Recent studies indicate that reactive oxygen species (ROS) can act as modulators of neuronal activity, and are critically involved in persistent pain primarily through spinal mechanisms. In this study, we investigated the effects of NaOCl, a ROS donor, on neuronal excitability and the intracellular calcium concentration ($[Ca^{2+}]_i$) in spinal substantia gelatinosa (SG) neurons. In current clamp conditions, the application of NaOCl caused a membrane depolarization, which was inhibited by pretreatment with phenyl-N-tert-buthylnitrone (PBN), a ROS scavenger. The NaOCl-induced depolarization was not blocked however by pretreatment with dithiothreitol, a sulfhydryl-reducing agent. Confocal scanning laser microscopy was used to confirm whether NaOCl increases the intracellular ROS level. ROS-induced fluorescence intensity was found to be increased during perfusion of NaOCl after the loading of 2',7'-dichlorofluorescin diacetate ($H_2DCF$-DA). NaOCl-induced depolarization was not blocked by pretreatment with external $Ca^{2+}$ free solution or by the addition of nifedifine. However, when slices were pretreated with the $Ca^{2+}$ ATPase inhibitor thapsigargin, NaOCl failed to induce membrane depolarization. In a calcium imaging technique using the $Ca^{2+}$-sensitive fluorescence dye fura-2, the $[Ca^{2+}]_i$ was found to be increased by NaOCl. These results indicate that NaOCl activates the excitability of SG neurons via the modulation of the intracellular calcium concentration, and suggest that ROS induces nociception through a central sensitization.
Phospholipase $C-{\gamma}1\;(PLC-{\gamma}1)$ is an important signaling molecule for cell proliferation and differentiation. $PLC-{\gamma}1$ contains two pleckstrin homology (PH) domains, which are responsible for protein-protein interaction and protein-lipid interaction. $PLC-{\gamma}1$ also has two Src homology (SH)2 domains and a SH3 domain, which are responsible for protein- protein interaction. To identity proteins that specifically binds to PH domain of $PLC-{\gamma}1$, we prepared and incubated the glutathione S-transferase(GST)-fused PH domains of $PLC-{\gamma}1$ with COS7 cell lysate. We found that 90 kDa protein specifically binds to PH domain of $PLC-{\gamma}1$. By matrix-assisted laser desorption ionization time of flight-mass spectrometry, the 90 kDa protein revealed to be heat shock protein (Hsp) $90{\beta}$. Hsp $90{\beta}$ is a molecular chaperone that stabilizes and facilitates the folding of proteins that are involved in cell signaling, including receptors for steroids hormones and a variety of protein kinases. To know whether Hsp $90{\beta}$ affects on $PLC-{\gamma}1$ activity, we performed $PIP_2$ hydrolyzing activity of $PLC-{\gamma}1$ in the presence of purified Hsp $90{\beta}$ in vitro. Our results show that the Hsp $90{\beta}$ dose-dependently inhibits the enzymatic activity of $PLC-{\gamma}1$ and further suggest that Hsp $90{\beta}$ regulates cell growth and differentiation via regulation of $PLC-{\gamma}1$ activity.
Background: A number of effective prevention measures have been introduced in attempts to substantially reduce both the incidence and mortality due to many kinds of cancer. The search for new anti-cancer compounds in foods or in plant medicines is one realistic and promising approach to prevention. Chinese medicines provide a rich pool of novel and efficacious agents for cancer prevention and treatment. Previously it was demonstratrated that hyperin extracted from the Manchurian rhododendron leaf reduces the proliferation of many cancer cells. The present study was carried out to evaluate its effects on human endometrial cancer cell viability and apoptosis and to investigate its mechanisms of action in RL952 cells. Methods: Cell viability was measured using the MTT assay. Intracellular calcium ions were detected using laser-scanning confocal microscopy. The effects of hyperin on apoptosis related proteins in RL952 cells were examined using Western blot analysis. Results: The growth of RL952 cells was inhibited by treatment with hyperin. OD values of caspase-3 and caspase-9 were increased and expression of bcl-2 was increased and bax was decreased in protein levels in RL952 cells after 24 h of hyperin treatment, Moreover, intracellular calcium accumulation occurred in hyperin-treated cells. Conclusion: These results suggest that hyperin may play an important role in tumor growth suppression by inducing apoptosis in human endometrial cells via a $Ca^{2+}$-related mitochondrion apoptotic pathway in RL952 cells.
The intracluster ion-molecule reactions of $Ti^+(H_2O)_n,\;Ti^+(CH_3OCH_3)_n,\;and\;Ti^+(CH_3OD)_n$ complexes produced by the mixing of the laser-vaporized plasma and the pulsed supersonic beam were studied using a reflectron time-of-flight mass spectrometer. The reactions of $Ti^+$ with water clusters were dominated by the dehydrogenation reaction, which produces $TiO^+(H_2O)_n$ clusters. The mass spectra resulting from the reactions of $Ti^+\;with\;CH_3OCH_3$ clusters exhibit a major sequence of $Ti^+(OCH_3)_m(CH_3OCH_3)_n$ cluster ions, which is attributed to the insertion of $Ti^+$ ion into C-O bond of $CH_3OCH_3$ followed by $CH_3$ elimination. The prevalence of $Ti^+(OCH_3)_m(CH_3OD)_n$ ions in the reaction of $Ti^+\;with\;CH_3OD$ clusters suggests that D elimination via O-D bond insertion is the preferred decomposition pathway. In addition, the results indicate that consecutive insertion reactions by the $Ti^+$ ion occur for up to three precursor molecules. Thus, examination of $Ti^+$ insertion into three different molecules establishes the reactivity order: O-H > C-O > C-H. The experiments additionally show that the chemical reactivity of heterocluster ions is greatly influenced by cluster size and argon stagnation pressure. The reaction energetics and formation mechanisms of the observed heterocluster ions are also discussed.
To investigate whether the present-day active galaxies follow the same black hole mass vs. stellar velocity dispersion (MBH-$\sigma*$) relation as quiescent galaxies, we measured the velocity dispersions of a sample of local Seyfert 1 galaxies, for which black hole masses were measured via reverberation mapping. We measured stellar velocity dispersions from high S/N optical spectra centered on the Ca II triplet region (${\sim}8500^{\circ}A$), obtained at the Keck, Palomar, and Lick Observatories. For two objects, in which the Ca II triplet region was contaminated by nuclear emission, we used high-quality H-band spectra obtained with the OH-Suppressing Infrared Imaging Spectrograph and laser-guide star adaptive optics at the Keck-II Telescope. Combining our new measurements with data from the literature, we assemble a sample of 24 active galaxies with stellar velocity dispersions and reverberation MBH in the range of black hole mass 106< MBH /$M{\odot}$ < 109,toobtainthefirstreverberationmappingconstraintsontheslopeandintrinsicscatteroftheMBH- $\sigma*$ relation of active galaxies. Assuming a constant virial coefficient f for the reverberation MBH, we find a slope ${\beta}=3.55{\pm}0.60$ and the intrinsic scatter ${\sigma}int=0.43{\pm}0.08$ dex in the relation log (MBH/M${\odot}$)=$\alpha+\beta$ log(${\sigma}*$/200 km s-1), which are consistent with those found for quiescent galaxies. We derive an updated value of the virial coefficient f by finding the value which places the reverberation masses in best agreement with the MBH - $\sigma*$ relation of quiescent galaxies; using the quiescent MBH - $\sigma*$ relation determined by Gultekin et al. we find log f=0.72+0.09 (or $0.71{\pm}0.10$) with an intrinsic scatter of $0.44{\pm}0.07$ (or 0.46+0.07) dex. No correlations between f and parameters connected to the physics of accretion (such as the Eddington ratio or line-shape measurements) are found. The uncertainty of the virial coefficient remains one of the main sources of the uncertainty in black hole mass determination using reverberation mapping, and therefore also in single-epoch spectroscopic estimates of black hole masses in active galaxies.
초파리는 유전학, 발달 생물학, 행동 유전학, 노화 연구에 이르기까지 수많은 연구에 이용 되어져 왔다. 최근 초파리 전체 유전자의 염기서열이 보고되었으며, 유전자의 기능 분석과 발현 단백질에 대한 연구가 진행되고 있다. 본 연구에서는 야생형 초파리에서 추출한 단백질을 이차원 전기영동을 통해 400여개 이상의 단백질 스폿으로 분리하였으며, 각 스폿을 적출하여 트립신으로 처리하여 얻어진 펩타이드 단편을 MALDI-TOF-MS를 이용한 펩타이드 지문 검색으로 질량을 측정하였다. 측정된 질량을 초파리 데이터 베이스를 이용하여 분리한 단백질을 동정함으로써 59개의 유전자에서 발현되는 65개의 단백질 스폿을 동정하였다. 이러한 결과는 향후의 발생단계, 외부 자극, 노화 등에 관련되는 특이적 단백질 연구의 기초 자료로 활용될 수 있을 것이다.
We report for the first time highly efficient trans-reflective color filters capable of demonstrating coloration in both transmission and reflection modes by taking advantage of a multilayer stack consisting of MgF2 and TiO2 used respectively as the low and high index materials. In order to enable such trans-reflective performance, securing an optimal stop band assuming an appropriate bandwidth within the visible regime is pivotal, which was realized by tailoring the thicknesses and the numbers of TiO2-MgF2 bi-layers. Three devices were designed through rigorous simulations and developed via e-beam evaporation to demonstrate vivid blue, green, and red colors in the reflection mode, and yellow, magenta, and cyan colors in the transmission mode, featuring an enhanced efficiency exceeding 90% under normal incidence. The color performance of the filters was examined by referring to the chromaticity coordinates of the transmission and reflection spectra, alongside photographed color images. The dependence of the performance on the angle of incidence was explored with respect to incident polarization, indicating that a transmission surpassing 60% could be stably maintained up to an angle of 75°. Polarization independent transfer characteristics were especially achieved for the normal incidence. The proposed devices may be readily extended to other spectral regimes by adjusting the thicknesses of the films.
Park, Jung-Hyun;Cho, Eun-Wie;Lee, Dong-Gun;Park, Jung-Min;Lee, Yun-Jung;Choi, Eun-A;Kim, Kill-Lyong
Journal of Microbiology and Biotechnology
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제10권6호
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pp.844-850
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2000
The specific binding and internalization of viral particles is an essential step for the successful infection of viral pathogens. In the case of the hepatitis B virus (HBV), virions bind to the host cell via the preS domain of the viral surface antigen and are subsequently internalized by endocytosis. HBV-preS specific receptors are primarily expressed on hepatocytes, however, viral DNA and proteins have also been detected in extrahepatic sites, suggsting that celluar recepators for HBV may also exist on extrahepatic cells. Recently, an EBV-transformed B-cell line was identified onto which the preS region binds in a receptor-ligand specific manner. In this study, this specific interaction was further characterized, and the binding region within the preS protein was locaized. Also the internalization after host cell attachment was visualized and analyzed by fluorescence-labeled HBV-preS1 proteins using confocal microscopy. Energy depletion by sodium azide treatment effectively inhibited the internalization of the membrane-bound preS1 ligands, thereby indicating an energy-dependent receptor-mediated endocytotic pathway. Accordingly, the interaction of HBV-pres! with this specific B-cell line may serve as an effective model for an infection pathway in extrahepatic cells.
자체-센서와 미세 작동기 응용을 위한 CNT와 ITO로 코팅된 나노복합재료의 계면접착 내구성과 전기적 특성을 평가하였다. 나노복합재료의 접착 및 계면 내구성은 반복하중 피로시험에 따른 전기저항도를 측정하여 평가하였다. CNT와 ITO의 고유 전기적 특성으로 인하여 CNT가 코팅된 PVDF 나노복합재료는 ITO가 코팅된 경우보다 다소 낮은 전기저항도를 나타내었으나, 모두 양호한 자체-감지능을 보여주었다. CNT/PVDF와 ITO/PVDF 나노복합재료 모두 계면 내구성은 양호함을 확인하였다. 정적 접촉각 시험을 통해 CNT와 ITO 그리고 PVDF간의 표면에너지, 접착일, 그리고 퍼짐계수를 평가하여 계면 내구성과 의 상호 관련성을 확인하였다. 수용액에서 CNT와 ITO로 코팅된 PVDF 시편의 최적의 작동성은 주파수와 전압을 달리하여 레이져 변위센서를 사용한 연신율 변화로 측정하였다. 작동된 두 나노복합재료들의 연신율은 주파수가 증가함에 따라 감소하며, 반면에 전압의 증가에 따라 상승하였다. 각 나노복합재료의 나노구조 및 고유의 전기적 특성으로 인하여, CNT/PVDF가 ITO/PVDF 보다 자체-감지 및 작동기로서 더 적합하다는 것을 알 수 있었다.
A laser ablation-molecular beam/reflectron time-of-flight mass spectrometric technique was used to investigate the ion-molecule reactions that proceed within $Ti^+(CH_3COCH_3)_n$ heterocluster ions. The reactions of $Ti^+$ with $CH_3COCH_3$ clusters were found to be dominated exclusively by an oxidation reaction, which produced $TiO^+(CH_3COCH_3)_n$ clusters. These ions were attributed to the insertion of a $Ti^+$ ion into the C=O bond of the acetone molecule within the heteroclusters, followed by $C_3H_6$ elimination. The mass spectra also indicated the formation of minor sequences of heterocluster ions with the formulas $Ti^+(C_3H_4O)(CH_3COCH_3)_n$ and $TiO^+(OH)(CH_3COCH_3)_n$, which could be attributed to C-H bond insertion followed by $H_2$ elimination and to the sequential OH abstraction by the $TiO^+$ ion, respectively. Density functional theory calculations were carried out to model the structures and binding energies of both the association complexes and the relevant reaction products. The reaction pathways and energetics of the $TiO^+\;+\;CH_2CHCH_3$ product channel are presented.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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