The establishment of cell suspension culture and plant regeneration of the halophytic Leymus chinensis (Trin.) are described in this study for the first time. Callus induction solid medium containing Murashige and Shoog (MS) basic salt, $2.0\;mg\;l^{-1}$ 2,4-dichlorophenoxyacetic acid (2,4-D), and $5.0\;mg\;l^{-1}$ L-glutamic acid with $30.0\;g\;l^{-1}$ sucrose and $4.0\;g\;l^{-1}$ gelrite for solidification induced the highest rate of cell division in Type 1 callus among calli of various types. Liquid medium with the same hormone distribution was therefore, used for cell suspension culture from Type 1 callus. Over a 30 d suspension culture at 100 rpm, great amounts of biomass were accumulated, with 71.07% average daily increment and 22.32-fold total fresh weight increment. Comparison of before and after suspension culture, the distribution of different size callus pieces and the maintenance of callus type were basically unaltered, but a slight increase in relative water contents was observed. To induce the potential of plant regeneration, the directly transferring on plant regeneration solid medium containing MS basic salt, $0.2\;mg\;l^{-1}$$\alpha$-naphthalene acetic acid (NAA), $2.0\;mg\;l^{-1}$ kinetin (Kn), and $2.0\;g\;l^{-1}$ casamino acid and indirectly transferring were simultaneously performed. Even now growth rates of suspension-derived callus on solid medium were approximately half of those of Type 1 callus, but faster somatic embryogenesis was observed. Rooting of all regenerated shoots was successfully performed on half-strength MS medium. All plants appeared phenotypically normal.
Proline accumulates in plants under environmental stresses including saline stress and alkaline stress. Here, we investigated the responses to two different stresses, saline stress (200 mM NaCl) and alkaline stress (100 mM $Na_2CO_3$) in two Leymus chinensis (Trin.) genotypes, LcWT07 and LcJS0107, and effects of exogenous proline on the activities of antioxidant enzymes. Both saline stress and alkaline stress significantly induced the accumulation of proline in leaves of the two genotypes after 96 h, and alkaline stress caused a transient and significant increase in LcJS0107 plants at 6 h. A reduction in the activities of catalase (CAT, EC 1.11.1.6) and ascorbate peroxidase (APX, EC 1.11.1.11), but not in the activity of superoxide dismutase (SOD, EC 1.15.1.1), was detected in plants exposed to saline and alkaline stresses. Remarkable decrease in relative water contents (RWC) was found in 144 h stressed plants. However, lipid peroxidation estimated by malonyldialdehyde (MDA) content in leaves remained relatively stable. With the addition of exogenous proline, it did not cause changes of proline levels in two genotypes, but combined with saline or alkaline stress, the exogenous application of proline significantly induced proline accumulation after even short treatment periods. Combined with salt stress, the exogenous application also increased the activities of CAT and APX. These results indicated that exogenous proline not only increases proline levels in vivo as a osmotic adjustment under stress, but mitigates the detrimental effects of saline and alkaline stresses by increasing the activities of antioxidant enzymes.
밀은 세계 3대 작물로 국내 1인당 소비량은 지속적으로 증가하고 있다. 하지만 국내 밀의 유전적 배경 확대와 기후변화 신속 대응을 위한 국내 밀 유전자 풀의 확장은 밀의 질적 향상을 위해 매우 중요한 목표이다. 국내 자생 갯그령(Leymus mollis)은 해안가에서 번식하는 영년생 식물로 뿌리줄기를 이용한 왕성한 번식력을 가지고 있다. 또한, 해안가의 뜨겁고 염에 대한 적응성과 저항성을 가지고 있다. 이러한 특성은 밀 유전자 풀의 확장에 매우 유용할 것이다. 국내 밀 재배지 한계 극복을 위한 간척지 재배가 가능한 내염성 강화 밀 자원 개발을 위하여 모본인 보통 밀(Triticum aestivum L., Chinese Spring)과 부본인 갯그령을 원연교배하였다. 갯그령과 보통 밀의 원연 교배를 통한 종자 형성은 매우 어려우나 불가능한 것은 아니며, 최종적으로 10개의 교배 종자를 얻어 F1 식물체로 생장하는 과정에서 5 식물체는 고사하였고, 나머지 5 식물체는 영년생 특성인 뿌리줄기에 의해 새로운 줄기가 출현하는 것을 확인하였다. 또한, 갯그령의 DNA를 이용한 genomic in situ hybridization 방법으로 F1 식물체에서 갯그령의 염색체가 밀의 유전적 배경에 이입된 것을 확인하였다. F2 식물체는 모본인 보통 밀보다 긴 수장과 간장을 나타내고 이삭 수는 많았지만, 출수기는 보통 밀보다 3주 이상 늦어지는 것을 확인하였다. 내염성 평가를 위하여 F2 종자를 2% 소금물에서 발아시켜 생육이 좋은 식물체를 선발하여 50 cm 투명 아크릴 원통에 이식하고 2% 소금물을 지속적으로 관개하였다. 내염성 강화 F2 식물체는 염에 감수성을 보인 식물체에 비하여 상대적으로 긴 이삭과 종자 형성을 보였으며, 감수성 식물체는 종자 형성이 이루어지지 않았다. 또한, 내염성 강화 F2 식물체는 감수성 식물체에 비하여 좋은 뿌리의 신장과 천근성을 보였다. 이러한 갯그령의 식물학적 특성이 이입된 계통은 기후변화 대응, 환경 적응성 강화, 및 근권 강화에 좋은 작물 소재로 이용할 수 있다고 생각한다.
Near-infrared reflectance spectroscopy (NIRS) was used to study the potential of adulteration of imported forage. Hay samples were prepared two set ; calibration set and validation one. The former were mixed 12 sets from 100% to 50% with Yangcho (Chinese leymus, leymus chinensis Trin.) and the latter were adulterated with 6 set of 8% to 38% in 5% interval. Mixed materials with Yangcho were rice straw, reed and alfalfa. Stand error of prediction (SEP) in calibration equation for alfalfa, reed and rice straw were 0.97, 0.97 and 0.99 also 0.54, 0.86 and 1.26%. Multiple correlation coefficient ($R^2$) for alfalfa, reed and rice straw were 0.99, 0.97 and 0.99. SEP in the same samples were 1.88, 2.15 and 1.49, respectively.
This study is to develop new wheat breeding material through wide hybridization with wild species harboring useful characteristics such as salt, heat, and drought tolerance. Leymus mollis, wild rye was used to improve wheat genetic quality. L. mollis, is a perennial plant harboring tolerance against salt, heat, and drought because L. mollis distributes on the seaside. The F1 hybrids were produced by crossing between common wheat (Triticum aestivum L., Chinese Spring) and L. mollis. Genomic in situ hybridization revealed that the F1 hybrids have L. mollis genome. For the evaluation of salt and drought tolerance, seeds from the F2 were used. Under 2% NaCl solution, the F3 wheat-Leymus addition plants with salt tolerance showed more tillering and longer roots than other F3 plants without salt tolerance. Also, the F3 plants with salt tolerance showed better shallow-rooted than other F3 plants without salt tolerance. Finally, the F3 plants with salt tolerance made seed-setting under 2% NaCl condition, but other F3 plants without salt tolerance were not. Under drought conditions, the F3 plants with drought tolerance showed longer culm and spike length than other F3 plants without drought tolerance and even those of Chinese Spring under well-water conditions. We evaluated and selected the F3 plants with salt or drought tolerance for generation advancement.
The objective of this study was to assess the use of peach pomace in total mixed ration (TMR) silages and clarify the differences in aerobic stability between TMR and TMR silages caused by lactic acid bacteria (LAB). The TMR were prepared using peach pomace, alfalfa hay or Leymus chinensis hay, maize meal, soybean meal, cotton meal, limestone, a vitamin-mineral supplement, and salt in a ratio of 6.0:34.0:44.4:7.0:5.0:2.5:1.0:0.1 on a dry matter (DM) basis. Fermentation quality, microbial composition, and the predominant LAB were examined during ensiling and aerobic deterioration. The results indicated that the TMR silages with peach pomace were well fermented, with low pH and high lactic acid concentrations. The aerobic stability of TMR silages were significantly higher than that of TMR. Compared with TMR silages with alfalfa hay, TMR silage with Leymus chinensis hay was much more prone to deterioration. Although the dominant LAB were not identical in TMR, the same dominant species, Lactobacillus buchneri and Pediococcus acidilactici, were found in both types of TMR silages after 56 d of ensiling, and they may play an important role in the aerobic stability of TMR silages.
Objective: The objective of this study was to isolate proteolytic microorganisms and evaluate their effects on proteolysis in total mixed ration (TMR) silages of soybean curd residue. Methods: TMRs were formulated with soybean curd residue, alfalfa or Leymus chinensis hay, corn meal, soybean meal, a vitamin-mineral supplement, and salt in a ratio of 25.0: 40.0:30.0:4.0:0.5:0.5, respectively, on a basis of dry matter. The microbial proteinases during ensiling were characterized, the dominate strains associated with proteolysis were identified, and their enzymatic characterization were evaluated in alfalfa (A-TMR) and Leymus chinensis (L-TMR) TMR silages containing soybean curd residue. Results: Both A-TMR and L-TMR silages were well preserved, with low pH and high lactic acid concentrations. The aerobic bacteria and yeast counts in both TMR silages decreased to about 105 cfu/g fresh matter (FM) and below the detection limit, respectively. The lactic acid bacteria count increased to 109 cfu/g FM. The total microbial proteinases activities reached their maximums during the early ensiling stage and then reduced in both TMR silages with fermentation prolonged. Metalloproteinase was the main proteinase when the total proteinases activities reached their maximums, and when ensiling terminated, metallo and serine proteinases played equally important parts in proteolysis in both TMR silages. Strains in the genera Curtobacterium and Paenibacillus were identified as the most dominant proteolytic bacteria in A-TMR and L-TMR, respectively, and both their proteinases were mainly with metalloproteinase characteristics. In the latter ensiling phase, Enterococcus faecium strains became the major sources of proteolytic enzymes in both TMR silages. Their proteinases were mainly of metallo and serine proteinases classes in this experiment. Conclusion: Proteolytic aerobic bacteria were substituted by proteolytic lactic acid bacteria during ensiling, and the microbial serine and metallo proteinases in these strains played leading roles in proteolysis in TMR silages.
야생 호밀 염색체 첨가 계통의 단백질 발현 양상을 보통 밀과 비교함으로써 발현의 차이를 보이는 단백질의 기능을 동정함으로써 야생 호밀의 작물학적 유용 가치를 확인하고자 이 연구를 수행하였다. 전반적으로 야생 호밀 염색체 첨가계통은 보통 밀의 유전적 배경을 바탕으로 건조와 열에 대한 비생물학적 스트레스에 대한 저항성 관련 단백질과 바이러스성 병원균에 대한 저항성 관련 단백질 및 척박한 환경에 적응하는 생리대사에 관련된 단백질을 가지고 있는 것을 확인하였다. 하지만 아직 야생 호밀의 단백질 기능에 대한 정보와 작물학적 이용에 대한 연구가 미흡한 상태이다. 앞으로 국내 야생 호밀의 유용 유전자원으로써의 작물학적 이용과 기능에 대한 지속적인 연구가 필요하다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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