age. MINT1 gene methylation was significantly associated with H. pylori infection (P=0.004). Conclusion: Our results suggest that aberrant hypermethylation of multiple tumor related genes (hMLH1, p16, p14, COX-2, MGMT, E-cadherin, MINT1, 2, 12, 25, 31) occurs frequently in gastric carcinoma tissues. The hypermethylation of MINT1 was significantly higher in the tumor tissues and was associated with H. pylori infection.
We isolated and cultured bacteria inhabiting solar saltern ponds in Taean-Gun, Chungnam Province, Korea. All of the isolated 64 strains were found to be moderately halophilic bacteria, growing in a salt range of 2-20 %, with an optimal concentration of 5% salt. Bacterial diversity among the isolated halophiles was evaluated via RFLP analyses of PCR-amplified 16S rDNAs, followed by phylogenetic analysis of the partial 16S rDNA sequences. The combination of restriction enzyme digestions with HaeIII, CfoI, MspI and RsaI generated 54 distinct patterns. A neighbor-joining tree of the partial 16S rDNA sequences resulted in the division of the 64 strains into 2 major groups, 45 strains of ${\gamma}-Proteobacteria$ (70.3%) and 19 strains of Firmicutes (29.7%). The ${\alpha}-Proteobacteria$ and Cytophaga-Flavobacterium-Bacterioides groups, which were repeatedly found to exist in thalassohaline environments, were not represented in our isolates. The ${\gamma}-Proteobacteria$ group consisted of several subgroups of the Vibrionaceae (37.5%), Pseudoalteromonadaceae (10.9%), Halomonadaceae (7.8%), Alteromonadaceae (7.8%), and Idiomarinaceae (6.3%). Members of Salinivibrio costicola (29.7%) were the most predominant species among all of the isolates, followed by Halobacillus treperi (12.5%). Additionally, three new species candidates were found, based on similarities of the 16S rDNA sequences to those of previously published species.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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