Chitosan is a natural polymer derived from chitin that has been widely used as a dietary supplement and in a variety of pharmacological and biomedical applications. In addition, water-soluble chitosan has been used to enhance the stability of chitosan in water and reduce cytotoxic activity induced by acetic acid. In this study, the antibiotic activity and mechanism of low molecular weight water-soluble chitosan (LMWSC; MW1, MW3, MW5, and MW10) were examined in pathogenic bacteria cells and vesicles containing bacterial membrane lipids. MW10 displayed potent antibacterial activity against pathogenic bacteria strains and no cytotoxicity against mammalian cells. In addition, the degree of calcein leakage was examined as a function of lipid composition (PE/PG=7/3 w/w). The results of these experiments demonstrated that MW10 promoted leakage in negatively-charged membranes. Furthermore, confocal microscopy revealed that MW10 was located in the plasma membrane.
Neuronal growth regulator 1 (NEGR1) is a GPI-anchored membrane protein that is involved in neural cell adhesion and communication. Multiple genome wide association studies have found that NEGR1 is a generic risk factor for multiple human diseases, including obesity, autism, and depression. Recently, we reported that Negr1-/- mice showed a highly increased fat mass and affective behavior. In the present study, we identified Na/K-ATPase, beta1-subunit (ATP1B1) as an NEGR1 binding partner by yeast two-hybrid screening. NEGR1 and ATP1B1 were found to form a relatively stable complex in cells, at least partially co-localizing in membrane lipid rafts. We found that NEGR1 binds with ATP1B1 at its C-terminus, away from the binding site for the alpha subunit, and may contribute to intercellular interactions. Collectively, we report ATP1B1 as a novel NEGR1-interacting protein, which may help deciphering molecular networks underlying NEGR1-associated human diseases.
Antioxidant effect of Korean ginseng (Panax ginseng C.A. Meyer) was investigated in rats. Long-term administration of ginseng water extract protected the activity of liver cytosotic SOD, catalase and glutathione peroxidase from being significantly decreased with advancing age (p<0.05). It was more effective toward glutathione peroxidase than other antioxidant enzymes. However, the level of sulfhydryl compounds and its related enzymes such as glutathione reductase and glutathione-5-transferase was not significantly changed by the administration of ginseng. Liver microsomal formation of reactive oxygen species such as superoxide and hydrogen peroxide did not show a significant difference between two groups although it was slightly decreased with age, but lipid peroxidizability of microsomal membrane induced by a prooxidant was slightly lower in ginseng-treated rats. Interestingly, antioxidant capacity of plasma from ginseng treated rats on autooxidation of ok-brain homogenates was much higher than that of normal ones. However, resistance of RBC membrane against oxidative stress showed a similar tendency. The content of serum TBA reactive substances lowered consistently in the rats treated with r ginseng at all corresponding age and a significant difference between two groups was found at 24 months of age (p<0.05). Ginseng extract protected lipid peroxidation in brain and liver. This protection was more effective in the stressed rats imposed by immobilization than normal ones. In conclusion, ginseng water extract protected the age related deterioration of major antioxidant enzymes, and this effect was more striking with increasing duration of treatment. This comprehensive antioxidant action of ginseng seems to be bra certain action of ginseng other than a direct antioxidant action, which might be a long term normalizing effect through the harmony of various components.
Kim, Han-Su;Lee, Yu-Sub;Lee, Sang-Hee;Cheong, Hee-Tae;Park, Choon-Keun;Lee, Seunghyung;Yang, Boo-Keun
Journal of Life Science
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v.27
no.5
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pp.517-523
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2017
This study was to investigate the role of antioxidants on the characteristics of arsenite-damaged boar semen. Collected sperm was diluted with semen extender, and $100{\mu}M$ arsenite was used for sperm damage. Then melatonin, silymarin, curcumin, and vitamin E were applied for 3, 6, and 9 hr in arsenite-treated boar sperm. Sperm characteristics were then analyzed for motility, plasma membrane integrity, mitochondrial activity, and lipid peroxidation. In the results, sperm motility (control, $77.3{\pm}1.8%$) was decreased by arsenite ($33.3{\pm}1.5%$), while the antioxidant treatment groups (100 nM melatonin, $55.8{\pm}3.4%$; $2{\mu}M$ silymarin, $48.8{pm}3.4%$; $10{\mu}M$ curcumin, $53.9{\pm}2.8%$; and $500{\mu}M$ vitamin E, $54.5{\pm}3.1%$) showed increases compared to the arsenite group (p<0.05). $100{\mu}M$ arsenite decreased the sperm plasma membrane integrity ($24.5{\pm}1.6%$) and mitochondrial activity ($58.2{\pm}2.6%$), and increased lipid peroxidation ($5.3{\pm}0.2%$) at 3 hr (p<0.05). However, arsenite-treated samples with 100 nM melatonin, $2{\mu}M$ silymarin, $10{\mu}M$ curcumin, and $500{\mu}M$ vitamin E increased the plasma membrane integrity and mitochondria activity, and decreased lipid peroxidation compared to the arsenite-treated samples. In summary, arsenite may induce sperm damage and oxidation stress, while antioxidants such as melatonin, silymarin, curcumin, and vitamin E are useful for maintaining sperm characteristics. Therefore, antioxidants can protect sperm against damage by arsenite in fresh boar semen.
Ha, Hun-Joo;Park, Young-Mee;Ahn, Young-Soo;Kim, Kyung-Hwan
The Korean Journal of Pharmacology
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v.31
no.3
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pp.323-331
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1995
Monocyte/macrophage infiltration is the well known initial features associated with the development of glomerular disease including non-immune mediated nephropathy. Tumor necrosis factor ${\alpha}(TNF{\alpha})$, a cytokine produced primarily by monocyte/macrophage, exhibits similar effects as observed at the initial stages and during the progression of glomerular injury. Because the mesangial cells are target cells for glomerular injury, the present study examined the effect of $TNF{\alpha}$ on glomerular mesangial cell membrane lipid peroxidation as an index of cytotoxicity attributing to $TNF{\alpha}$. Primary culture of rat mesangial cell was established by incubation of glomeruli isolated from male Sprague-Dawley rat kidneys utilizing a standard sieving method. The levels of lipid peroxides in the mesangial cells were quantitated by malondialdehyde- thiobarbituric acid adduct formation. During an 8 hour incubation at $37^{\circ}C$, $TNF{\alpha}$ at 10 to 10,000 units/ml increased the levels of lipid peroxides dose dependently. Western blot analysis demonstrated that a short thermal stress induced heat shock response and the synthesis of heat shock protein 70(hsp70) in this mesangial cells. Further, this induction of hsp 70 prevented increase of lipid peroxides in the mesangial cells exposed to $TNF{\alpha}$. These data suggest that $TNF{\alpha}-induced$ lipid peroxidation in the mesangial cells may have pathophysiological relevance to glomerular injury and prior induction of heat shock response may play a role in the cellular resistance against $TNF{\alpha}-induced$ glomerular injury.
Biochemical consequence of the accumulation in cells of superoxide $(O^{-}_{2})$ which was proposed to be probably a common chemical factor in the secondary process of the mechanism of chilling injury as well as in the visible light photodamage in cells of higher plants, has been investigated in the present work. Especially focused was the destructive effect of $O^{-}_{2}$ on the biochemical activity of mitochondria, as informations which support the suggestion that mitochondrial inner membrane is the major site of $O^{-}_{2}$ production have been collected. Mitochondria and submitochondrial particles (SMP) were prepared from soybean hypocotyls for this case study. When SMP were treated with the electrolytically produced $O^{-}_{2}$ they suffered not only inhibition of the membrane-bound enzymes as demonstrated by cytochrome c oxidase, but also lipid peroxidation of membrane as proved by malondialdehyde production. Malate dehydrogenase present in the protein extract from mitochondrial matrix was also inhibited by the $O^{-}_{2}$ treatment. These results exhibited the chaotic effect of the overproduction and accumulation of $O^{-}_{2}$ in cells under a certain abnormal circumstance such as environmental stress on the physiological function of mitochondrial; disruption of the cellular metabolic pathways and the structural integrity of membrane.
This study was conducted to investigate the protective effect of genistein on the antioxidative defence system and membrane fluidity in chick skeletal muscle cells after supplementation with 0, 20, 40, and $80{\mu}mol/L$ genistein in $50{\mu}mol/L$$FeSO_4/H_2O_2$ treated cells for 24 h. Genistein supplementation recovered the decreased activity of total superoxide dismutase induced by $FeSO_4/H_2O_2$, significantly increased glutathione peroxidase activity (p<0.05) and decreased malondialdehyde production (p<0.05). The treatment of 80 mol/L genistein in $FeSO_4/H_2O_2$ treated cells decreased the secretion of creatine kinase (p<0.05). Fluorescence polarization values and microviscosities observed with $FeSO_4/H_2O_2$ treated cells were significantly higher than those observed with no $FeSO_4/H_2O_2$ treated cells. The addition of $80{\mu}mol/L$ genistein improved the increased fluorescence polarization value (p<0.05) caused by $FeSO_4/H_2O_2$ treatment. The microviscosity value was significantly decreased by adding genistein (p<0.05). In conclusion, genistein protected skeletal muscle cells from oxidative damage by improving antioxidative status and membrane fluidity.
This study was designed to investigate the effects of dietary garlic powder on cytochrome P450 enzymes and membrane stability in murine hepatocarcinogenesis initiated by diethylnitrosamine (DEN). Male Sprague-Dawley rats received a single intraperitoneal injection of DEN (200 mg/kg body wt) dissolved in saline. After 2 weeks on a basal diet, animals were fed diets containing 0. 0.5. 2.0. or 5.0% garlic powder for 6 weeks, and were subjected to two-thirds partial hepatectomy. The areas of placental glutathione S-transferase (GST-P) positive foci were inhibited in rats fed with garlic diets. GST-P is the most effective marker for DEN-initiated lesions. Hepatic microsomal lipid peroxidation was significantly decreased in rats fed with 2.0 and 5.0% garlic powder diets compared with that observed in the control animals and hepatic microsomal glucose 6-phosphatase (G6Pase) activity was found to increase significantly in rats fed 0.5 and 2.0% garlic powder diets. Thus as little as 0.5% garlic powder has a positive effect on the stability of hepatic microsomal membranes. p-Nitrophenol hydroxylase (PNPH) activity and the level of cytochrome P450 2E1 protein in the hepatic microsomes from rats fed diets containing 2.0 and 5.0% garlic powder were much lower than those of control microsomes. Rats fed 5.0% garlic powder diets exhibited the lowest P450 2E1 activity and protein levels among groups. Pentoxyresorufin O-dealkylase activity and immunoblot (cytochrome P450 2B1) analyses were not different between groups. However, the levels of cytochrome P450 1A1/2 protein in rats fed 0.5 and 2.0% garlic powder were significantly induced compared to controls. These results suggest that 2.0% garlic powder is effective in inhibiting the areas of GST-P positive foci, modulating certain isoforms of cytochrome P450 enzymes and stabilizing the hepatic microsomal membrane. Thus, the selective modification of cytochrome P450 enzymes and membrane stability by dietary garlic powder may influence areas of GST-P positive foci and chemoprevention of post-initiation of rat hepatocarcinogenesis.
The relative distribution ratio of barbiturates between hyarocarbon interior and surface region of outer monolayer of synaptosomal plasma membrane vesicles (RSPMV) isolated from rat whole brain was determined by employing the fluorescent probe technique. The two fluorescent probes N- octadecylnaphthyl-2-amine-6-sulfonic acid (ONS) and 12-(9-anthroyloxy) stearic acid (AS) were utilized as probes for hydrocarbon interior and surface of outer monolayer of RSPMV. respectively. The Stern-Volmer equation for fluorescent quenching was modified to calculate the relative distribution ratio. The analysis of preferential quenching of these probes by barbiturates indicates that pentobarbital, hexobarbital, amobarbital and phenobarbital are predominantly distributed on the surface region. whereas thiopental sodium has an accessibility to the hydrocarbon interior of the outer monolayer of the RSPMV. From these results, it is strongly suggested that the more effective penetration into the hydrocarbon interior of the outer monolayer of the membrane lipid bilayer could result in higher general anesthetic activity.
In the present work, the interaction of fatty acid with vesicle membrane of phospholipids was investigated using 3 different kinds of fatty acids such as stearic acid (SA), oleic acid (OA) and linoleic acid (LA). Basically, the same trend has been found in 3 fatty acid systems. The addition of fatty acid produced a close packing of liposome due to the penetration of fatty acid molecules into liposome vesicles, which resulted in a decrease in size and an increase in zeta potential of liposome. However, excessive addition of fatty acid produced a transition from liposomes to aggregates of lipid particles having polymorphic structure. The membrane fluidity, characterized by measuring membrane deformability and fluorescence anisotropy ratio of liposomes, was in good agreement with measurement results of transmission electron microscopy (TEM) and particle size. The minimum size and closest packing of liposome with SA, OA and LA were found when the molar ratios of fatty acid to lecithin were 0.70, 0.50, and 0.25 respectively.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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