Hydrogel coated ring shaped ocular inserts (containing the antibiotic, tylosin tartrate) were used in an evaluation of the effectiveness of polymeric ocular drug release devices for treating infectious bovine keratoconjunctivitis. The in vivo experiments represent the first experiments using hydrogel ocular inserts containing an antibiotic for treating infectious bovine keratoconjunctivitis. In the infection tests, ten calves. were challenged with $2.4{\times}10^8{\sim}1.6{\times}10^9$ Moraxella bovis (a bacterium) colonies per eye following two ten minute ultraviolet radiation eye preconditioning exposures. Ninety five percent of the eyes (19 of 20 eyes) were successfully infected by this method. All infected eyes were monitored for the presence of the bacteria quantitiatively, and clinical observations were made for 14 days. The test was performed by three consecutive steps: 1) inoculation with 2 ultraviolet (UV) radiations, 2) growth of bacterial colonies and 3) treatment with medicated ring-shaped devices. The first. bacteriological measurements after 2 UV exposures were performed at day 3 of the tests. At day 7 after inoculation of both eyes of a calf with M. bovis, a medicated or a non-medicated ring-shaped device was inserted into each eye of a calf. The eye receiving the non-medicated ring was taken as a control for comparison with the eye that received a medicated ring. During the next 7 day period following a medicated ring insertion, the number of bacteria in the treated eyes dropped dramatically to negligible levels (0 to 30 colony forming units/swab), while the control eyes which received a non-medicated ring still exhibited a relatively high number of bacteria ($10^3\;to\;10^6$ colony forming units/swab). The number of bacteria was significantly reduced by the antibiotic released from the medicated ocular insert.
Detection of Mycoplasma DNA from the 30 cases of cancer tissues and the normal tissues surrounding the cancer tissues obtained from the patients with gastric cancer and the other 30 cases of cancer tissues and the normal tissues surrounding the cancer tissues obtained from the patients with colon cancer were evaluated by polymerase chain reaction(PCR). The PCR products were sequenced using an ABI 377 automatic DNA sequencer, and these sequences were confirmed by comparing sequences with the database of the National Center for Biotechnology Information BLAST network server. Mycoplasmas DNA were defected in 18 (60%) cases of normal tissues which were around gastric cancer and were 13 (43.3%) cases of gastric cancer tissues. Mycoplasmas DNA were detected in 15(50%) cases of normal tissues which were around colon cancer and 12 (40%) cases of colon cancer tissues. The M. faucium, M. subdolum, M. salivarium, M. auris, M. hyosynoviae, and M. conjunctivae were detected from the gastric cancer tissues. The M. faucium, M. subdolum,, M. salivarium, M. auris, M. hyosynoviae, M. bovigenitalium and M. pulmonis were detected from the normal tissues around gastric cancer. The M. faucium, M. subdolum, M. salivarium, M. auris, M. hyosynoviae, M. synoviae M. bovigenitalium, M. gallinarum, and M. moatsii were detected from the colon cancer. The M. faucium, M. subdolum, M. salivarium, M. auris, M. hyosynoviae, M. bovis, M. opalescens, M. bovigenitalium, M. gallinarum, and M. moatsii were detected from the normal tissues around the colon cancer. These results suggest that Mycoplasmas infection may not correlate with gastric cancer and colon cancer, because of the detection rate of Mycoplasmas DNA were not significantly differences between normal and cancer tissues from the patients.
A total of 480 live buffaloes and 180 visceral samples from Dhaka, Mymensingh, Bogura and Rajshahi were examined for the presence of parasites of water buffaloes in Bangladesh during September, 1988 to August, 1989. The recorded parasites were eight trematodes, two cestodes, fourteen nematodes, two protozoa and two arthropods. The trematodes were Fasciola gigantica (18.9%-46.4%). Paramphistomes (Gigantocotyl explanatum, Ceylonocotyl scoliocoelium, Cotylophoron cotylophorum and Gastrothylax crumenifer (29.5%-48.3%). Schistosoma indicum (1.6%-31.6%), S. spindale (13.9%-27.7%) and S. nasalis (4.6%-8.3%). The cestodes were Hydatid cyst (24.4%), Cysticercus tenuicollis (11.1%). The nematodes were Strongyloides papillosus (14.8%-21.6%), Capillaria spp. (C. bilobata, C. bovis) (8.5%-20.0%), Setaria digitata (7.2%), Onchocerca armillata (27.2%), Thelazia rhodesii (2.3%), Gongylonema pulchrum (3.9%), Oesophagostomum radiatum (6.6%-41.6%), Hookworms (Agriostomum vryburgi, Bunostomum phlebotomum) (8.1%-17.2%), Trichostrongylus axei (11.2%-21.6%), Mecistocirrus digitatus & Haemonchus contortus (15.2%-25.5%) and Toxocara vitulorum (1.1%-9.8%). The protozoa were Eimeria zuerni (2.3%) and Trypanosoma theileri (0.4%). The arthropods were Haemaphysalis bispinosa (8.1%) and Haematopinus tuberculatus (34.6%).
Streptococci and enterococci, isolates from the rumen content of mouflons and European bisons were isolated. The total counts of these species reached the values(log 10 ${\pm}$ S.E.M.) $7.3{\pm}0.21$; $6.1{\pm}0.06$ bacteria per one ml of the rumen content in streptococci and $3.6{\pm}0.20$; $3.17{\pm}0.18$ bacteria per one ml of the rumen content in enterococci, Strains isolated were allotted to te species Streptococcus bovis(AM1, AM2, AM3, AM4), Enterococcus faecium(EH1, EFG2, EC3) and Enterococcus faecalis (EFA1, EFD2). Bactera presented belong to the strains with low urease and ${\alpha}$-amylase activities. The majority of isolates were polyresistant. Each strain produced bacteriocin - like substance with effect against at least of one of relatives species as indicators used. The most of inhibition zones were hazy with the width 2-6 mm in diameter.
Epidemiological studies are important in both the prevention and treatment of mycobacterial infections. This study was initiated to establish the pulsed-field gel electrophoresis (PFGE) method, which are not yet extensively studied. The most apprpriate restriction endonucleases included DraI, AsnI, and XbaI. The optimal PFGE condition was different according to the enzymes used. Two stage PFGE was performed, in case of DraI first stage was performed with 10 seconds of initial pulse and 15 seconds of final pulse, while the second stage was performed with 60 seconds of initial pulse and 70 seconds of final pulse. The electrophoresis time for DraI-PFGE was 14 hours for each stage. Electrophoresis was performed for 22 hours, in case of XbaI, with 3 seconds of initial pulse and 12 seconds of final pulse. Electrophoresis was performed for 22 hours, in case of AsnI, with 5 seconds of initial pulse and 25 seconds of final pulse. In all cases the voltage of the electrophoresis was maintained constantly at 200 voltage. Standard mycobacterial strains, which included Mycobacterium bovis BCG, M. tuberculosis, and M. fortuitum, could not be differentiated by PFGE analysis. PFGE analysis was performed to differentiate 9 clinically isolated M. fortuitum strains using AsnI. All M. fortuitum strains showed different genotypes except 2 strains. Cluster analysis divided M. fortuitum strains into 2 large groups. PFGE analysis was performed to further differentiate M. fortuitum isolates using XbaI. The undifferentiated 2 M. fortuitum strains showed different PFGE patterns with Xba I. Cluster analysis of the XbaI-PFGE patterns showed more complex grouping than AsnI-PFGE patterns, which showed that XbaI-PFGE analysis was better than AsnI-PFGE in M. fortuitum genotyping. The top dissimilarity values of AsnI-PFGE and XbaI-PFGE were 0.74 and 0.75, respectively. This value was higher than that of arbitrarily primed polymerase chain reaction (AP-PCR) analysis and lower than that of restriction fragment length polymorphism (RFLP) analysis. This suggested that PFGE can be used as a supportive or alternative genotyping method to RFLP analysis.
Alfonseca-Silva, Edgar;Cruz-Villa, Juan Carlos;Gutierrez, Lilia;Sumano, Hector
Journal of Veterinary Science
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v.22
no.6
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pp.78.1-78.10
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2021
Background: Recurrent subclinical mastitis (RScM) due to resistant bacteria has low clinical and bacteriological cure rates, often requiring the culling of cows. The sequential intramammary administration of enrofloxacin hydrochloride-dihydrate (enro-C) followed by ceftiofur HCl may be useful for treating these cases. Objectives: This study assessed the bacteriological and clinical cure-efficacies of the sequentially intramammary administration of enro-C, followed by ceftiofur HCl to treat RScM in Holstein/Friesian cows. Methods: This trial was conducted in a herd with a high prevalence of RScM, and 20 Holstein/Friesian cows were included: 45% suffering subclinical mastitis and 38.9% of the mammary quarters affected. Twenty-nine bacterial isolates in vitro resistant to enro-C were obtained (coagulase-negative Staphylococcus spp, 55.2%; Staphylococcus aureus, 27.6%; Escherichia coli, 6.9%; Streptococcus uberis, 6.9%; Corynebacterium bovis, 3.4%). Polymerase chain reaction-isolated the following genes linked to enro-C resistance: chromosomal (gyrA) and plasmid (aac(6')-lb-cr). The treatments were as follows: twice-daily intramammary infusions of enro-C (300 mg/10 mL) for 5 days. Cows clinically considered treatment failures were also treated with intramammary ceftiofur (125 mg/10 mL, twice daily for 5 days. The clinical and bacteriological cure rates were carried out when completing each treatment phase and at 14 and 21 days, aided by a California mastitis test, somatic cell count, and failure to identify the initially causative bacteria. Results: Enro-C achieved 65% clinical and bacteriological cure rates, and 100% cure rates were obtained after the rescue treatment with ceftiofur HCl. Conclusions: Outstanding clinical and bacteriological cure rates in cows affected by RScM were achieved with the consecutive intramammary infusions of enro-C, followed by ceftiofur HCl.
Purpose : Toll-like receptor 2 (TLR2) is critical in the immune response to mycobacterial infections. The purpose of this study was to analyze TLR2 surface expressions and TLR2-mediated tumor necrosis factor-alpha ($TNF-{\alpha}$) and interleukin-6 (IL-6) production in patients with BCG vaccine-associated suppurative lymphadenitis. Methods : Peripheral monocytes were separated from 16 patients with BCG vaccine-associated suppurative lymphadenitis and 10 healthy controls using a magnet cell isolation kit. Monocytes ($1{\times}10^6$ cells/well) were incubated with a constant amount of $Pam_3CSK_4$ ($100{\mu}g/mL$) for 24 hours. TLR2 surface expression on monocytes was analyzed by FACS analysis and TLR-2 mRNA expression was determined by RT-PCR. TLR2-mediated $TNF-{\alpha}$ and IL-6 production were measured by ELISA. Results : In patients with BCG vaccine-associated suppurative lymphadenitis, low TLR2 expression on monocytes ($3.39{\pm}$1.2% versus $4.64{\pm}2.6%$) together with significantly lower TLR2 mRNA expression than in the healthy controls was seen after $Pam_3CSK_4$ stimulation. TLR2-mediated $TNF-{\alpha}$ and IL-6 production in patients with BCG vaccine-associated suppurative lymphadenitis ($TNF-{\alpha}$, $775.5{\pm}60.8pg/mL$; IL-6, $4,645.8{\pm}583.9pg/mL$) were also lesser than that in healthy controls ($TNF-{\alpha}$, $1,098.5{\pm}94.3pg/mL$; IL-6, $6,696.3{\pm}544.3pg/mL$). Conclusion : These findings suggest that low TLR2 expression on monocytes might be associated with increased susceptibility to BCG vaccine-associated suppurative lymphadenitis.
Background : Recently the incidence of tuberculosis is increasing in many countries and control of the disease is further threatened by the emergence of multi-drug resistant tuberculosis. So rapid detection of drug resistance is very important. Pyrazinamide (PZA) is a first-line chemotherapeutic agent for tuberculosis. Now in Korea, we perform PZase activity test instead of actual pyrazinamide susceptibility test for the detection of PZA resistant M. tuberculosis. Recently the pncA gene, encoding the PZase of M. tuberculosis, was completely sequenced. And it was reported that the mutation of pncA gene would be associated with PZA resistance of M. tuberculosis. Therefore we performed this study to evaluate the possibility for the rapid detection of PZA resistant M. tuberculosis using PCR-SSCP of pncA gene. Method : 44 cultured clinical isolates of M. tuberculosis, BCG Tokyo strain. BCG French strain, and one M. bovis isolate were studied. We used H37Rv as the reference strain, The PZase activity test was done at the reference laboratory of Korean Tuberculosis Institute. DNA was extracted by bead-beater method and 561 bp fragment including pncA gene was amplified by PCR. The PCR product were digested by BstB I enzyme. SSCP was done using MDE gel. Of the 44 strains of M. tuberculosis, 22 strains were PZase-positive and other 22 strains were PZase negative. Results : Of the 22 PZase positive strains, 18 strains(82%) showed the same mobility compared with that of H37Rv and 4(18%) showed different mobility. Of the 22 PZase-negative strains, 19(86%) strains showed the same mobility pattern compared with that of H37Rv and 3(14%) showed different mobility. Naturally PZA-resistant BeG-French strain, BCG-Tokyo strain, and one M. bovis isolate showed the same band pattern each other, but their mobility were different from that of H37Rv. The results of PZase activity test and PCR-SSCP of pncA of M. tuberculosis were statistically significantly correlated each other (p<0.01). Conclusion : The PCR-SSCP after BstB I restriction of pncA gene of M. tuberculosis may be a useful method for the rapid detection of PZA-resistant M. tuberculosis.
Park, Sang-Jung;Cho, Jang-Eun;Kim, Yoon-Suk;Cho, Sang-Nae;Lee, Hye-Young
Biomedical Science Letters
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v.18
no.3
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pp.201-209
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2012
Apoptosis is a physiological programmed cell death process. Tubercle bacilli inhibit apoptosis of alveolar macrophages and phagolysosome fusion. We investigated whether the Bcl-2 family anti-apoptotic member, Bfl-1/A1, plays an important role in the anti-apoptotic process during mycobacterial infection. PMA-treated human monocytoid THP-1 cells were infected with mycobacteria (H37Rv, BCG, and K-strain) at a multiplicity of infection (MOI) of 10 for 0, 1.5, 3, 6, 9, 12, 18, 24, 48, or 72 h. In addition, PMA-treated THP-1 cells were pretreated with specific inhibitors for 45 min before stimulation with mycobacteria at an MOI of 10 for 4 h. After the indicated time, the cells were subject to reverse transcription-polymerase chain reaction (RT-PCR) analysis, and a Bfl-1/A1-specific Western blot was performed. In PMA-differentiated THP-1 cells, the expression level of Bfl-1/A1 mRNA was increased by Mycobacterium tuberculosis (MTB) H37Rv infection. The mRNA level of Bfl-1/A1 peaked 3 h after MTB infection, then declined gradually until 9 h. However, Bfl-1/A1 mRNA induction gradually re-increased from 24 h to 72 h after MTB infection. No difference in Bfl-1/A1 expression was detected following infection with MTB H37Rv, K-strain, or M. bovis BCG. These results were not dependent on mycobacterial virulence. Moreover, mRNA levels of other anti-apoptotic molecules (Mcl-1, Bcl-2, and Bcl-xL) were not increased after MTB H37Rv or K-strain infection. These results suggest that mycobacteria induce the innate immune host defense mechanisms that utilize Bfl-1/A1 molecules at early time points, regardless of virulence.
Tn order to be helpful to control dispersed microorganisms for stabLlization of wastewater treatment in a paper-makillg process, dominant strains were isolated aerobically and anaerobically. and identified and physiological characteristics were also analyzed. Pseudomonas carboxydohydrogena, Cardiobacten'm hominis, lvIicrococcus lylae, XanfomonCls campestris p" juglandis, Micrococcus diversus, and Comamonas terrigencl as aerobic dominants, and Streptococcus bovis and Prevotella buccae as anaerobIc dominants were identified fi'om the supernatent of the primary settling tank. It seemed that microflora in the treatment process would consist of many kinds of microorganisms, whose dominant would change easily according to environmental conditions, They all grew well at $37^{\circ}C$ and at different initial medium pH's. Especially, some of them required sulfate ion for their growth, which came from a chemical coagulant of aluminium sulfate in the primary settling tank. Interestingly. many anaerobes grew well even in the aerobic wastewater treatment process and seemed to have some functions. Population of anaerobes increased three times in the supematant of primary settling tank and ten times in Lhe bottom sludge of primary settling tank than in the prime wastewater. Therefore, these anaerobes contributed to the producH tion of offensive gases, which would make some microorganisms not precLpitate and be buoyant.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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