The white rot fungi Phanerochaete chrysosporium(IFO 31249) Trametes sp and Pleurotus sp. were studied for their ability to degrade Polycyclic Aromatic Hydrocarbons(PAHs) using anthracene and pyrene as model compounds. The disapperarance anthracene and pyrene of from cultures of wild type strains. P chrysosporium Trametes sp. and Pleurotus sp was observed However the activities of ligninolytic enzymes were not detected in P chrysosporium cultures during degradation while ligninolytic enzymes were detected in both culture of Trametes sp. and Pleurotus sp. Therefore our results showed that PAHs was degraded under ligninolytic as well as nonligninolytic conditions. The results also indicate that lignin peroxidase(LiP) mananese peroxidase(MnP) and laccase are not essential for the biodegradation of PAHs by white rot fungi.
An electroenzymatic system to oxidize veratryl alcohol of on electrodes with in-situ generated hydrogen peroxide was studied. We investigated hydrogen peroxide generation, current efficiency, and veratryl alcohol oxidation in the electrode system at various conditions. The reaction rates of veratryl alcohol oxidation were compared in an electrochemical, an electroenzymatic, and an usual biochemical systems to prove the concept of electroenzymatic oxidation.
PARK , CHUL-HWAN;LEE, YU-RI;KIM, TAK-HYUN;LEE, BYUNG-HWAN;LEE, JIN-WON;KIM, SANG-YONG
Journal of Microbiology and Biotechnology
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제14권6호
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pp.1190-1195
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2004
In recent years, there has been an intensive research on decolorization of dye and textile wastewater by various fungal strains. In this study, the decolorization ability of three commercial dyes, acid yellow 99, acid blue 350, and acid red 114, were investigated using 10 fungal strains. Among the fungal strains tested, Trametes versicolor KCTC 16781 completely decolorized all dyes in both solid and liquid experiments, and was also able to decolorize the mixture of those three dyes in liquid experiments. The secretion of the ligninolytic enzymes into the extracellular medium during decolorization by T versicolor KCTC 16781 was also studied. No lignin peroxidase activity was detected, and manganese peroxidase and laccase activities were investigated.
This study was undertaken to investigate the characteristics and the productivities of lignin olytic enzymes: laccase (Lac) and Mn-dependent peroxidase (MnP) from Coriolus versicolor and Lentinus edodes respectively. Enzymes were isolated from cultural filterates and purified according to the standard methods. These enzymes showed one band in SDS-PAGE and their molecular weights were found 62,000 and 45,000 dalton respectively. Polyclonal antibodies against Lac and MnP were raised against mouse. In the ELISA (enzyme-linked immunosorbent assay), Lac and MnP-antiserum produced a strong positive reaction with Lac and MnP antigen($A_{405}$=2.50 and 3.53 respectively). The sera to negative (S/N) ratio was determined by the dividing the mean absorbance of antibodies by the corresponding diluted samples from normal mouse serum. The sera produced showed 2 times more positive reaction in S/N ratio than negative sera.
한국작물학회 2017년도 9th Asian Crop Science Association conference
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pp.159-159
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2017
Drought, a common environmental constraint, induces a range of physiological, biochemical and molecular changes in plants, and can cause severe reductions in crop yield. Consequently, understanding the molecular mechanisms of drought tolerance is an important step towards crop biotechnology. Here, we report that the rice (Oryza sativa) homeodomain-leucine zipper class IV transcription factor gene, ${\underline{R}ice}$${\underline{o}utermost}$${\underline{c}ell-specific}$ gene 10 (Roc10), enhances drought tolerance and grain yield by increasing lignin accumulation in ground tissues. Overexpression of Roc10 in rice significantly increased drought tolerance at the vegetative stages of growth and promoted both more effective photosynthesis and a reduction in water loss rate, compared with non-transgenic controls or RNAi transgenic plants. Importantly, Roc10 overexpressing plants had a higher drought tolerance at the reproductive stage of growth and a higher grain yield compared with the controls under field-drought conditions. Roc10 is mainly expressed in outer cell layers including the epidermis and the vasculature of the shoots, which coincides with areas of cell wall lignification. Roc10 overexpression elevated the expression levels of lignin biosynthetic genes in shoots, with a concomitant increase in the accumulation of lignin, while the overexpression and RNAi lines showed opposite patterns of lignin accumulation. We identified downstream target genes of Roc10 by performing RNA-seq and chromatin immunoprecipitation (ChIP)-seq analyses of shoot tissues. Roc10 was found to directly bind to the promoter of PEROXIDASEN/PEROXIDASE38, a key gene in lignin biosynthesis. Together, our findings suggest that Roc10 confers drought stress tolerance by promoting lignin biosynthesis in ground tissues.
리그닌 모델화합물은 리그닌 분해효소에 의해 생분해되는 과정에서 해중합 또는 중합되는 현상이 나타남으로써, 리그닌 분해효소가 진정으로 리그닌의 분해에 관여하는지 의문이 제기되고 있다. 본 연구는 구름 버섯과 표고버섯으로부터 단리한 laccase와 Mn-peroxidase(MnP)가 고분자 리그닌모델화합물로서의 ligninsulfonates(LS)을 분해시키는 특성을 이해하고자 시도되었다. 특히 pH의 변화와 당(糖)의 첨가에 따른 LS의 분자량의 변화를 관찰하였다. laccase의 경우 pH 6.0에서는 LS의 중합현상이 나타났으나 pH 4.5에서는 고분자분획의 LS가 현저히 분해됐다. glucose의 첨가시 이같은 현상은 두드러졌다. MnP 역시 pH 4.5에서 LS가 분해되었으며, 특히 배양액에 cellobiose를 첨가했을 때 현저하게 나타났다. 이상의 결과로부터, 리그닌 분해효소에 의한 LS의 분해는 효소의 종류와 반응조건에 따라 달라짐을 확인할 수 있었다. 흥미롭게도 LS의 분해에 따른 반응액의 색도(色度)(color index)의 변화는 관찰되지 않았다.
내분비장애물질은 분해가 매우 어려워 자연계에서 먹이그물을 통하여 사람에게 농축 전달된다. 이들은 정상적인 내분비계에 혼란을 일으키며, 특히 성호르몬의 작용에 많은 피해를 준다. 이를 효율적으로 분해하고 이들의 에스트로겐 활성을 제거하고자 백색부후균의 하나인 아교버섯(Phlebia tremellosa)을 활용하여 4가지 내분비계 장애물질의 분해에 대한 실험을 수행하였다. 아교버섯의 manganese peroxidase (MnP) 활성을 높이기 위하여 구름버섯의 MnP 유전자를 아교버섯에 도입하여 형질전환체를 확보하였으며 이들은 유전적으로 MnP 활성을 안정되게 나타냈다. 내분비 장애물질을 분해하는 조건에서 내분비장애 물질에 따라 30${\sim}$45%의 분해율을 보인 야생형에 비하여 이 형질전환체들 중 T5는 70${\sim}$88%의 분해율을 보였으며 에스트로겐 활성의 제거에도 약 2배 향상된 능력을 보였다.
Horseradish peroxidase(HRP) 및 $H_2O_2$. 와 함께 2, $2^+$-azinobis (3-ethylbenzthiazoline-6-sulfonic acid)(ABTS)블 라디 칼 전달체로서 사용하면 kraft 펄프의 표백효율이 증가하였다. 이때 반 응에 사용할 수 있논 $H_2O_2$의 농도는 약 20 mM까지 증가시킬 수 있었다 Kraft 펄프의 표백효율은 효소의 사용량을 0 0.3 mg/90 mL 까지, ABTS의 농도를 2 mM 까지 높일수록 증가하였으나 이후에는 더 이상 증가하지 않았다. 또한 HRP 에 의한 펄프표백 효율은 효소의 활성 및 펄프에의 홉착강도 와 멸접한 관련이 있었다. HRP의 활성과 kraft 펼프의 표백 효율은 pH 7에서 가장 높았으며 산성용액과 암쌀려성 용액 에서는 강소하였다. 또한 HRP의 펄프홉착 강도는 pH 6-8에 서 가장 낮았고 산성용액(pH 5) 및 알칼리성 용액(pH 9)에서 가장 높았다 펼프의 주요구성 성분인 결정형 셀룰로즈와 려 그닌 중 려그년에 대한 효소의 흡착강도가 더욱 높았다.
본 연구에서는 백색부후균 중 줄버섯, 단색털구름버섯, 산느타리 및 유관버섯 등의 균사체를 이용하여 congo red, amaranth, orange G 및 methylene blue 등의 합성염료 탈색에 관한 실험을 수행하였다. 실험 결과 줄버섯과 단색털구름버섯은 congo red가 함유된 고체와 액체배지에서 이들 염료를 93~95% 탈색하였으며 amaranth는 약 80%, orange G는 62~70% 탈색시키는 것으로 나타났으나 유관버섯에 의한 3종류의 염료 탈색율은 30% 내외로 매우 낮았다. congo red, amaranth 및 orange G 등 각각의 염료가 첨가된 배지에서의 염료 탈색율은 이들 배지에서 배양한 균사체의 생장과 상관관계가 있는 것으로 나타났다. 그러나 모든 공시 균주는 methylene blue가 함유된 고체와 액체배지에서 methylene blue를 효과적으로 탈색하지 못하는 것으로 나타났다. 공시된 백색부후균의 액체 배지에서의 리그닌 분해효소 생산을 탐색하기 위해 1%의 나프탈렌이 첨가된 PDB 배지에 공시균을 10일 간 배양 후 효소의 종류와 양을 분석한 결과 모든 공시균은 laccase, lignin peroxidase 그리고 manganese peroxidase 등의 효소를 생산하는 것으로 확인되었으며 공시균주 중 줄버섯이 리그닌 분해 효소의 생산이 가장 왕성한 것으로 나타났다.
삼림지역의 고목에서 분리한 Peniophora sp. JS17 균주는 사람 머리카락 유래 멜라닌을 탈색하는 세포 외 분비효소를 생산했다. JS17 균주는 laccase 및 manganese peroxidase 활성을 나타냈지만 lignin peroxidase 활성은 나타내지 않았다. 본 균주를 회분배양한 결과 멜라닌 탈색 활성은 laccase 활성으로부터 유래하는 것으로 확인되었다. Peniophora sp. JS17 균사체로부터 멜라닌 탈색 효소를 생산하기 위한 배지 조건을 조사하였다. 다양한 합성 배지 중에서 minimal medium (2% glucose, 0.2% malt extract, 0.1% $KH_2PO_4$, 0.4% $MgSO_4{\cdot}7H_2O$)이 가장 높은 laccase 활성을 나타내었다. Laccase 생산에 대한 배양 조건을 최적화하기 위하여 minimal medium의 조성 중에서 탄소원 및 질소원에 대한 영향을 조사하였다. 다양한 탄소원 및 질소원 중에서 각각 2% xylose 및 0.4% tryptone의 경우에 가장 높은 laccase 활성을 나타내었다. Ammonium sulfate 침전 및 Hitrap Q Sepharose column을 이용하여 정제한 효소는 SDS-PAGE에서 약 70 kDa의 분자량 부근에 2종류의 isozyme 형태로 존재 하였다. 멜라닌 탈색율은 HBT 및 syringaldehyde의 존재하에서 48시간 만에 각각 77% 및 55%를 나타내었고, mediator가 없는 조건에서는 9%의 멜라닌 탈색율을 나타내었다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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