The genus Streptomyces is intensively studied due to its excellent ability to produce secondary metabolites with diverse bioactivities. In particular, adequate precursors of secondary metabolites as well as sophisticated post modification systems make some high-yield industrial strains of Streptomyces the promising chassis for the heterologous production of natural products. However, lack of efficient genetic tools for the manipulation of industrial strains, especially the episomal vector independent tools suitable for large DNA fragment deletion, makes it difficult to remold the metabolic pathways and streamline the genomes in these strains. In this respect, we developed an efficient deletion system independent of the episomal vector for large DNA fragment deletion. Based on this system, four large segments of DNA, ranging in length from 10 kb to 200 kb, were knocked out successfully from three industrial Streptomyces strains without any marker left. Notably, compared to the classical deletion system used in Streptomyces, this deletion system takes about 25% less time in our cases. This work provides a very effective tool for further genetic engineering of the industrial Streptomyces.
Microorganisms isolated from soil (150 strains), fungi (39 strains), yeasts (9 strains) and Streptomyces species (39 strains) were assayed for L-phenylalanine ammonia-lyase(PAL) activity. 17 strains of fungi and 46 strains of soil isolates were proved to produce PAL, Aspergillus panamensis, Penicillium varioti and 11 soil isolates showed comparatively large PAL activity. When PAL activity was assayed with cell-free extracts of these 13 strains and 7 strains of Rhodotorula and Rhodosporidium geni, Rhodosporidium toruloides (IFO 0559) showed the highest PAL activity with 0.333 units per g of the wet cell weight.
A finite element algorithm for consideration of contact constraints is presented. It is characterized by introducing the geometric constraints, resulting from contact conditions, directly into the algebraic system of equations for the incremental displacements of an incremental iterative solution procedure. The usefulness of the proposed algorithm for efficient solutions of contact problems involving large displacements and large strains is demonstrated in the numerical investigation.
Alexandrov, Sergei E.;Kien, Nguyen D.;Manh, Dinh V.;Grechnikov, Fedor V.
Structural Engineering and Mechanics
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제58권4호
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pp.641-659
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2016
This paper deals with the pure bending of incompressible elastic perfectly plastic two-layer sheets under plane strain conditions at large strains. Each layer is classified by its yield stress, shear modulus of elasticity and its initial percentage thickness in relation to the whole sheet. The solution found is semi-analytic. In particular, a numerical technique is only necessary to solve transcendental equations. The general solution is cumbersome because different analytic expressions for the radial and circumferential stresses should be adopted in different regions of the whole sheet. In particular, there are several alternative ways a plastic region (or plastic regions) can propagate. However, for any given set of material and process parameters the solution to the problem consists of a sequence of rather simple analytic expressions connected by transcendental equations. The general solution is illustrated by a simple example.
Trichoderma spp. cause large crop losses of the cultivated shiitake mushroom, Lentinula edodes. We bred several shiitake strains that are resistant to Trichoderma spp. using di-mon mating to establish a useful method for controlling the greenmold disease. We examined the competitive ability of L. edodes against Trichoderma spp. using a dual culture system to select resistant strains. By screening Trichoderma-resistant strains, we found that among 11 parental strains, 4 strains, including KFRI 36, were confirmed resistant strains. They showed especially strong resistance to T. harzianum, which formed deadlock after mycelial contact and then invaded into the territory of T. harzianum. KFRI 171 also showed resistance to T. atroviride strains. Among 13 strains, which were made by hybridization of shiitake strains, 5 were confirmed to be resistant to Trichoderma, including KFRI 58-1. Their resistance was not correlated to the resistant activity of their parents’ strains. Two strains lose resistance and two strains acquire resistance compared to their parents’ strains. In SEM observation, the mycelium of L. edodes at the interaction zone of Lentinula-Trichoderma was rugged and swollen by T. harzianum.
174 isolates of soil microorganisms were isolated from E-golf club from Apr.1997 through Oct. 1997. And 27 strains of them were selected through the inhihition test of mycelial growth. In the same period, soil-borne diesease pathogens, "Rhizoctonia", causing Large patch, Brown patch, Spring dead spot, and Yellow patch were isolated from the diseased areas in E-golf and S-golf club. The antagonistic activity of the strains against the pathogens was tested to select the excel-lent antagonists. In contact with the fungicides, the survivability of the antagonists was tested to assess the compatibility of the antagonists with the pesticides. The results were as follows: 1.Suppression of Rhizoctonia by Antagonists. Antagonistic activity of 27 strains against the pathogens was: tested in vitro. In the result, 3 isolates(B-7, B-15, B-41) of bacteria and 2 isolates(F-5, F-47) of fungi were superior to the rest. 2.Compatibility of the antagonists: with the fungicides: With 13 kinds of pesticides widely using Golf Club, Compatibility of 5 antagonists: were finally tested to select the strains: that mostly survived in contact with pesticides. In the results:, two of five strains: were selected : one strain was bacteria B-15, the other strain was fungi F-47. 24h after the mixing with pesticides:, these two strains were shown to survive at 90% level and these were identified as Bacillus and Trichoderma, respectively. And the most compatible pesticides: with the antagonists were shown to Polytoxin-D thirarn(s:urvivability 99.4%) and Validamycin-A (survivability 98.6%). Keywords:Antagonist, Large Patch, Trichoderma, Compatibility, Fungicide.Fungicide.
To develop the effective microbial screening method, pyrolysis mass spectrometry (PyMS) fingerprinting was evaluated as a tool that discriminate various yeast strains. The target yeast strains were isolated from industrial wastewater. Seventeen environmental isolated yeast strains were examined by pyrolysis mass spectrometry and sequencing analysis of the large subunit rRNA gene D1/D2 region. The PyMS results were compared with those of sequencing analysis. Taxonomic correlations were observed between the PyMS data and the sequencing results. It was concluded that PyMS provides a rapid, reliable and cost-reducing method for discrimination of the yeast strains.
갈색퍼짐병은 한국잔디(Korean lawngrass)에 발병하는 병으로 골프장이나 재배지에서 심각하게 발생하는 것으로 알려져 있다. 갈색퍼짐병 방제를 위하여 주로 화학적 방제에 의존하고 있으며 이는 토양, 수질, 생물다양성에 문제를 일으킬 수 있다. 이에 따라 본 연구는 갈색퍼짐병 방제를 위하여 선발된 균주를 이용하여 균주의 근권정착 능력, 갈색퍼짐병 병원균 억제효과와 실제 골프장에 적용하여 병원균 밀도변화를 조사하였다. 실험실 내부에서 근권 정착력 평가를 통하여 선발된 S2, 5, 8과 12 균주의 근권정착 능력을 조사한 결과 4주차까지 $6log\;cfu\;g^{-1}$ 이상으로 생물적 방제 인자의 필수조건이라 할 수 있는 근권정착 능력이 우수한 것으로 나타났다. S2, 5, 8과 12 균주를 처리하여 병원균 밀도를 조사한 결과 S8 균주의 경우 1주차에 평균 0.7에서 4주차에는 1.2로 병원균 밀도 억제효과가 가장 좋은 것으로 나타났으며 갈색퍼짐병 방제효과 또한 S8 균주가 가장 우수한 것으로 나타났다. 갈색퍼짐병 방제효과가 가장 뛰어난 S8 균주를 이용하여 실제 골프장에서 갈색퍼짐병 병원균의 밀도 억제효과를 조사한 결과 S8 균주 처리구는 무처리구에 비하여 병원균의 밀도가 이쑤시개당 1.6 이상 낮게 검출되었으며 S8 균주 처리에 의하여 병원균 밀도 감소한 것으로 판단할 수 있다.
Cellular fatty acid composition of eight strains, indluding six strains of Comamonas terrigena, and two type strains of Pseudomonas acidovorans, and P. testosteroni was determined by gas-liquid chromatography. Almost the same composition was found in all the strains tested, and hexadecanoic acid, hexadecenoic acid, and octadecenoic acid were accounted more than 70% of total fatty acid. However, P. testosteroni differed from C. terrigena and P. acidovorans by the presence of comparatively large amonuts of 2-hydroxy-hexadecanoic acid, and C. terrigena contained three to eight times as much tetradecanoic acid in P. acidovorans and P. testosteroni. According to the similarity values calculated on the basis of fatty acid composition, C. terrigena strains were divided into three groups differentiated in the requirement of growth factors, and C. terrigena, P. acidovorans, and P. testosteroni strains occupied separate position each other in the dendrogram.
In the course of our survey of microbial diversity, a total of seven basidiomycetous yeast strains were isolated from flowers sampled across the four provinces of the Republic of Korea, of which two strains were identified as an unrecorded species. Comparative analysis was conducted for identification of strains using the D1/D2 region of the large subunit(LSU) rRNA gene sequences, observation of cell morphologies, and carbon assimilation tests. Seven strains were classified within the phylum Basidiomycota. Two unrecorded strains, JRP1-10 (KACC 410703) and KC-1 (KACC 410704), were identified as Vishniacozyma pseudocarnescens, belonging to the family Bulleribasidiaceae, order Tremellales, class Tremellomycetes. Two strains had ellipsoidal-shaped and monopolar budding cells and smooth and cream-colored colonies after cultivation at 25℃ for 3 days. Here, we present the morphological and biochemical characteristics of the unrecorded yeast species, Vishniacozyma pseudocarnescens, in the Republic of Korea.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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