Journal of the Korean Society of Food Science and Nutrition
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v.27
no.5
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pp.869-874
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1998
The effect of chitosanoligosaccharide(CTO) on kimchi fermentation was investigated to see the optimal CTO concentration adding into Kimchi. Lactobacillus plantarum and Leuconostoc mesenteroides were cultured in flasks under the condition of various CTO concentrations. In the case of Lactobacillus plantarium, the growth was inhibited in the degree with 52, 79 and 100% at the concentration of 0.005, 0.007, 0.05% CTO after 14 hours culture, respectively. The growth of Leuconostoc mesenteroides was significantly inhibited in the degree with 7,33 and 90% at the concentration of 0.002, 0.003 and 0.004% CTO after the culture, respectively. Kimchi was formulated with variious CTO concentrations(0.005~0.2%) and fermented at 2$0^{\circ}C$ during 12 days. The fermentation periods were increased 2~6 times more than that of control(0% CTO). Also, off-flavour by adding CTO was insignificant in all the kimchi samples.
Microbiological characteristics of low salt Mul-kimchi was examined. Mul-kimchi was prepared by mixing of radish (25%), green onion (2.4%), red pepper (1.9%), garlic (1.9%) and salt (0, 0.2, 0.5, 1.0, 1.5, 2.0, 2.5, 2.5, 3.0%) in water and fermented at 4, 15 and $25^{\circ}C$ for 10 days, respectively. During fermentation period, total cell, Leuconostoc sp., Lactobacillus sp., Streptococcus sp., Pediococcus sp., coliform bacteria, gram (-) bacteria and yeast cell number were counted on their selection media. The microbes in Mul-kimchi were isolated and identified. Total cell number increased as salt concentration decreased and fermentation temperature increased. Lactic acid bacteria showed the highest number in 1.0% salt concentration. Yeast cell number increased with increase of salt concentration. Lactobacillus sp. were identified Lactobacillus plantarum and L. pentosus in Mul-kimchi containing $0.2{\sim}1.0%$ salt while those of Mul-kimchi containing 3.0% salt were Lactobacillus plantarum and L. brevis. The other lactic acid bacteria were identified Leuconostoc citrum, Leu.mes.ssp.mesenteroides/dextranicum and streptococcus facium in Mul-kimchi containing $0{\sim}3.0%$ salt while Pediococcus sp. was not detected. Gram-negative Aeromonas hydrophila, Pseudomonas fluorescens, Pseu. aureofaciens and yeast Candida pelliculosa, Cryptococcus laurentii were identified in the Mul-kimchi.
Leuconostoc has been used as a principal starter in natural kimchi fermentation, but limited research has been conducted on its phages. In this study, prophage distribution and characterization in kimchi-derived Leuconostoc strains were investigated, and phage induction was performed. Except for one strain, 16 Leuconostoc strains had at least one prophage region with questionable and incomplete regions, which comprised 0.5-6.0% of the bacterial genome. Based on major capsid protein analysis, ten intact prophages and an induced incomplete prophage of Leu. lactis CBA3626 belonged to the Siphoviridae family and were similar to Lc-Nu-like, sha1-like, phiMH1-like, and TPA_asm groups. Bacterial immunology genes, such as superinfection exclusion proteins and methylase, were found on several prophages. One prophage of Leu. lactis CBA3626 was induced using mitomycin C and was confirmed as belonging to the Siphoviridae family. Homology of the induced prophage with 21 reported prophages was not high (< 4%), and 47% identity was confirmed only with TPA_asm from Siphoviridae sp. isolate ct3pk4. Therefore, it is suggested that Leuconostoc from kimchi had diverse prophages with less than 6% genome proportion and some immunological genes. Interestingly, the induced prophage was very different from the reported prophages of other Leuconostoc species.
Proceedings of the Korean Society for Applied Microbiology Conference
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2004.06a
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pp.323-327
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2004
Leuconostoc citreum CBUE isolated from kimchi proved to harbor a small cryptic plasmid, pNS75. The complete nucleotide sequence of pNS75 was 1,821 bp and had a low G+C content of 39.2%. Computer analysis using DNASIS revealed one open reading frame (ORF), having ATG as putatitive start condon and potentially encoding proteins with molecular mass of 38 kDa. The chimeric plasmid pLeuCM was first constructed wih pNS75, pUC19 and chroamphenicol acetyltransferase (CAT) from Staphylococcus sp.. pLeuCM replicated and expressed chroamphenicol acetyltransferase in Leuconostoc citerum CBNF after transformation. To test the availability of shuttle vector as cloning vehicle of foreign gene, $\alpha$-amylase gene of Streptococcus bovis was cloned and all transformants secreated the $\alpha$-amylase successfully. The result indicates that pLeuCM is a potential shuttle vector for Leuconostoc spp. and lactic acid bacteria.
In order to understand stress response of Leuconostoc mesenteroides against lactic acid, a new Leuconostoc sp. which has acid tolerance was isolated from various Kimchi samples. And it identified as Leuconostoc mesenteroides LM3 by comparing its fatty acid composition with reference strain. Its growth pattern was investigated by adding a given concentration of lactic acid at the lag phase to the stationary phase. In the DeMan, Rogosa, Sharpe (MRS) media containing over 0.4% (final v/v) lactic acid, this strain slowed slowly After exposure of the stationary phase cells to 4% of lactic acid for 60 min, this strain could survive, whereas a reference strain, Leuconostoc mesenteroides KCTC3505, showed no survival. And changes of trehalose concentration, the activity of trehalase and ATPase in the growth of Leuconostoc mesenteroides LM3 after addition of 0.6% (final v/v) lactic acid were investigated : After exposure to lartic acid, trehalose concentration in this strain was increased in comparison with no treatment, but its trehalase activity was not changed. And its ATPase activity was constant, and intracellular pH was almost constant. This result meant Leuconostoc mesenteroides LM3 should have a tolerance against lactic acid. It remains to further study the mechanism of this acid tolerance.
Lactobacillus sakei is known to be the most populous lactic acid bacteria in over-ripened kimchi. Twenty three strains of Leuconostoc species inhibiting the growth of Lb. sakei were isolated from kimchi and amongst these the Leuconostoc mesenteroides strain CK0122 exhibited the highest antagonistic activity against Lb. sakei. The culture supernatant of the strain CK0122 was fractionated by a molecular weight cutter and lyophilized. The fraction with a molecular weight of less than 3,000 Da showed antagonistic activity against Lb. sakei. The antibacterial activity of the active fraction was sensitive to proteinase K treatment, confirming its proteinaceous nature (bacteriocin). The crude bacteriocin was active in the pH range of 4 to 7 and extremely stable after 15 min of heat treatment at $121^{\circ}C$. The crude bacteriocin inhibited the growth of Bacillus cereus, Listeria monocytogenes, Staphylococcus aureus, Alcaligenes xylosoxydans, Flavobacterium sp., and Salmonella typhimurium.
This study evaluated the levels of D(-)-lactate and L(+)-lactate, and the ratio of D(-)-lactate to total lactate (D(-)-lactate + L(+)-lactate) of 15 lactic acid bacteria (LAB) using an enzymatic method. D(-)-lactate and L(+)-lactate levels in the LAB ranged from 0.31 to 13.9 mM and 0.76 to 39.3 mM, respectively, in Bifidobacterium sp.; 1.08 to 11.7 mM and 0.69-13.0 mM in Lactobacillus sp.; 0.72 to 20.3 mM and 0.98 to 32.3 mM in Leuconostoc sp., and 33.0 mM and 39.2 mM in Pediococcus acidilacti KCCM 11747. The ratio of the range of D(-)-lactic acid to total lactic acid was 28.98%-45.76% in Bifidobacterium sp., 41.18%-61.02% in Lactobacillus sp., 29.85%-42.36% in Leuconostoc sp., and 45.71% in P. acidilacti KCCM 11747. In the future, there is a need to test for D(-)-lactate in various fermented products to which different LAB have been added and study the screening of LAB used as probiotics that produce various concentrations of D(-)-lactate.
Nineteen strains of bacteriocin-producing lactic acid bacteria were isolated from 432 Kimchi samples, and identified by the comprehensive biochemical and morphological tests verifying their cellular fatty acid composition. Using partially purified bacteriocins from these isolates, their inhibitory activities against other lactic acid bacteria and some pathogens, and sensitivity to enzyme and heat treatments were tested. The isolates were identified as Lactobacillus plantarum (2 strains), L curvatus (2 starins), L brevis (2 strains), Enterococcus faecium (6 strains), Leuconostoc mesenteroides subsp. mesenteroides (1 strain) and Lactobacillus sp. (6 strains). The bacteriocins produced by E. faecium strains provided the broadest spectrum of inhibition, affecting against other Gram-positive bacteria including lactic acid bacteria and health-threatening bacteria such as Clostridium perfringens and Listeria monocytogenes. The bacteriocins of Lactobacillus sp., L plantarum and L brevis strains were capable of inhibiting many strains of the lactic acid bacteria, whereas those of L curvatus and L mesenteroides subsp. mesenteroides strains were only inhibitory to a few strains. Generally, the inhibitory activities of both E. faecium and Lactobacillus sp. strains were greater than those of other producer strains. The bacteriocins from the isolates were sensitive to several proteolytic enzymes, and those of L curvatus and L mesenteroides subsp. mesenteroides were also sensitive to lipase and $\alpha$-amylase as well as to proteolytic enzymes. The bacteriocins from the strains of Lactobacillus sp. and a strain of L. brevis were resistant to autoclaving.
The production of extracellular mannitol by a new mannitol-producing bacterium, Leuconostoc sp. KY-002 was studied in shake flask cultures. The new isolate has a capability of utilizing fructose and sucrose for mannitol formation. Maximum mannitol production was obtained with fructose as the sole carbon source. Under the optimal culture conditions, within 70 hours of incubation, a final concentration of 26 g/L of mannitol from 50 g/L fructose was obtained with an indicated yield of 52% based on fructose consumed. However, higher concentrations of fructose ranging from 100 to 250 g/L could not effectively be transformed to mannitol due to a lack of osmotolerance. The strain produced no other polyols such as glycerol and sorbitol as by-products. Yeast extract was the best nitrogen source and high levels of inorganic phosphate up to 10 g/L promoted mannitol formation. Any mineral ions and salts did not play important role in both cell growth and mannitol production. Nicotinic acid enhanced mannitol production by 16%. The optimum culture temperature and initial pH were $35^{\circ}C$ and 6, respectively.
This study was conducted to examine the effect of mustard root on the shelf life of kimchi. Ethanol extract was prepared from the mustard root (Brassica juncea) and antimicrobial activities were examined against Lactobacillus plantarum and Leuconostoc mesenteroides which are the representative lactic bacteria in kimchi. Growth of lactic bacteria were inhibited by ethanol extract from mustard root and the growth time of Leuconostoc mesenteroides was delayed more than 24 hours compared with that of Lactobacillus plantarum. Also, the fermentative and sensory characteristics of kimchi with mustard root were evaluated during fermentation at $10^{\circ}C$. The pH and acidity was lower than that of the control kimchi and the fermentation period was retarded in proportion to the increase in mustard content. The total numbers of microorganism and lactic bacteria in the control kimchi were higher than those in kimchi with mustard root during fermentation. Leuconostoc sp. in the initial stage of growth was more inhibited than Lactobacillus sp. While the pH of kimchi were in the initial stage, the sensory evaluation score for savory flavors of the kimchi with mustard root was lower than that of control due to bitterness and pungency. But when the pH of kimchi reached the optimum stage, the scores for texture and savory flavor of kimchi with mustard root were higher than that of the control. Then overall quality score for kimchi with mustard root increased as bitterness decreased.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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