• 제목/요약/키워드: Leu-7

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DNA shuffling을 이용한 Alcaligenes faecalis T1의 PHB depolymerase 활성 증진 (Enhancement of PHB depolymerase Activity from Alcaligenes faecalis T1 by DNA Shuffling)

  • 신동성;이영하;남진식
    • 미생물학회지
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    • 제39권2호
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    • pp.76-82
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    • 2003
  • Alcaligenes faecalis T1의 Poly(3-hydroxybutyrate)(PHB) depolymerase활성 증진을 위해 DNA shuffling방법을 이용하였다. 제조된 A. faecalis T1의 PHB depolymerase 돌연변이 유전자의 library를 Pseudomonas syringae의 icenucleation protein유전자를 포함하는 발현벡터 pJHCll에 클로닝하여 약 7,000개의 형질전환체를 얻었다. 탄소원으로 PHB또는 poly(3-hydroxybutyrate-co-3-hydroxyvalerate)를 포함하는 M9최소배지를 이용하여 형질전환체들로부터 활성이 서로 다른 돌연변이주들을 선별하였다. 이들의 PHB depolymease 활성은 평판배지에서의 halo형성 및 배양 상등액을 이용한 탁도 감소 실험으로 확인하였으며,형질전환체들 중에서 shuffling전의 대조군에 비하여 사용된 기질에 따라 효소활성이 1.8-3.2배 증진된 II-4 돌연변이주를 얻었다. DNA 염기서열의 분석을 통하여 II-4의 PHB depolymease에는 3개의 아미노산 치환(A1a209Va1, Leu258Phe, Asp263Thr)이 이루어졌음을 확인하였다. 여러 가지 돌연변이주의 아미노산 서열의 변화를 분석한 결과, PHB depolymerase의 catalytictriad주위에 기존 아미노산에 비하여 보다 소수성인 아미노산으로의 치환이 소수성 기질인 PHB에 대한분해 활성 중진에 기여하는 것으로 추정되었다.

결핵균 katG 유전자내 463 Codon 돌연변이와 Isoniazid내성 관계 (The Relationship between Isoniazid Resistance and 463 CodonMutation of katG Gne in Mycobacterium Tuberculosis)

  • 박영길;심명섭;조상현;배길한;김상재
    • Tuberculosis and Respiratory Diseases
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    • 제43권1호
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    • pp.8-13
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    • 1996
  • 연구배경: 결핵균 katG유전자내 463 codon의 돌연변이는 INH 내성과 관련이 있을 것으로 보고되고 있어서 INH 감수성 균주를 대상으로 katG 유전자내 463 codon의 돌연변이 발생빈도를 관찰하여 INH 내성과의 관련성을 밝히고자 하였다. 방법: INH 감수성 균주(MIC${\geq}\;0.2{\mu}g/ml$) 28주를 선정하여 DNA를 추출하여 katG 유전자내 463 codon을 포함하는 지역을 PCR로 증폭 합성하였다. PCR산물을 제한효소인 Msp I으로 처리하여 절단 여부를 관찰하였고 그리고 SSCP로 표준균주와 차이를 관찰하였다. 결과: INH 감수성 균주 28주 중에서 7주(25%)만이 제한효소 Msp I에 의해 절단 되었다. 절단되지 않은 21주(75%)는 SSCP에서도 표준균주와 다른 양상을 나타내었다. 제한 효소로 절단되지 않은 균주의 katG 유전자를 염기서열 분석한 결과 463 codon Arg(CGG)이 Leu(CTG)으로 치환 되어있었다. 결론: INH내성에 영향을 줄 것으로 추정 되고있던 katG 유전자 463 codon 돌연변이는 INH 내성과 무관한 것으로 판명되었다.

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김치에서 분리된 젖산균의 β-glucuronidase 활성 탐색 (Exploration of β-Glucuronidase Activity of Lactic Acid Bacteria Isolated from Kimchi)

  • 김은정;신인웅;권세영;박은희;이재형;김명동
    • 한국미생물·생명공학회지
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    • 제47권3호
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    • pp.434-440
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    • 2019
  • 전통발효식품인 김치에서 분리된 젖산균으로부터 ${\beta}$-glucuronidase 효소활성이 높은 균주를 선발하였다. 김치에서 분리된 156점의 젖산균 중 52점의 균주가 glucuronic acid를 탄소원으로 대사하였으며, 대부분의 젖산균은 세포내 ${\beta}$-glucuronidase 활성이 세포외 활성보다 유의적으로 높았다. 순무김치에서 분리된 Leu. mesenteroides KFRI 73007 균주가 $0.77{\pm}0.01U/mg$ protein로서 가장 높은 세포내 ${\beta}$-glucuronidase 효소활성을 나타내었다. 최적 반응조건은 pH 7, $37^{\circ}C$이었으며 $1.14{\pm}0.01U/mg$ protein의 효소활성을 나타냈다. 양이온 금속이온은 ${\beta}$-glucuronidase 효소활성을 약 70% 이상 저해하였으며, 균주 배양에 사용한 탄소원 중 ${\beta}$-glucuronidase 생산을 위한 최적의 탄소원은 glucuronic acid이었다.

Demethylchlorotetracycline이 백서의 관상봉합 발육에 미치는 영향에 관한 실험적 연구 (AN EXPERIMENTAL STUDY OF THE EFFECT OF THE METHYLCHLOROTETRACYCLINE ON GROWTH OF CORONAL SUTURE IN RATS)

  • 이준규
    • 대한치과교정학회지
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    • 제10권1호
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    • pp.7-13
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    • 1980
  • To study some informations on the morphogenesis and developmental process of the coronal suture in rats, the author performed daily oral administrations of demethylchlorotetracycline, a kind of tetracycline group, in the amount of 30mg/kg of body weight to the female rats from the 7th day of pregnancy to the time of delivery. Microscopic evaluation was undertaken on the fetal rats in the experimental group. The subject of this experiment were defined to the fetal rats of each group at 1st, 3rd, 7th and 14th day after birth. All these fetal rats were sacrificed and the heads were removed. All the tissue sections were fixed with $10\%$ formalin, Bouin' and Carnoy' solution and then stained by Hematoxylin-Van Gieson stain, or Feulgen and Rossenbeck, Periodic acid Schiff, and prepared for alcian blue reaction. The results were as follows; 1. The directions of osteogenic fibers were arranged irregulary during first 3 days, but after the 7th day they tended to change radial directions like control group. 2. The density of deep stained cells by Feulgen-Rossenbeck reaction were shown leu in the experimental group than that in the control group in first 3 days, but there was shown no significant difference between both groups after the 7th day. 3. PAS reaction in early stage was generally negative in the experimental group unlike as in the control group, but diffuse reaction was observed in the loose middle zone like as in the control group after 14th day. 4. Alcian blue reaction was negative in cambial zone, and slightly positive in uniting zone compared with control group in early stage. After 14th day, however, there was observed a tendency of moderately positive reaction.

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뽕나무 계통별 오디의 아미노산 함량 분석 (Varietal Analysis and Quantification of Amino Acid in Mulberry Fruits)

  • 김현복;김선림;강석우
    • 한국잠사곤충학회지
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    • 제46권2호
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    • pp.47-53
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    • 2004
  • 오디는 기능성 및 천연색소 자원으로서의 그 가치를 새롭게 인정받고 있으나 음료시장의 새로운 화두로 부각되고 있는 아미노산의 조성 및 함량에 관한 연구는 전무하다. 따라서 본 시험에서는 뽕나무 계통별로 오디를 수확하여 아미노산 분석을 실시하고 계통간 특성을 살펴봄으로써 육종효율을 높이는 동시에 아미노산을 함유하는 천연식품 소재로서의 이용성을 높이고자 하였다. 그 결과를 요약하면 다음과 같다. 1. 총 16종의 구성 아미노산 분석에서 Glu의 분포비율이 $20.1\%$으로 가장 높았으며, 다음으로 Gly ($12.7\%$) > Asp ($12.5\%$) > Thr ($8.2\%$) > Ala ($7.9\%$) > Arg ($7.5\%$) 순이었다. 2. 오디에 함유된 아미노산의 총 평균 함량은 4,640.8 mg/100 g이었으며, '사방소(II)'의 경우 6,919.3 mg/100 g 으로 총 아미노산의 함량이 가장 높았으며, 다음으로 '자산(I). '사방소(I)'이 각각 6,232.6 mg/100 g, 6,037.6 mg/100 g으로 높았다. 반면 '국광'은 3,389.1 mg/100 g으로 가장 낮은 함량을 나타냈다. 3. 각각의 아미노산에 있어 계통에 따른 함량의 차이가 존재하였으며. '사방소(II)', '장소상', '자산(I)', '팔청시평' 및 '환십조생' 오디는 특정 아미노산의 함량이 가장 높은 계통으로 선발되었다. 4. 오디는 다양한 기능성과 더불어 아미노산을 함유하는 천연 식품 소재이므로 금후 건강기능제품의 재료로 활용하여 이용성을 증대시키면 국민의 건강증진은 물론 농가의 소득 향상에도 크게 기여할 수 있을 것이다.

花紛荷(pollen load)의 성분조성에 관한 연구 (A Study on Components of Pollen Load)

  • 김정헌;이규한;김을상;박성배
    • 한국식품영양과학회지
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    • 제21권5호
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    • pp.566-572
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    • 1992
  • 자연식물에서 양봉의 부산물로 생산되고 있는 화분하의 식물영양학적인 평가를 위한 기초자료를 얻고자 1986년 6월부터 9월사이에 경기도 안성지역에서 꿀벌들에 의해 수집된 혼합화분하 및 화분하의 효율적 이용을 위하여 벌꿀과 7:3의 비율로 섞어 만든 화분꿀에 대하여 일반성분, 유리당, 무기질, 지방산, 아미노산조성과 탄수화물 및 단백질의 인공소화율을 실험한 결과는 다음과 같다. 화분하의 단백질은 27.0%, 지방 5.8%, 섬유질 11.1%이었다. 유리당조성은 과당이 26.6%, 포도당13.1%, 서당 0.2%, 맥아당 1.3%, F/G비는 2.0이었다. 무기질조성은 칼륨이 661.2mg/100g으로 가장 많았고 인, 마그네슘, 칼슘, 철의 순이며 구리가 가장 낮았고 특히 철은 16.7mg.100g이었다. 지방산 조성은 $C_{18:2}$가 28.6%, $C_{18:3}$21.7%, $C_{16:0}$21.2%, $C_{18:1}$이 17.4로 대부분이었으며 SFA/MUFA/PUFA비는 0.61:0.37:1.00, PUFA/SFA비는 1.63이었다. 아미노산조성은 프롤린이 가장 많았고 Glu>Leu>Asp>Val>Phe순이었으며 필수아미노산은 39.2%이었다. 단백질의 화학가는 E/T비가 2.03, 단백가는 65.2(Lys), A/E화학가중 난가(egg score)는 61.7(Lys), 아미노산가는 51.7(Lys)이었다. 신선한 화분하의 탄수화물 인공소화율은 1시간후 66.7%, 2시간후 67.0%이었고, 단백질 인공소화율은 각각 67.3%, 75.5%이었다. 신선한 화분꿀의 탄수화물과 단백질의 인공소화율도 신선한 화분하의 인공소화율과 비슷한 수준이었다.

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의이인(薏苡仁)(Coicis Semen)의 의약품개발(醫藥品開發)에 관(關)한 연구(硏究)(I) -아미노산(酸)의 함량(含量)에 대하여- (Studies on the Drug Development of Coicis Semen(I) -Aminoacid Contents in Coicis Semen-)

  • 용재익
    • Journal of Pharmaceutical Investigation
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    • 제7권1_4호
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    • pp.1-12
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    • 1977
  • Free amino acid in ethanol extracts and total amino acid hydrolysates of Coicis semen were analyzed by amino acid autoanalyzer. The sample A (unpolished Coicis Semen) and sample B(polished Coicis Semen) are used in this experiments. The results obtained from this study are as follows: 1) 17 kinds of free amino acid (Asp, Thr, Ser, Glu, Pro, Gly, Ala, Val, Cys, Met, Ileu, Lew, Try, Phe, Lys, His, Arg,) including 7 kinds of essential amino acid (Val, Lew, Ileu, Thr, Lys, Met, Phe,) as human nutrition were identified and quantified but tryptophan. 2) Total free amino acids of sample A is more than about 3 folds that of sample B. 3) The distribution of free amino acids contained in sample A, threonine is the richiest and then comes Ala, Glu, Asp, and Pro, in that order. In sample B, glutamic acid is the richiest and then comes Thr, Asp, Ala, and Gly, in that order. 4) 17 kinds of total amino acid (Asp, Thr, Ser, Glu, Pro, Gly, Ala, Val, Cys, Met, Ileu, Lew, Tyr, Pher, Lys, including 7 kinds of essential amino acid (Val, Leu, Ileu, Thr, Lys, Met, Phe,) in human nutrition except tryptophan were identified and quanified. 5) Total amino acid content of sample A is more than about 1.06 folds that of sample B. 6) Total amino acid content of sample A in acid hydrolysates is more than about 1.06 folds that of sample B in acid hydrolysates. 7) Unknown chromatogram of ethanol extracts and acid hydrolysates of Coicis Semen were identified as Ornitine.

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식용(食用)버섯류(類)의 아미노산(酸)에 관(關)한 연구(硏究) (A Study on the Amino Acid Contents of Edible Mushrooms)

  • 표명윤;노일협
    • Journal of Nutrition and Health
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    • 제8권1호
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    • pp.47-59
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    • 1975
  • Free amino acids in extracts and total amino acids in hydrolysates of eleven species of edible mushrooms were analyzed by amino acid autoanalyzer (Technicon PNC-1 Type). All these 11 species of mushroom can be repesented for convenience sake as follows. S-1; Agaricus campestris Fr. S-2: Agaricus campestris S-3; Pholiota nameko(I. Ito) S. Ito et Imai S-4; Auricularia auricula-judae(Fr.) $Qu{\acute{e}}l$ S-5; Tremella fuciformis Berk. S-6; Tricholoma matsutake(S. Ito et Imai) Sing. S-7; Pleurotus ostreatus Fr. $Qu{\acute{e}}l$ S-8; Lentinus edodes Berk Sing. S-9; Ramaria botrytis (Pers.) Ricken S-10; Coprinus comatus(Fr.) S.F, Gray S-11; Gyrophora esculenta The results obtained from this study are as follows. 1) 17 kinds of amino acid, including 7 kinds of essential amino acid in human nutrition except tryptophan were identified and quantified. 2) Of all free amino acids contained in mushrooms, glutamic acid is the richest, and then comes Ala, Thr, Pro and Lys in that order. There were no found Cys'and His in S-9;His in S-1; Met and Arg in S-11; Cys and Met in S-5;Pro, Cys, Met, Lys and Arg in S-4. Of all total amino acids which are closely related with nutritional valuation, glutamic acid is the richest, and then comes Asp, Ala, Arg, Leu, Thr, Gly in that order. Especially S-1 and S-2 contain high quantity $o{\acute{i}}$ proline in both free and total amino acids. 3) Cotents of ammonia in extracts of mushrooms in decreasing order in S-1, S-10, S-8, S-2, S-7, S-6, and S-2, S-6, S-8, S-9, S-1 in hydrolysates of mushrooms. 4) Gross Contents of free amino acid in extracts is high in decreasing order in S-10, S-1, S-7, S-6, S-8, and total amino acid in hydrolysates is high in S-10, S-2, S-2, S-8, S-1, S-9, S-6. 5) Besides 17 kinds of amino acid, 5 kinds of unknown amino acid are found in extracts and hydrolysates.

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동충하초의 Diketopiperazine 성분 (Diketopiperazines from Cordyceps militaris)

  • 김선범;황방연;이미경
    • 생약학회지
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    • 제44권4호
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    • pp.336-343
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    • 2013
  • In a continuation of investigation on Cordyceps militaris, thirteen compounds were isolated from the $CH_2Cl_2$ and n-BuOH-soluble fraction of C. militaris. They were identified as twelve diketopiperazines such as cyclo($\small{L}$-Gly-$\small{L}$-Pro) (1), cyclo($\small{L}$-Ala-$\small{L}$-Pro) (2), cyclo($\small{L}$-Ser-$\small{L}$-Pro) (3), cyclo($\small{L}$-Val-$\small{L}$-Pro) (4), cyclo($\small{L}$-Thr-$\small{L}$-Pro) (5), cyclo($\small{L}$-Pro-$\small{L}$-Pro) (6), cyclo($\small{L}$-Thr-$\small{L}$-Leu) (7), cyclo($\small{L}$-Tyr-$\small{L}$-Ala) (8), cyclo($\small{L}$-Phe-$\small{L}$-Ser) (9), cyclo($\small{L}$-Phe-$\small{L}$-Pro) (10), cyclo($\small{L}$-Tyr-$\small{L}$-Pro) (11) and brevianamide F (13), and an amino acid, tryptophan (12). Their structures were identified on the basis of chemical evidences and spectroscopic analysis including 1D-NMR ($^1H$, $^{13}C$), 2D-NMR (HSQC, HMBC) and MS spectral data. Among the isolated compounds, compounds 1, 2, 6-11 are first reported from C. militaris.

Structure-Activity Relationships of Peptide Antibiotics with Improved Bacterial Cell Selectivity of Pseudin

  • Lee, Yeongjoon;Jeon, Dasom;Kim, Jin-Kyoung;Kim, Yangmee
    • 한국자기공명학회논문지
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    • 제21권3호
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    • pp.78-84
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    • 2017
  • Pseudin is a naturally occurring 24 amino-acid-residue antimicrobial peptide derived from the skin of paradoxical frog Pseud's paradoxa. It shows potency against the bacteria and antibiotic-resistant bacteria strain, but has high cytotoxicity against mammalian cell. In our previous study, substitution of $Pro^{11}$ for Gly (Ps-P) increased bacterial cell selectivity but decreased the antibacterial activity of pseudin. In this study, we designed pseudin analogue, Ps-4K-P with increased cationicity up to +7 in Ps-P by substituting Glu14, Gln10, Gln24, and Leu18 with Lys. Ps-4K-P showed improved potent antibacterial activity with high bacterial cell selectivity. We determined the tertiary structure of Ps-4K-P in the presence of DPC micelles by NMR spectroscopy and it has a hinge structure at $Pro^{11}$ followed by three turn helices from $Pro^{11}$ to $Val^{23}$ at the C-terminus. Amphipathicity with increased cationicity as well as helix-hinge-helix structural motif provided by introduction of a Pro at position $Gly^{11}$ are the crucial factors which confer antibacterial activity with bacterial cell selectivity to Ps-4K-P.