Our aim was to ferment soymilk using lactic acid bacteria that showed protease activity and to optimize the condition for fermentation. In total, 108 strains of protease-producing lactic acid bacteria were isolated from various fermented foods such as kimchi and jeotgal, and among them, 29 strains displaying the highest protease activity were selected for further study. From these 29 strains, strain MK1, whose protease activity was 126 $mU/mL{\cdot}min$, was selected as the optimal fermentation strain owing to its high ability to digest soymilk protein. It was henceforth labeled as Lactobacillus paracasei MK1. The optimum conditions for the fermentation of soymilk by using L. paracasei MK1 were determined to be as follows: 30 h of fermentation time at a temperature of $30^{\circ}C$, and at a pH of 6.0 in the initial growth medium.
Kim, Ha-Neui;Kim, Yu-Ri;Jang, Ji-Yeon;Choi, Yung-Hyun;Lee, Yong-Tae;Choi, Byung-Tae
Journal of Physiology & Pathology in Korean Medicine
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v.24
no.6
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pp.983-988
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2010
The present study aims to investigate a possible mechanism of electroacupuncture (EA) in the spinal dorsal horn that may underlie N-methyl-D-aspartate (NMDA) receptor-associated extracellular signal-regulated kinase (ERK) mitogen-activated protein kinase (MAPK) signaling pathways. The hot plate latency of the ipsilateral hindpaw of EA-treated rats was significantly decreased compared with complete Freund's adjuvant (CFA)-injected ones. The expressions of NR1 and NR2B subuint mRNA of NMDA receptor in the whole L4-5 segments are decreased by CFA treatment, but NR2B subunit was significantly recovered by EA treatment. When we detected the expression of ERK, there were no significant difference between normal and CFA-treated rats with EA or NMDA receptor antagonist MK801. But phosphorylated ERK expressions were markedly induced by CFA, but these inductions were significantly modulated by EA treatment. Although hosphorylation of ERK was also arrested by MK801, these inductions of CFA-injected rats was markedly inhibited only by co-treatment with EA and MK801. Phosphorylated cAMP response element-binding protein (CREB), ERK-related transcriptional factor, showed a significant increase in CFA-treated rats and this increase was slightly inhibited by EA and MK801 treatments. But immunoreaction for phosphorylated CREB were significantly increased by CFA treatment in the superficial laminae of the dorsal horn and these inductions were significantly arrested by co-treatment of EA and MK801. Consequently, the hyperalgesia induced by CFA are associated NMDA receptor and EA and MK801 may showed anti-hyperalgesia via same mechanism for inhibition of ERK and CREB phosphorylation in the dorsal horn.
This study was undertaken to evaluate a behavior-electroencephalogram (EEG) pattern relationship in pilocarpine- and kainic acid-induced convulsions of rats. Also we intended to examine the effect of a noncompetitive N-methyl-D-aspartate (NMDA) receptor antagonist, MK-801, and diazepam on the pilocarpine-induced behavioral and electrical seizures in rats. The electrical activities at frontal and hippocampal areas and behavior activities were measured in freely moving rats. At the beginning of the experiments, the rats displayed an exploratory behavior. This awake and moving phase with a low amplitude, irregular, 4-10 Hz wave was followed by a still phase. Pilocarpine (400 mg/kg, i.p.) and kainic acid (0.5 mg/kg, i.c.v.) induced tonic and clonic seizures. The pilocarpine-induced change in electrical activities exhibited a weak correlation with behavioral convulsion at all stages. The amplitude and duration of the electrical response were not linear with the degree of behavioral score. An application of MK-801 (dizocilpine, 7.5 mg/kg) did not affect the amplitudes of the convulsant-induced electrical activities, though the same dose of this drug caused the deformation of the electrical pattern. There was no effect of MK-801 on the behavioral and electrical activities as expected. Diazepam (1 mg/kg) did not affect the amplitude of the electrical activities induced by pilocarpine but changed the pattern of these activities. Our study shows that there is no linear relationship between degree of behavior and amplitude of electrical activities of convulsants. This may indicate that the NMDA receptor stimulation can be processed by the neocortical or hippocampal network in a different way between behavioral and electrical activities.
This study was conducted to investigate antioxidative and physiological activities of two stage fermented Chinese Yam (TSFCY) by Monascus sp. MK2 and Lactobacillus brevis HLJ59. The extracts from TSFCY were measured to examine pigments, monacolin K contents, total polyphenol and flavonoid contents, DPPH radical scavenging activity, reducing power, ACE inhibitory activity and GABA contents. In this study, the results show that Monascus sp. MK2 and Lactobacillus brevis HLJ59, with Dioscorea batatas Dence. As the substrate can produce pigments (yellow, orange and red), monacolin K contents, total polyphenol and flavonoid contents, DPPH radical scavenging activity, reducing power, ACE inhibitory activity, and GABA contents at 14.03 (yellow), 13.88 (orange), 15.71 (red), 487.9 (MK, mg/kg), 723.8 (TP, mg/kg), 326.4 (TF, mg/kg), 81.7 (DPPH, %), and 1.5 (RP, O.D), respectively. In addition, the showed ACE inhibitory activity and GABA contents was 86.9% and 977.4 mg/kg in EtOH extract, respectively.
For the production of natural pigments with microbe, the strains which produced monascus pigment were isolated, and then culture condition and extraction condition were investigated. These results are summarized as follows; The strain which ran produce monascus natural pigment was isolated from natural microbial sources and we made mutant of this strain with UV($235_{nm}$, 30 second) irradiation. The mutant was identified as Monascus sp. MK2-2. The optimal culture conditions were investigated optimal medium containing 0.3% rice powder, 0.2% yeast extract, 0.3% $NH_4H_2PO_4$ and $30^{\circ}C$ in a rotary shaker (120 rpm) for 5 days (initial pH 5.0), while the pigment production was determined at 24 hr intervals. The effective carbon sources were wheat flour > rice powder > fructose, and effective nitrogen sources were sodium nitrate > $KNO_3$ for production of the monascus natural pigment. The pigment capacity is good from 17 to 22 in C/N ratio. The production amount of monascus natural pigment was 0.38 g per 1 kg of rice. Also, extract of red yeast rice had anti-thrombosis activity like a degree of aspirin.
The predictions of the radical reaction sites for phenol, 2-, 3- and 4-chlorophenols (CPs) and 4-chloronitrobenzene (CNB) were studied by atomic charge distribution calculations. The atomic charge distributions on each atom of these molecules were obtained using the CHelpG and MK (Merz-Kollman/Singh) methods with the optimized structural parameters determined by DFT calculation at the level of BLYP/6-311++G(d,p). By comparing the experimentally obtained hydroxyl addition site(s) and the calculated atomic charges on carbon atoms of phenol and CPs, we found that hydroxyl substitution by oxidation reaction mainly occurred to the carbon(s) with high atomic charges. With these results, we were easily able to predict the position(s) of the ·OH reaction site(s) of phenol, CPs and CNB through atomic charge distribution calculations.
In order to investigate fatty acid contents and effects of cell growth on the production of an extracellular protease and toxicity of exotoxin, several symbiotic bacteria with highly effective toxins were isolated from seven species of entomopathogenic nematodes belong in Steinernematidae(Steinernema glaseri XR-DR, S. glaseri XR-NC, S. glaseri XR-MK, S. carpocapsae XR-PC, S. maticola XR-MO, S. Longicaudum XR-LC) and Heterorhabditidae sp.(Heterorhabditis bacteriophora XR-HY). In the cell growth and exotoxin toxicity, XR-PC and XR-MK were superior to other species when cultured in vitro. The protease activity of XR-DR was remarkable compared to other species. In the case of XR-HY, the protease activity increased in parallel with cell growth. Interestingly the fatty acid contents of XR-PC and XR-HY were significantly different from those of other species 12:0, 14:0, 13:0 iso, 16:1 cis 5 and 17:0 cyclo.
In Escherichia coli, CRP forms a complex with cAMP and acts as a transcriptional regulator of many genes, including sugar metabolism operons. The E. coli MK2001, which is introduced the altered crp, is functional in the expression of lac, ara and man, in the absence of cAMP. However, the expression of mal gene is fully activated by the addition of cAMP or cGMP. The object of the study is cloning of the sfs (sugar fermentation stimulation) genes, which was involved in regulation of mal gene expression with the altered crp gene, and structural analysis and characterization of the genes at the molecular level. We have cloned 5 different E. coli genes which stimulate the maltose metabolism in a crp, cya::km (MK2001) background. Newly identified genes were designated as sfs. One of the sfs genes (pPC1), located at the 53.2 min map position on the E. coli chromosome, was further analyzed. Expression of the genes, which is involved in maltose metabolism, malQ (amylomaltase), was increased to 5.8-fold in the presence of a plasmid, pAP5, containing the subcloned sfs4 gene. The nucleotide seguence of a common 2,126 bp segment of the pPCM1 was determined and two open reading frames (ORF1 and ORF2) were detected. The ORF1 encodes the sfs4 gene and ORF2 encodes a truncated protein. Potential CRP binding site is located in the upstream of the putative promoter in the regulatory region. Expression of the cloned sfs4 gene was positively regulated by the cAMP-CRP complex.
Objectives : Polygalae Radix (PR) from Polygalae tenuifolia (Polygalaceae) has been clinically used as a sedative, anti-inflammatory, and anti-bacterial agent. To extend pharmacological effects of PR in the central nervous system (CNS) on the basis of its CNS protective effect, the present study was conducted to identify the effect of PR, whether it shows the neuroprotective action against excitatory neurotoxicity. Methods : To identify the protective effect of PR to excitatory neuro-toxic agent, the present study was focused on the PR effect on cell death, that was caused by applying NMDA to nerve cell, elevation of $(Ca^{2+})_i$, releasement of glutamate, and ROS generation. Result : 1. PR methanol extract, at the concentration range of 0.05 to 5 g/ml, significantly inhibited NMDA (1 mM)-induced neuronal cell death as well as MK-801 (non competitive NMDA antagonist). 2. PR methanol extract $(0.5\;{\mu}g/ml)$ inhibited NMDA (1 mM)-induced elevation of cytosolic calcium concentration $[Ca^{2+}]_i$. NMDA application in the presence of MK-801 $(10\;{\mu}M)$ failed to produce the increase of $[Ca^{2+}]_i$ through all the measurement time. 3. PR methanol extract $(0.5\;{\mu}g/ml)$ inhibited the NMDA-induced elevation of glutamate release. Also, MK-801 showed similar protective effects. 4. PR methanol extract $(0.5\;{\mu}g/ml)$ inhibited the NMDA-induced elevation of ROS generation. Also, MK-801 showed similar protective effects. Conclusion : The present study provides the availability of PR to exert its protective effect on the neuronal cell death in various neurodegenerative pathophysiological conditions.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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