Park, So Yun;Lee, Ji Yun;Choi, Jun Young;Park, Mae Ja;Kim, Dong Sun
Molecules and Cells
/
제21권2호
/
pp.237-243
/
2006
Brain-derived neurotrophic factor (BDNF) is a neuromodulator of nociceptive responses in the dorsal root ganglia (DRG) and spinal cord. BDNF synthesis increases in response to nerve growth factor (NGF) in trkA-expressing small and medium-sized DRG neurons after inflammation. Previously we demonstrated differential activation of multiple BDNF promoters in the DRG following peripheral nerve injury and inflammation. Using reporter constructs containing individual promoter regions, we investigated the effect of NGF on the multiple BDNF promoters, and the signaling pathway by which NGF activates these promoters in PC12 cells. Although all the promoters were activated 2.4-7.1-fold by NGF treatment, promoter IV gave the greatest induction. The p38 mitogen-activated protein kinase (MAPK) inhibitor, SB203580, phosphatidylinositol 3-kinase (PI-3K) inhibitor, LY294003, protein kinase A (PKA) inhibitor, H89, and protein kinase C (PKC) inhibitor, chelerythrine, had no effect on activation of promoter IV by NGF. However, activation was completely abolished by the MAPK kinase (MEK) inhibitors, U0126 and PD98059. In addition, these inhibitors blocked NGF-induced phosphorylation of extracellular signal-regulated protein kinase (ERK) 1/2. Taken together, these results suggest that the ERK1/2 pathway activates BDNF promoter IV in response to NGF independently of NGF-activated signaling pathways involving PKA and PKC.
During the last decade, enormous progress has been made on the biological significance of apoptosis. Since ras is among the most central molecule in signaling, we asked if ras regulates apoptotic pathway. We have previously shown that H-ras, but not N-ras, induces an invasiveness and motility in human breast epithelial cells (MCF10A), while both H-ras and N-ras induce transformed phenotype. In this study, we wished to seek a chemopreventive agent that effectively induces apoptosis in H-ras-activated cells. Here we show that capsaicin, the major pungent phytochemical in red pepper, induces caspase 3-involved apoptosis selectively in H-ras activated MCF10A cells while the parental MCF10A cells are not effected. In order to study the molecular mechanisms for the increased sensitivity of H-ras MCF10A cells to capsaicin-induced apoptosis, activation of ras downstream signaling molecules, mitogen-activated protein kinases (MAPKinases), upon capsaicin treatment was investigated. Phosphorylated forms of JNK1 and p38 MAPKinase were prominently increased whereas activated ERK-1/2 was decreased by capsaicin in ras-activated cells. The parental cells did not respond to capsaicin, suggesting that capsaicin selectively induces apoptosis through modulating activities of ras downstream signaling molecules in H-ras-activated cells. Studies using chemical inhibitors (CPT-cAMP, SB203580 and PD98059) and dominant negative constructs of JNKl, p38 and MEK show that activation of JNK1 and p38 MAPKinase, but not ERK-1/2, is critical for ras-mediated apoptosis by capsaicin.
Song, Yong-Seok;Kim, Man Sub;Lee, Dong Hun;Oh, Doek-Kun;Yoon, Do-Young
Journal of Microbiology and Biotechnology
/
제25권5호
/
pp.589-597
/
2015
It has been reported that overexpression of MUC5AC induced by excessive inflammation leads to airway obstruction in respiratory diseases such as chronic obstructive pulmonary disease and asthma. 15-Hydroxyeicosatetraenoic acid (15-HETE) has been reported to have anti-inflammatory effects, but the role of 15-HETE in respiratory inflammation has not been determined. Therefore, the aim of this study was to investigate the effects of 15-HETE on MUC5AC expression and related pathways. In this study, phorbol-12-myristate-13-acetate (PMA) was used to stimulate NCI-H292 bronchial epithelial cells in order to examine the effects of 15-HETE. 15-HETE inhibited PMA-induced expression of MUC5AC mRNA and secretion of MUC5AC protein. Moreover, 15-HETE regulated matrix metallopeptidase 9 (MMP-9), mitogen-activated protein kinase kinase (MEK), and extracellular signal-regulated kinase (ERK). In addition, 15-HETE decreased the nuclear translocation of specificity protein-1 (Sp-1) transcription factor and nuclear factor κB (NF-κB). Furthermore, 15-HETE enhanced the transcriptional activity of peroxisome proliferator-activated receptor gamma (PPARγ) as a PPARγ agonist. This activity reduced the phosphorylation of protein kinase B (PΚB/Akt) by increasing the expression of phosphatase and tensin homolog (PTEN). In conclusion, 15-HETE regulated MUC5AC expression via modulating MMP-9, MEK/ERK/Sp-1, and PPARγ/PTEN/Akt signaling pathways in PMA-treated respiratory epithelial cells.
Objective: To verify the expression of leptin receptor (OB-R) in oocytes and preimplantation embryos, the involvement of mitogen activated protein kinase (MAPK or Erk1/2) in the leptin signaling, and effect of leptin on the oocyte maturation in mice. Method: RT-PCR analysis of OB-R was conducted in germinal vesicle (GV)-intact and MII stage oocytes, and 1, 2, 8-cell embryos and blastocysts. Germinal vesicle breakdown (GVB), polar body extrusion, monitored in the presence or absence of leptin ($1{\mu}M$). Following the leptin treatment, temporal changes in MAPK activity were verified by immunoprecipitation and in vitro kinase assay in MII oocytes. Results: The expression of OB-R mRNA was found in GV and MII oocyte but not in the embryos. MAPK activity of the MII oocytes was significantly increased by brief incubation in the HTF supplemented with leptin ($1{\mu}M$). Priming of PD098059, a MEK inhibitor to leptin treatment attenuated the activation of MAPK by leptin in MII oocytes. Following 24 hrs of culture of the GV oocytes, leptin significant increased the GVB and 1 st polar body extrusion. Conclusion: This result suggested that functional interaction between leptin and OB-R resulted in potentiation of MAPK (Erk1/2) activity in MII oocytes through MEK activation and that leptin might be a local regulator of meiotic maturation of the mouse oocytes.
Vemurafenib has recently been used as drug for treatment of melanomas with $BRAF^{V600E}$ mutation. Unfortunately, treatment with only vemurafenib has not been sufficiently effective, with recurrence after a short period. In this study, three vemurafenib-resistant $BRAF^{V600E}$ melanoma cell lines, $A375P^R$, $A375M^R$ and SKMEL-$28^R$, were established from the original A375P, A375M and SKMEL-28 cell lines. Examination of the molecular mechanisms showed that the phosphorylation levels of MEK and ERK, which play key roles in the RAS/RAF/MEK/ERK signaling pathway, were reduced in these three cell lines, with increased phosphorylation levels of pAKTs limited to SKMEL-$28^R$ cells. Treatment of SKMEL-$28^R$ cells with 100 nM paclitaxel resulted in increased apoptosis and decreased cellular proliferation, invasion and colony formation via reduction of expression levels of EGFR and pAKTs. Moreover, vemurafenib-induced pAKTs in SKMEL-$28^R$ were decreased by treatment with an AKT inhibitor, MK-2206. Taken together, our results revealed that resistance mechanisms of $BRAF^{V600E}$-mutation melanoma cells to vemurafenib depended on the cell type. Our results suggested that paclitaxel should be considered as a drug in combination with vemurafenib to treat melanoma cells.
Corticotropin releasing factor (CRF) mediates various responses to stress through CRF receptors 1 and 2. CRF receptor 2 has two forms, $2{\alpha}$ and $2{\beta}$ each of which appears to have distinct roles. Here we used dopaminergic neuron-derived MN9D cells to investigate the function of CRF receptor 2 in dopamine neurons. We found that n-butyrate, a histone deacetylase inhibitor, induced MN9D cell differentiation and increased gene expression of all CRF receptors. CRF receptor $2{\beta}$ was minimally expressed in MN9D cells; however, its expression dramatically increased during differentiation. CRF receptor $2{\beta}$ expression levels appeared to correlate with neurite outgrowth, suggesting CRF receptor $2{\beta}$ involvement in neuronal differentiation. To validate this statement, we made a CRF receptor $2{\beta}$-overexpressing $MN9D/CRFR2{\beta}$ stable cell line. This cell line showed robust neurite outgrowth and GAP43 overexpression, together with MEK and ERK activation, suggesting MN9D cell neuronal differentiation. From these results, we conclude that CRF receptor $2{\beta}$ plays an important role in MN9D cell differentiation by activating the MEK/ERK signaling pathway.
Tumor angiogenesis, growth and metastasis are three closely related processes. We therefore investigated the effects of barbigerone on all three in the B16F10 tumor model established in both zebrafish and mouse models, and explored underlying molecular mechanisms. In vitro, barbigerone inhibited B16F10 cell proliferation, survival, migration and invasion and suppressed human umbilical vascular endothelial cell migration, invasion and tube formation in concentration-dependent manners. In the transgenic zebrafish model, treatment with $10{\mu}M$ barbigerone remarkably inhibited angiogenesis and tumor-associated angiogenesis by reducing blood vessel development more than 90%. In vivo, barbigerone significantly suppressed angiogenesis as measured by H and E staining of matrigel plugs and CD31 staining of B16F10 melanoma tumors in C57BL/6 mice. Furthermore, it exhibited highly potent activity at inhibiting tumor growth and metastasis to the lung of B16F10 melanoma cells injected into C57BL/6 mice. Western blotting revealed that barbigerone inhibited phosphorylation of AKT, FAK and MAPK family members, including ERK, JNK, and p38 MAPKs, in B16F10 cells mainly through the MEK3/6/p38 MAPK signaling pathway. These findings suggested for the first time that barbigerone could inhibit tumor-angiogenesis, tumor growth and lung metastasis via downregulation of the MEK3/6/p38 MAPK signaling pathway. The findings support further investigation of barbigerone as a potential anti-cancer drug.
Kim, Jeong-Hwan;Choi, Woo-Bong;Lee, Jong-Hwan;Jeon, Sung-Jong;Choi, Yung-Hyun;Kim, Byung-Woo;Chang, Hyo-Ihl;Nam, Soo-Wan
Journal of Microbiology and Biotechnology
/
제19권11호
/
pp.1355-1363
/
2009
In the present study, the neuroprotective effects of astaxanthin on $H_2O_2$-mediated apoptotic cell death, using cultured mouse neural progenitor cells (mNPCs), were investigated. To cause apoptotic cell death, mNPCs were pretreated with astaxanthin for 8 h and followed by treatment of 0.3 mM $H_2O_2$. Pretreatment of mNPCs with astaxanthin significantly inhibited $H_2O_2$-mediated apoptosis and induced cell growth in a dose-dependent manner. In Western blot analysis, astaxanthin-pretreated cells showed the activation of p-Akt, p-MEK, p-ERK, and Bcl-2, and the reduction of p-P38, p-SAPK/JNK, Bax, p-GSK3b, cytochrome c, caspase-3, and PARP. Because $H_2O_2$ triggers caspases activation, this study examined whether astaxanthin can inhibit caspases activation in $H_2O_2$-treated mNPCs. After $H_2O_2$ treatment, caspases activities were prominently increased, but astaxanthin pretreatment significantly inhibited $H_2O_2$-mediated caspases activation. Astaxanthin pretreatment also significantly recovered the ATP production ability of $H_2O_2$-treated cells. These findings indicate that astaxanthin inhibits $H_2O_2$-mediated apoptotic features in mNPCs. Inhibition assays with SB203580 ($10\;{\mu}M$, a specific inhibitor of p38) and PD98059 ($10\;{\mu}M$, a specific inhibitor of MEK) clearly showed that astaxanthin can inhibit $H_2O_2$-mediated apoptotic death via modulation of p38 and MEK signaling pathways.
Objective : To characterize the antitumorigenic potential of Apamin, one of the major components of bee venom, its effects on cell proliferation and the mitogen-activated protein kinase (MAPK) signal transduction pathway were characterized using the human melanoma cell line SK-MEL-2. Methods & Results : Cell counting analysis for cell death demonstrated that consistent with a previous results, SK-MEL-2 cells treated with $0.5-2.0{\mu}g/ml$ of Apamin showed no recognizable cytotoxic effect whereas detectable induction of cell death was identified at concentrations over $5.0{\mu}g/ml$. [3H]thymidine incorporation assay for cell proliferation demonstrated that DNA replication of SK-MEL-2 cells is inhibited by Apamin in a dose- and time-dependent manner. To explore whether Apamin-induced growth suppression is associated with the MAPK signaling pathway, phosphorylation of Erk, a function mediator of MAPK growth-stimulating signal, was examined Western blot assay using a phospho-specific Erkl/2 antibody. A significant increase of Erkl/2 phosphorylation level was observed in Apamin-treated cells compared with untreated control cells. Qantitative RT-PCR analysis revealed that Apamin inhibit expression of MAPK downstream genes such as c-Jun, c-Fos, and cyclin D1 but not expression of MAPK pathway component genes including Ha-Ras, c-Raf-1, MEK1, and Erk. Conclusion : It is strongly suggested that the antitumorigenic activity of Apamin might result in part from its inhibitory effect on the MAPK signaling pathway in human melanoma cells SK-MEL-2.
Molecular targeting for the altered signaling pathways has been proven to be effective for the treatment of many types of human cancer, including colorectal cancer (CRC). The dual phosphatidylinositol-3-kinase (PI3K) and mammalian target of rapamycin (mTOR) inhibitor BEZ235 has shown to exhibit potent antitumor activity against solid tumors. Autophagy is a cellular lysosomal catabolic process to maintain metabolic homeostasis, which has been known to be induced in response to many therapeutic agents in cancer cells. This process is negatively regulated by mTOR and often acts as prosurvival or prodeath mechanism following cancer therapeutics. The current study was designed to investigate the antiproliferation activity of BEZ235 and to evaluate the role of autophagy induced by BEZ235 using HCT15 CRC cells bearing ras oncogene mutation. We found that BEZ235 decreases cell viability, which was mostly dependent on $G_1$ arrest of cell cycle via suppression of cyclin A expression. BEZ235 affects PI3K/Akt/mTOR signaling pathway by increasing the phosphorylation of AKT at $Ser^{473}$ and RAS/RAF/MEK/ERK pathway by decreasing the phosphorylation of ERK at $Tyr^{204}$. BEZ235 also stimulated autophagy induction as evidenced by the increased expression of LC3-II and abundant acidic vesicular organelles (AVOs) in the cytoplasm. In addition, the combination of BEZ235 with autophagy inhibitor chloroquine, a known antagonist of autophagy, counteracted the antiproliferation effect of BEZ235. Thus, our study indicates that autophagy induced in response to BEZ235 treatment appears to act as cell death mechanism in HCT15 CRC cells.
본 웹사이트에 게시된 이메일 주소가 전자우편 수집 프로그램이나
그 밖의 기술적 장치를 이용하여 무단으로 수집되는 것을 거부하며,
이를 위반시 정보통신망법에 의해 형사 처벌됨을 유념하시기 바랍니다.
[게시일 2004년 10월 1일]
이용약관
제 1 장 총칙
제 1 조 (목적)
이 이용약관은 KoreaScience 홈페이지(이하 “당 사이트”)에서 제공하는 인터넷 서비스(이하 '서비스')의 가입조건 및 이용에 관한 제반 사항과 기타 필요한 사항을 구체적으로 규정함을 목적으로 합니다.
제 2 조 (용어의 정의)
① "이용자"라 함은 당 사이트에 접속하여 이 약관에 따라 당 사이트가 제공하는 서비스를 받는 회원 및 비회원을
말합니다.
② "회원"이라 함은 서비스를 이용하기 위하여 당 사이트에 개인정보를 제공하여 아이디(ID)와 비밀번호를 부여
받은 자를 말합니다.
③ "회원 아이디(ID)"라 함은 회원의 식별 및 서비스 이용을 위하여 자신이 선정한 문자 및 숫자의 조합을
말합니다.
④ "비밀번호(패스워드)"라 함은 회원이 자신의 비밀보호를 위하여 선정한 문자 및 숫자의 조합을 말합니다.
제 3 조 (이용약관의 효력 및 변경)
① 이 약관은 당 사이트에 게시하거나 기타의 방법으로 회원에게 공지함으로써 효력이 발생합니다.
② 당 사이트는 이 약관을 개정할 경우에 적용일자 및 개정사유를 명시하여 현행 약관과 함께 당 사이트의
초기화면에 그 적용일자 7일 이전부터 적용일자 전일까지 공지합니다. 다만, 회원에게 불리하게 약관내용을
변경하는 경우에는 최소한 30일 이상의 사전 유예기간을 두고 공지합니다. 이 경우 당 사이트는 개정 전
내용과 개정 후 내용을 명확하게 비교하여 이용자가 알기 쉽도록 표시합니다.
제 4 조(약관 외 준칙)
① 이 약관은 당 사이트가 제공하는 서비스에 관한 이용안내와 함께 적용됩니다.
② 이 약관에 명시되지 아니한 사항은 관계법령의 규정이 적용됩니다.
제 2 장 이용계약의 체결
제 5 조 (이용계약의 성립 등)
① 이용계약은 이용고객이 당 사이트가 정한 약관에 「동의합니다」를 선택하고, 당 사이트가 정한
온라인신청양식을 작성하여 서비스 이용을 신청한 후, 당 사이트가 이를 승낙함으로써 성립합니다.
② 제1항의 승낙은 당 사이트가 제공하는 과학기술정보검색, 맞춤정보, 서지정보 등 다른 서비스의 이용승낙을
포함합니다.
제 6 조 (회원가입)
서비스를 이용하고자 하는 고객은 당 사이트에서 정한 회원가입양식에 개인정보를 기재하여 가입을 하여야 합니다.
제 7 조 (개인정보의 보호 및 사용)
당 사이트는 관계법령이 정하는 바에 따라 회원 등록정보를 포함한 회원의 개인정보를 보호하기 위해 노력합니다. 회원 개인정보의 보호 및 사용에 대해서는 관련법령 및 당 사이트의 개인정보 보호정책이 적용됩니다.
제 8 조 (이용 신청의 승낙과 제한)
① 당 사이트는 제6조의 규정에 의한 이용신청고객에 대하여 서비스 이용을 승낙합니다.
② 당 사이트는 아래사항에 해당하는 경우에 대해서 승낙하지 아니 합니다.
- 이용계약 신청서의 내용을 허위로 기재한 경우
- 기타 규정한 제반사항을 위반하며 신청하는 경우
제 9 조 (회원 ID 부여 및 변경 등)
① 당 사이트는 이용고객에 대하여 약관에 정하는 바에 따라 자신이 선정한 회원 ID를 부여합니다.
② 회원 ID는 원칙적으로 변경이 불가하며 부득이한 사유로 인하여 변경 하고자 하는 경우에는 해당 ID를
해지하고 재가입해야 합니다.
③ 기타 회원 개인정보 관리 및 변경 등에 관한 사항은 서비스별 안내에 정하는 바에 의합니다.
제 3 장 계약 당사자의 의무
제 10 조 (KISTI의 의무)
① 당 사이트는 이용고객이 희망한 서비스 제공 개시일에 특별한 사정이 없는 한 서비스를 이용할 수 있도록
하여야 합니다.
② 당 사이트는 개인정보 보호를 위해 보안시스템을 구축하며 개인정보 보호정책을 공시하고 준수합니다.
③ 당 사이트는 회원으로부터 제기되는 의견이나 불만이 정당하다고 객관적으로 인정될 경우에는 적절한 절차를
거쳐 즉시 처리하여야 합니다. 다만, 즉시 처리가 곤란한 경우는 회원에게 그 사유와 처리일정을 통보하여야
합니다.
제 11 조 (회원의 의무)
① 이용자는 회원가입 신청 또는 회원정보 변경 시 실명으로 모든 사항을 사실에 근거하여 작성하여야 하며,
허위 또는 타인의 정보를 등록할 경우 일체의 권리를 주장할 수 없습니다.
② 당 사이트가 관계법령 및 개인정보 보호정책에 의거하여 그 책임을 지는 경우를 제외하고 회원에게 부여된
ID의 비밀번호 관리소홀, 부정사용에 의하여 발생하는 모든 결과에 대한 책임은 회원에게 있습니다.
③ 회원은 당 사이트 및 제 3자의 지적 재산권을 침해해서는 안 됩니다.
제 4 장 서비스의 이용
제 12 조 (서비스 이용 시간)
① 서비스 이용은 당 사이트의 업무상 또는 기술상 특별한 지장이 없는 한 연중무휴, 1일 24시간 운영을
원칙으로 합니다. 단, 당 사이트는 시스템 정기점검, 증설 및 교체를 위해 당 사이트가 정한 날이나 시간에
서비스를 일시 중단할 수 있으며, 예정되어 있는 작업으로 인한 서비스 일시중단은 당 사이트 홈페이지를
통해 사전에 공지합니다.
② 당 사이트는 서비스를 특정범위로 분할하여 각 범위별로 이용가능시간을 별도로 지정할 수 있습니다. 다만
이 경우 그 내용을 공지합니다.
제 13 조 (홈페이지 저작권)
① NDSL에서 제공하는 모든 저작물의 저작권은 원저작자에게 있으며, KISTI는 복제/배포/전송권을 확보하고
있습니다.
② NDSL에서 제공하는 콘텐츠를 상업적 및 기타 영리목적으로 복제/배포/전송할 경우 사전에 KISTI의 허락을
받아야 합니다.
③ NDSL에서 제공하는 콘텐츠를 보도, 비평, 교육, 연구 등을 위하여 정당한 범위 안에서 공정한 관행에
합치되게 인용할 수 있습니다.
④ NDSL에서 제공하는 콘텐츠를 무단 복제, 전송, 배포 기타 저작권법에 위반되는 방법으로 이용할 경우
저작권법 제136조에 따라 5년 이하의 징역 또는 5천만 원 이하의 벌금에 처해질 수 있습니다.
제 14 조 (유료서비스)
① 당 사이트 및 협력기관이 정한 유료서비스(원문복사 등)는 별도로 정해진 바에 따르며, 변경사항은 시행 전에
당 사이트 홈페이지를 통하여 회원에게 공지합니다.
② 유료서비스를 이용하려는 회원은 정해진 요금체계에 따라 요금을 납부해야 합니다.
제 5 장 계약 해지 및 이용 제한
제 15 조 (계약 해지)
회원이 이용계약을 해지하고자 하는 때에는 [가입해지] 메뉴를 이용해 직접 해지해야 합니다.
제 16 조 (서비스 이용제한)
① 당 사이트는 회원이 서비스 이용내용에 있어서 본 약관 제 11조 내용을 위반하거나, 다음 각 호에 해당하는
경우 서비스 이용을 제한할 수 있습니다.
- 2년 이상 서비스를 이용한 적이 없는 경우
- 기타 정상적인 서비스 운영에 방해가 될 경우
② 상기 이용제한 규정에 따라 서비스를 이용하는 회원에게 서비스 이용에 대하여 별도 공지 없이 서비스 이용의
일시정지, 이용계약 해지 할 수 있습니다.
제 17 조 (전자우편주소 수집 금지)
회원은 전자우편주소 추출기 등을 이용하여 전자우편주소를 수집 또는 제3자에게 제공할 수 없습니다.
제 6 장 손해배상 및 기타사항
제 18 조 (손해배상)
당 사이트는 무료로 제공되는 서비스와 관련하여 회원에게 어떠한 손해가 발생하더라도 당 사이트가 고의 또는 과실로 인한 손해발생을 제외하고는 이에 대하여 책임을 부담하지 아니합니다.
제 19 조 (관할 법원)
서비스 이용으로 발생한 분쟁에 대해 소송이 제기되는 경우 민사 소송법상의 관할 법원에 제기합니다.
[부 칙]
1. (시행일) 이 약관은 2016년 9월 5일부터 적용되며, 종전 약관은 본 약관으로 대체되며, 개정된 약관의 적용일 이전 가입자도 개정된 약관의 적용을 받습니다.