본 연구는 생체 외 $^1H$ 고분해능 매직앵글스핀닝($^1H$ High-Resolution Magic Angle Spinning; $^1H$ HR MAS) 기술을 이용하여 정상군 adult mice의 뇌에서의 부위별 뇌 신경화학 대사물질(brain neurochemical metabolites)을 정량적으로 분석하고, 이를 이용하여 정상군의 뇌 대사물질의 표준 data base를 정립하기 위함이다. 실험에 사용된 adult mice는 C57BL/6J 모델의 체중 25~28 g, 40주령 수컷 10마리를 사용하였으며, 연령과 성별을 일치시켰다. 또한 뇌의 전두엽(frontal cortex), 측두엽(temporal cortex), 해마(hippocampus), 시상(thalamus) 총 4개의 부위를 채취하여 생체 외 $^1H$ 고분해능 매직앵글 스핀닝 실험을 진행 하였다. 생체 조직의 뇌 대사물질의 절대농도를 획득하기 위하여 대표적인 대사물질(Ace, NAA, NAAG, tCr, Cr, tCho, Cho, mIns, GPC+PC, Lac, GABA, Glu, Gln, tau, Ala)을 각 피크의 면적과 대사물질의 프로톤 개수를 계산하였다. 결과적으로 정상 군에서의 mice 뇌의 신경화학 대사물질들을 Acet, NAA, NAAG, Cho, mIns가 부위별로 절대농도차의 유의성을 나타내었으며, 이 외의 대사물질에서는 유의성이 없는 것으로 나타났다. 본 연구 결과를 토대로 $^1H$ HR-MAS을 이용한 생체조직 실험은 뇌조직 내 대사물질의 절대농도를 측정하고 기본적인 지표를 확보하는데 매우 정확하고 정량적인 방법이 될 수 있을 것으로 사료되며, 더 나아가 mice를 이용한 인간질병 모델의 실험동물에서의 뇌 신경화학 대사물질의 표준 자료화 하는데 도움이 될 수 있을 것으로 판단된다.
본 연구는 미라 모발에 존재하는 멜라닌과립의 보존 상태와 모양을 규명하기 위해서 1250kV의 초고압전자현미경(high voltage electron microscope: HVEM)을 사용하여 3차 구조를 분석하였다. 미라 모발에서 피질에 분포하고 있는 멜라닌과립은 큐티클층에 인접한 바깥쪽 피질에 집중적으로 분포하고 있다. 이들 부위에는 다량의 멜라닌과립들이 무리를 지어 존재하고 있어서 현대인의 정상 모발에 있는 멜라닌과립의 분포양상과 뚜렷한 차이점을 나타내었다. 초고압전자현미경으로 ${\pm}60$도의 범위에서 1도 간격으로 촬영한 결과 멜라닌과립은 길쭉한 타원형의 형태로 크기가 다양하게 관찰되었다. 과립의 크기는 단축 직경이 $0.3-0.6{\mu}m$이고, 장축 직경은 $0.5-1{\mu}m$로 측정되었다. 결론적으로 초고압전자현미경은 일반 투과전자현미경보다 높은 해상도와 투과력을 가져서 두꺼운 절편의 생물 시료 구조분석에 용이하다.
A high performance liquid chromatographic (HPLC) method for the simultaneous determination of dictamine, obacunone and fraxinellone was established for the quality control of traditional herb Dictamnus dasycarpus cortex. Separation and quantification were successfully achieved with a Shiseido C18 column ($5\;{\mu}m$, 4.6 mm I.D. ${\times}$ 250 mm) by gradient elution of a mixture of methanol and water at a flow rate of 1.0 ml/min. The diode-array UV/Vis detector (DAD) was used for the detection and the wavelength for quantification was set at 236 nm. The presence of dictamine, obacunone and fraxinellone in this extract was ascertained by retention time, spiking with each authentic standard and UV spectrum. All three compounds showed good linearity ($r^2$ > 0.999) in relatively wide concentration ranges. The R.S.D. recovery of each compound was 101.0~103.7% with R.S.D. values less than 1.0%. This method was successfully applied to the determination of contents of dictamine, obacunone and fraxitnellone in three commercial products of D. dasycarpus cortex. These results suggest that the developed HPLC method is simple, effective and could be readily utilized as a quality control method for commercial products.
Effects of dietary fatty acids and vitamin E on antioxidant vitamin status were studied in rat brain sections. Sources of dietary fat(10t%) were safflower oil(SO) poor in $\omega$3 fatty acid and mixed oil (MO) with computer-adjustd fatty acid ratios(AA/DHA=1.4, $\omega$6/$\omega$3=6.3, P/M/S=1.0/1.5/1, AA=2.%)with (ME) and without(MO) vitamin E(500mg/kg diet). Rats were fed the three kinds of diet from 3-4 wks prior to the conception. At the age of 3 & 9wks of the 2nd generation rat, antioxidant vitamins were measured in frontal cortex(FC), corpus striatum (CS), cerebellum(CB) and hippocampus(HP) using a multiwavelength, reverse phase gradient HPLC system. The levels of antioxidant vitamins converged to the similar value in all groups at 9 wks of age. Retinol, lycopene and cryptoxanthin levels of all experimental groups were found to be the highest in hippocampus at both 3 & 9wks of age. The levels of vitamin E appeared to be higher in the order of HP>CS-CB>FC in MO & ME. Beta-carotene and retinol showed the lowest level in hippocampus of vitamin E supplemented groups, even though vitamin E level tended to be higher in other sections. It seemed that vitamin E has an inhibitory action on the uptake of beta-carotene or acts as a preferred antioxidant to beta-carotene in certain section of the brain. By improving fatty acid balance (AA/DHA = 1.4, $\omega$6/$\omega$3=6.3, P/M/S=1.0/1.5/1, AA = 2%), the levels of vitamin E, retinol, lycopene & beta=carotene tended to be higher in MO than in SO, although crytoxanthin became lower at 3wks of age. In short, dietary fatty acids and vitamin E have different influence on antioxidant vitamin status in different rat brain sections. The higher levels of antioxidant vitamins in hippocampus should be pursued further in relation to behavioral development of rats.
Studies of interictal epileptiform discharges are essential for improving the diagnosis, classification, and management of epilepsy. In this case series we sought to identify the clinical and neurophysiological significance of bifid spikes, whose pattern bears a strong resemblance to the cardiac M pattern. We hypothesize that, analogous to the cardiac M pattern, the cerebral M pattern is generated by a conduction defect associated with asynchronous spatiotemporal averaging of electrical signals in the cortex, resulting in the signals reaching the scalp with different latencies. Unlike the cardiac M pattern, the pathology underlying the cerebral M pattern is unknown, although congenital CNS anomalies may be a culprit.
본 연구(硏究)는 식물체(植物體)의 glucoalkaloids에 관한 연구(硏究)의 일환으로서 먼저 감자(solanum tuberosum var. May Queen)의 glucoalkaloids(${\alpha}-chaconine$, ${\alpha}-solanine$)를 고속액체(高速液體) 크로마토그래피에에 의하여 분리, 정량법을 확립하는 것과 동시에 감자를 피질부(皮質部), 수질부(髓質部)로 나누어 각각의 부위(部位)에 존재하는 glucoalkaloids 측정(測定)을 목적으로한 것이다. (1) 충전제(充塡劑)를 $Nucleosi-NH_2(10{\mu}m)$를 $4.0mm\; I.D{\times}15cm$와 $4.0mm\;I.D{\times}15cm$의 stainless steel관(管)에 충전(充塡)하여 그것을 직렬(直列)로 연결하였다. 용리액(溶離液)으로는 tetrahydrofuran : phosphate buffer : acetonitrile(50 : 25 : 25, v/v/v)을 사용하였고 검출파장(檢出波長)을 208nm, 유속(流速)을 1ml/min로 하였다. (2) 상기방법(上記方法)에 의하여 glucoalkaloids의 하나인 ${\alpha}-chaconine$은 6.92분, ${\alpha}-solanine$은 10.96분 후에 용출(溶出)하여 완전히 분리(分離)될 수 있었다. 그리고 점체 하나를 분석하는 데 12분간으로 완료하여 본 방법(方法)이 glucoalkaloids를 분석하는데는 가장 좋은 방법(方法)이라는 것을 알았다. (3) 감자를 피층부(皮層部) 및 수질부(髓質部)로 나누어서 glucoalkaloids를 조사한 결과 양부위(兩部位) 공(共)히 ${\alpha}-chaconine$과 ${\alpha}-solanine$이 검출되었고, 피층부(皮層部)가 수질부(髓質部)보다 훨씬 그 함량이 많았다.
The purpose of this study was to clarify the efflux transport system of choline from brain to blood across the blood-brain barrier (BBB) in rats using the brain efflux index (BEI) method. $[^3H]$Choline was micro-injected into parietal cortex area 2 (Par2) of the rat brain, and was eliminated from the brain with elimination halflife of 45 min. The BBB efflux clearance of $[^3H]$choline was about 124 mL/min/g brain, which was determined from combination of an elimination rate constant $(1.54X10^{-2}min^{-1})$ and the distribution volume in the brain (8.05 mL/g brain). The efflux of $[^3H]$choline was inhibited by unlabeled choline in a dose-dependent manner and was significantly inhibited by cationic substrates, such as hemicholinium-3 and tetraethylammonium (TEA). These results suggest that the BBB may act as an efflux pump for choline to reduce the excessive choline concentration in the brain interstitial fluid.
Kim, S.H.;Eum, H.Y.;Lee, W.Y.;Park, S.W;.Lee, J.S.;Choi, S.M.;Kim, J.Y.;Jeong, W.Y.;Sim, S.H.
대한약학회:학술대회논문집
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대한약학회 2003년도 Proceedings of the Convention of the Pharmaceutical Society of Korea Vol.1
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pp.273.1-273.1
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2003
The CML -Ex is a traditional oriental medicine. The main constituents of CML-Ex are Rehmanniae Radix, Achyranthis Radix and Eucommiae Cortex. The objective of this study was to investigate the anti-inflammatory and analgesic activities of CML -Ex under various acute and chronic inflammatory and analgesic models. The drug was orally administered at 30, 100, 300 and 600 mg/kg body weight. (omitted)
Purpose: Normal aging results in detectable changes in the brain structure and function. We evaluated the changes of regional cerebral glucose metabolism in the normal aging process with FDG PET. Materials and Methods: Brain PET images were obtained in 44 healthy volunteers (age range 20-69 'y'; M:F = 29:15) who had no history of neuropsychiatric disorders. On 6 representative transaxial images, ROIs were drawn in the cortical and subcortical areas. Regional FDG uptake was normalized using whole brain uptake to adjust for the injection dose and correct for nonspecific declines of glucose metabolism affecting all brain areas equally. Results: In the prefrontal, temporoparietal and primary sensorimotor cortex, the normalized FDG uptake (NFU) reached a peak in subjects in their 30s. The NFU in the prefrontal and primary sensorimotor cortex declined with age after 30s at a rate of 3.15%/decade and 1.93%/decade, respectively. However, the NFU in the temporoparietal cortex did not change significantly with age after 30s. The anterior (prefrontal) posterior (temporoparietal) gradient peaked in subjects in their 30s and declined with age thereafter at a rate of 2.35%/decade. The NFU in the caudate nucleus was decreased with age after 20s at a rate of 2.39%/decade. On the primary visual cortex, putamen, and thalamus, the NFU values did not change significantly throughout the ages covered. These patterns were not significantly different between right and left cerebral hemispheres. Of interest was that the NFU in the left cerebellar cortex was increased with age after 20s at a rate of 2.86%/decade. Conclusion: These data demonstrate regional variation of the age-related changes in the cerebral glucose metabolism, with the most prominent age-related decline of metabolism in the prefrontal cortex. The increase in the cerebellar metabolism with age might reflect a process of neuronal plasticity associated with aging.
Cisplatinum is often effective in cancer treatment, but potent nephrotoxicity limits its clinical use. We have, therefore, developed new anticancer drugs that contain platinum. We have synthesized six new platinum compounds based on Figure 1. Drugs were initially administrated at 5${\times}$10$\^$-4/M with 48 hours exposure in monolayer cultures of primary rabbit proximal tubular cells and human renal cortical cells with the M.T.T. endpoint to measure toxicity. Drug concentrations of 10$\^$-3/M, 10$\^$-4/M, and 10$\^$-5/M with 72 hours exposure were used for human renal cortical tissues in 7 weeks histoculture with toxicity measured by the glucose-consumption endpoint. From these studies, we determined that the new platinum drugs have lower nephrotoxicity than cisplatinum. Drugs D, E, and H. have lower nephrotoxicity than the other new drugs. We are currently measuring the anticancer efficacy of drugs D, E, and H.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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