This study was carried out to get the basic data for the mycelial growth of Lentinus lepideus in liquid culture. The optimal temperature and initial pH of mycelial growth of Lentinus lepideus were $25^{\circ}C$ and pH 5.5, respectively. The optimal medium was YMG medium. Among the carbon sources tested, glucose was effected to the mycelial growth and optimal glucose concentration was 4% (w/v). As nitrogen sources, malt extract and yeast extract appeared to be favorable and optimal malt extract and yeast extract [ratio (w/w) of 1:1] concentration was 1.5% (w/v).
The purpose of this study was to describe the micromorphological changes in Korean red pine (Pinus densiflora S. et Z.) wood decayed by a major brown-rot fungus, Lentinus lepideus, using scanning electron microscope and transmission electron microscope. At the end of the 12-week exposure to the fungus in soil block procedure(ASTM 1971), test blocks sustained 5.02% weight loss. The formation of bore hole by hyphae and penetration of hyphae through bordered pit were not observed. Instead, fungal hyphae appeared to penetrate axially tracheid luminar from the the ray cells via cross field pits. Hyphae were mainly found in lignin rich cell corner regions of tracheids, and also extensive degradation of tracheid wall occurred in this region. Extensive degradation of $S_2$ layer occurred without noticeable alteration of the $S_3$ layer, but warty layer and compound middle lamella remained relatively intact. Localized erosion, the characteristic of white rot, was observed in some cell wall and wall components including lignin were found to be decomposed.
An efficient method to produce water-soluble polysaccharides from Lentinus lepideus is described. The productivity of both endopolysaccharides (PPS) and exopolysaccharides (EPS) was compared under various culture conditions. The effect of treating their own PPS and EPS on immune cytokine production was also studied in relation to culture factors. High yield production of EPS required a moderate culture temperature $(25^{\circ}C)$ as well as long culture period (16-20 days). In contrast, PPS production required a high culture temperature $(30^{\circ}C)$ and short culture period (8 days). Most of the carbon sources did not affect polysaccharides and mycelial production except for sucrose. Immune cytokine levels in the EPS treatment varied among carbon sources or culture periods. PPS did not appear to affect much on the production of cytokines, regardless of the culturing factors, except for the culture period. These results suggest that the optimal culture conditions for L. lepideus vary according to culture purposes, and different culture conditions should be used for different targets including mycelial biomass, EPS, and PPS. Whereas the immunomodulating activitiy of EPS appeared to be affected by culture conditions in L. lepideus, that of PPS did not.
Free amino acids in extracts and total amino acids in hydrolysates of eight species of higher fungi were analyzed by an amino acid autoanalyzer. Twenty amino acids were analyzed in eight species of higher fungi. 1) of all free amino acids contained in higher fungi, alanine is the richest, and then comes glutamic acid, serine, arginine, proline and histidine in that order. Of all total amino acids contained in higher fungi, glutamic acid is the richest, and then comes proline, valine, aspartic acid, alanine, leucine in that order. Especially Russula fragilis and Lepiota procera contain large quantity of glutamic acid. 2) Gross contents of free amino acids in the extracts is high in order of Lepiota procera, Phylloporus rhodoxanthus, Russula fragilis, Tylopilus felleus and total amino acids in hydrolysates is high in Phylloporus rhodoxanthus, Lepiota procera, Russula fragilis, Lentinus lepideus. 3) Total amount of essential amino acids in the extracts was high in Lepiota procera, Phylloporus rhodoxanthus, Tylopilus felleus, Xylaria hypoxylon, Lentinus lepideus, Russula fragilis, Lactarius piperatus and Calocybe gambosa and in the hydrolysates of Phylloparus rhodoxanthus, Russula fragilis, Lepiota procera, Tylopilus felleus, Lentinus lepideus, Lactarius piperatus, Calocybe gambosa and Xylaria hypoxylon in that order, respectively.
The wild edible mushroom, Lentinus lepideus has recently been cultivated for commercial use in Korea. While the mushroom has been widely used for nutritional and medicinal purposes, the possible anti-hyperlipidemic action is unclear. The effects of dietary L. lepideus on plasma and feces biochemical and on the liver histological status were investigated in hypercholesterolemic rats. Six-wk-old female Sprague-Dawley albino rats were divided into three groups of 10 rats each. Biochemical and histological examinations were performed. A diet containing 5% L. lepideus fruiting bodies reduced plasma total cholesterol, triglyceride, low-density lipoprotein, total lipid, phospholipids, and the ratio of low-density to high-density lipoprotein. Body weight was reduced. The diet did not adversely affect plasma biochemical and enzyme profiles. L. lepideus reduced significantly plasma ${\beta}$- and pre-${\beta}$-lipoprotein, while ${\alpha}$-lipoprotein content was increased. A histological study of hepatic cells by conventional hematoxylin-eosin and oil red O staining revealed normal findings for mushroom-fed hypercholesterolemic rats. The present study suggests that a diet supplemented with L. lepideus can provide health benefits by acting on the atherogenic lipid profile in hypercholesterolemic rats.
The carpophores of Lentinus lepideus Fr. which grows wildly in Korea were collected in Gyeong Gi Province to examine the chemical components of the fungus. They were extracted with a mixture of chloroform and methanol. From the extract four spots were detected by TLC. One of these spots was identified as ergosterol by TLC, GLC and chemical tests.
The mushroom Lentinus lepideus was used to produce mycelial as well as soluble polysaccharides in bioreactor cultures. To determine optimal submerged culture conditions, both growth characteristics and water soluble polysaccharides production were compared among four different types of bioreactor and culture conditions. For the production of mycelial biomass, the following bioreactors were proven to be effective in decreasing order: an external-loop type air-lift bioreactor (ETAB; 7g/l), a balloon type air bubble bioreactor (BTBB; 6.2g/l), a stirrer type bioreactor (STB; 6g/l), and a column type air bubble bioreactor (CTBB; 5g/l). Maxiaml production of water soluble exopolysaccharides (EPS; 0.62g/l) and endopolysaccharides (PPS; 7.7%) could also be obtained from BTBB. The mycelial biomass increased with increase in glucose concentration from 15g/l to 75g/l in the media. In contrast, PPS contents in the cells decreased with increase in glucose concentration in the media, showing the highest PPS content (7%) at 15g/l. Among different medium feeding types, fed-batch culture based on concentration control in media (10g/l) produced higher mycelia than fed-batch culture based on volume control of media (5.8g/l) or batch culture (3.4g/l). EPS production was also higher in fed-batch culture based on medium concentration control than that in other feeding types.
Many antitumor and immune modulating components have been isolated from fungal extracts. In this study, the authors isolated the proteoglycans from cultured mycelia of Lentin us lepideus, including especially the acidic polysaccharide fraction, named lepidan. It was obtained by extraction with hot water followed by purification using DEAE cellulose anion exchange. To elucidate antitumor effects against different type of tumor, the proteoglycans were tested on sarcoma 180, C3H MCA clone 16 and P388 leukemia in vivo. Lepidan showed 58.3% of tumor inhibition against solid form of sarcoma 180 and 58.6% against MCA clone 16. But lepidan did not affect life span of mice against P388 leukemia. Also when Lepidan was applicated to MTT assay, it did not show any direct cytotoxicity against various tumor cells in vitro.
In this study, we investigated the immunopotent activities of lepidan, a water soluble proteoglycan from Lentinus lepideus. To examine whether lepidan may affect nonspecific immune responses, we determined the effect on the production of nitric oxide (NO). Lepidan effectively increased the NO production in IFN-${\gamma}$ and LPS triggered RAW 264.7 cells. To further demonstrate the evidence that lepidan activates various immune cells, we determined the alkaline phosphatase activity, plaque-forming cell number and secretion of interleukine-4 (IL-4) and granulocyte/macrophage-colony stimulating factor (GM-CSF) after lepidan treatment in murine splenocytes. The results showed that lepidan increased alkaline phosphatase activity and the number of plaque-forming cells, which indicates that lepidan can lead B lymphocytes to late stage of differentiation. Also, when the splenocytes were cultured with lepidan for 48 hr, the level of IL-4 and GM-CSF in the supernatant dramatically increased. Taken together, these data suggest that lepidan is a biological response modulator that is able to activate immune responses.
Immunomodulating activities of water-soluble exopolysaccharides (LL-EX) obtained from submerged mycelial culture of Lentinus lepideus were studied and their effectiveness was compared with lipopolysaccharide (LPS). The influence of the LL-EX on macrophage cellular lysosomal enzyme activity was to stimulate up to 267%, 392%, and 464% at the level of 10, 50, and $100{\mu}g/ml$, respectively. When the LL-EX was further fractionated into LL-Fr.I and Fr.II by Sepharose CL-6B gel chromatography, the cellular lysosomal enzyme activity of LL-Fr.II (2.1-fold) was higher than Fr.I (1.2-fold). Moreover, both LL-Fr.I and Fr.II stimulated the cytokines IL-1$\beta$, TNF-$\alpha$, and IL-6 in macrophages. In mixed lymphocyte reaction, LL-Fr.I and Fr.II enhanced the splenocyte proliferation up to 1.2-fold and 1.4-fold ($50{\mu}g/ml$), respectively, stimulating only T lymphocytes. The fractions of LL-EX not show any direct toxicity against human gastric adenocarcinoma cell (AGS). The molecular masses of LL-Fr.I and Fr.II were estimated to be about 1,986 kDa and 21 kDa, respectively. The total sugar and protein contents of the two fractions were 84.97% and 69.88%, and 15.03% and 30.12%, respectively. The sugar and amino acid compositions of the LL-Fr.I and Fr.II were also analyzed in detail.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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