• 제목/요약/키워드: Lactobacillus identification

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Salmonella sp. 의 신속한 동정을 위한 증진배양의 개선에 관한 연구

  • 김기태;김태우;육순학;이영호;백운화
    • 한국미생물·생명공학회지
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    • 제24권6호
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    • pp.647-651
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    • 1996
  • The development of an enrichment method for the rapid and effective identification of Salmonella spp. in sewage or food was studied. As a growth factor for Salmonella, 10 mM cyclic adenosine monophosphate (cAMP) in trypticase soy broth with 0.6% yeast extract (TSBYE) increased cell number five-folds and 0.6% yeast extract in selenite broth increased cell number ten-folds of control. Bile salts in selenite broth was tested for the selection of S. enteritidis in a mixture with Staphylococcus aureus, Pseudomonas aeruginosa, Lactobacillus plantarum and Escherichia coli. The latter four strains were effectively inhibited at 0.1% bile salt. A two-step culture method was used to enrich Salmonella spp.; a primary-enrichment and secondary- enrichment culture. At a primary-enrichment step, selenite broth with 0.6% yeast extract and 10 mM cAMP was used, and at a secondary-enrichment step, 0.1% bile salt was additionally used. Culture times of a primary- enrichment and a secondary-enrichment step were 8 hr and 6 hr, respectively. In this procedure, cell number increased from 10$^{0.3}$ to 10$^{8.5}$ with inhibition of other strains within 14 hr. In the case of an initial cell concentrarion as low as 10$^{-2}$ cfu/ml, a cell number increased to 10$^{7}$ cfu/ml by using a 10 hr primary-enrichment and 6 hr secondary-enrichment procedure.

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Isolation and Identification of Lactic Acid Bacteria from Sourdough with High Exopolysaccharide Production Ability

  • Jung, Seung-Won;Kim, Wang-June;Lee, Kwang-Geun;Kim, Cheol-Woo;Noh, Wan-Seob
    • Food Science and Biotechnology
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    • 제18권2호
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    • pp.384-389
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    • 2009
  • To isolate lactic acid bacteria having high exopolysaccharides (EPS) production ability, 50 strains were initially isolated from the sourdough. Twenty-one strains formed highly mucoid colonies on the sucrose agar medium, which are indicative of active EPS synthesis. DU-07, DU-10, DU-12, DU-19, and DU-21 produced $11.51{\pm}0.167$, $13.09{\pm}0.193$, $12.72{\pm}0.108$, $11.61{\pm}0.284$, and $13.32{\pm}0.094\;g/L$ EPS, respectively, in MRS medium. The isolated strains, DU-10, DU-12, and DU-21, were identified as Enterococcus flavescens, Enterococcus faecium, and Lactobacillus amylovorus, respectively, by using API 50CHL kit and determining partial sequences of their 16S rDNA. Especially, L. amylovorus DU-21 showed the highest production of EPS, as well as the highest inhibitory activities against pathogenic (p<0.05). Interestingly, the L. amylovorus DU-21 seem to be endemic to sourdough fermentations, as they have not been isolated from other environments.

산초로부터 항균성 화합물의 분리 및 동정 (Isolation and Identification of Antimicrobial Compound from Sancho (Zanthoxylum Schinifolium))

  • 김순임;한영실
    • 한국식품조리과학회지
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    • 제13권1호
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    • pp.56-63
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    • 1997
  • 천연물에 존재하는 항균성 물질을 이용하여 천연식품보존제를 개발하고자 한약재 및 민간요법으로 사용되어온 우리나라 전통 향신료인 산초의 항균성을 검색한 결과 클로로포름 분획 에서 B. subtilis, E. coli, L.plantarum 및 S. aureus 등 4종의 균주에 대해 모두 l000 $\mu\textrm{g}$/$m\ell$에서 가장 큰 저해능을 보였으며, 에틸아세테이트 분획 또한 B. sutilis와 E. coli에 대해서 각각 1000 $\mu\textrm{g}$/$m\ell$과 500 $\mu\textrm{g}$/$m\ell$에서 성장이 억제되었다. 가장 큰 활성을 보인 클로로포름층을 다시 분획하여 4그룹으로 나누어 항균성을 검색한 결과 3번 분획에서 4균주에 대해 750 $\mu\textrm{g}$/$m\ell$에서 성장저해 효과를 보였다. chloroform 2차 분획에서 활성이 높게 나타난 subfraction No. 2는 IR, NMR, 그리고 Gchfs를 이용하여 분석한 결과 hexadecanoic acid로 동정되었다.

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Inhibitory Effect of Mugwort(Artemisia asiatica Nakai) on the Growth of Food Spoilage Microorganisms and Identification of Antimicrobial Compounds

  • Kim, Soon--Im;Park, Hye-Jin;Han, Young-Sil
    • Preventive Nutrition and Food Science
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    • 제1권1호
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    • pp.59-63
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    • 1996
  • The antimicrobial activity of mugwort(artemisia asiatica Nakai) was investigated. The methanol extract or dried mugwort was fractionated to hexane, chloroform, ethylacetate, butanol, and aqueous fractions. The hexane fraction among these fractions showed the hifhest inhibitory effect on the growth of microorganisms such as Bacillus subtilis, Escherichia coli, Staphylococcus aureus and Lactobacillus plantarum. Bacillus subtilis, Escherchia coli, and Staphylococcus aureus were completely inhibited at a concentration of 250, 500 , and 750$\mu\textrm{g}$/ml respectively. The hexane fraction was further fractionated into 16 subfractions by silica gel column and thin layer chromatography(TLC). The subfraction No. 8, 9, and 10 on TLC exhibited high antimicrnial activity. At 3rd fractionation, subfraction No. 2 inhibited the growth of microorganisms at 500$\mu\textrm{g}$/ml. Heptadecane, dodecamethyi cyclohexasiloxane, (E,E)-2,4-decadienal, dodecamethul pentasiloxane, coumarin, 5,6,6,6a-tetrahydro-4,4,7a-trimethyl-2(4H)-benzofuranone, neophytadiene, tridecanoic acid, methyl ester, 2-methyl-4,5-nonadiene, (Z,Z)-9-12-octadecadienoyl chloride, and bis(2-ethylhexyl) were identified from this antimicrobial fraction by GC-MS.

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젖산 생성능이 우수한 김치 유래 젖산균의 분리 및 두유 발효 특성 (Isolation and Identification of Lactic acid Producing Bacteria from Kimchi and Their Fermentation Properties of Soymilk)

  • 이란숙;정경희;최웅규;조장원;김경임;김영찬
    • 한국식품영양과학회지
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    • 제42권11호
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    • pp.1872-1877
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    • 2013
  • 본 연구는 경기도 일대의 배추김치로부터 젖산 생성능이 우수한 젖산균주 분리 및 두유 발효 특성에 대해 조사하였다. 먼저 0.01% bromocresol green이 첨가된 MRS 한천 배지에서 clear zone의 size 측정을 통하여 우수한 젖산 생성능을 갖는 균주를 선발 후 탄수화물 이용성 조사 및 16S rRNA 염기서열 분석으로 L. plantarum Gk04, Ped. pentosaceus Gk07, L. brevis Gk35 및 L. curvatus Gk36이 동정되었으며 특히 99%의 상동성을 갖는 L. curvatus Gk36을 두유발효를 위한 최종균주로 사용하였다. L. curvatus Gk36과 시판 균주 L. actobacillus에 의한 두유 발효 결과 pH는 L. actobacillus에서 유의적으로 더 낮은 것으로 나타났으나 생균수 및 산도 측정 결과 두 균주간에 유의적 차이가 없는 것으로 나타나 L. curvatus Gk36 균주는 두유발효 등 발효제품 제조를 위한 젖산균 균주로 이용이 가능할 것으로 판단되었다.

시판 전통누룩의 젖산균 분리동정과 제조단양주의 품질특성 (Characteristics of Takju (a Cloudy Korean Rice Wine) Prepared with Nuruk (a Traditional Korean Rice Wine Fermentation Starter), and Identification of Lactic Acid Bacteria in Nuruk)

  • 박지희;정장호
    • 한국식품과학회지
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    • 제46권2호
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    • pp.153-164
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    • 2014
  • 본 연구는 일반 개량누룩 1종류(MN)와 시판되고 전통제조방식으로 제조된 4종류의 전통누룩(SH, SS, JJ, and SJ)을 구입하여 단양주를 제조하고 이들 단양주의 발효특성을 비교 분석하고자 하였다. 각 누룩으로 제조한 탁주의 pH는 담금 직후부터 24시간 까지 급격히 감소하는 경향을 보였고, 적정산도는 급격히 증가하였다. Maltose 함량은 담금 직후에는 0.49-2.68% (w/v)였고, glucose의 함량은 1.03-2.07% (w/v)으로 나타났다. T-SH와 T-SS의 ethanol 함량이 7일까지 높은 경향을 나타내었다. 전체적인 ethanol 의 함량은 12시간부터 ethanol의 함량이 증가하기 시작했으며, 발효 7일부터 21일까지 13.08-14.96% (w/v)로 유지되었다. 발효과정 중 유리아미노산 함량 분석 결과 glutamic acid, threonine, serine과 glycine 함량을 각각 T-JJ은 104.157, 42.855, 69.715, and 53.035 mg/100 g으로 가장 높았다. 탁주 유기산으로 lactic acid, citric acid, succinic acid, acetic acid가 주요 유기산으로 나타났으며 유기산총량은 T-SS, T-JJ 가 2286.21 mg/100 g, 1983.5 mg/100 g 순으로 가장 높은 값을 나타냈다. 총균수, 젖산균수, 효모 수 모두 시간이 지날수록 급격히 증가하다가 발효 1일에 감소하다 완만한 증가 후 발효가 끝나는 21일까지 점차 감소하는 비슷한 경향을 나타내었다. 관능검사결과 과일향은 T-SH, 단맛은 TSS, 신맛은 T-SS가 가장 높았으며 알코올향, 알코올맛, 쓴맛은 시료간 유의적으로 차이가 나타나지 않았다. 따라서 대체적으로 전통누룩으로 담근 탁주의 아미노산 함량과 유기산 함량이 개량누룩으로 담근 탁주의 아미노산 함량보다 높은 것으로 보아 전통누룩으로 담근 탁주의 다양성에 대한 잠재력을 확인할 수 있었다. 또한 각 누룩들의 젖산균을 분리동정하였는데 분리된 균들은 대체적으로 Leuconostoc, Weissella, Pediococcus과 Lactobacillus속에 속하였다.

이중배양법에 따른 Lactococcus lactis의 아토피 유발인자 억제 효과 증대 (Double-culture Method Enhances the in Vitro Inhibition of Atopy-inducing Factors by Lactococcus lactis)

  • 조유란;강상모;김현표
    • 생명과학회지
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    • 제25권7호
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    • pp.810-818
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    • 2015
  • 유산균이 활성화된 비만세포에서 발현하는 IL-4와 IL-13을 조절할 수 있는지를 분석하였고, GATA-1, GATA-2, NF-AT1, NF-AT2, NF-κB p65 전사인자의 활성을 억제하는지를 실험적으로 규명하였다. 이전 연구에서 T cell에서 CD4+/CD25+/foxp3+ 증가를 실험하여 항아토피 기능성이 있는 유산균을 탐색하였고, Staphylococcus aureus에 대한 항균력을 증가시키는 유산균의 이중배양법을 확인하였다. 여기서는 RBL-2H3 비만세포를 이용하여 이 배양법으로 배양한 유산균이 아토피 피부염의 원인이 되는 allergy 염증반응에서 얼마나 억제능을 갖는지 알아보았다. 그 결과 Lc. lactis culture with medium containing Lb. plantarum supernatants > Lc. lactis > Lc. lactis culture broth with medium containing Lb. plantarum culture broth > Lb. plantarum의 순으로 나타났다. 이 cell 수준(level of mast cells)에서의 순서는 이전 연구의 level of microorganisms (anti-S. aureus)에서의 아토피 유발인자 억제능 순서와 같다. 따라서 세포수준에서도 Lb. plantarum 배양상층액을 첨가한 배지에 Lc. lactis 배양한 경우가 활성화된 비만세포의 allergy 반응으로의 분화 및 활성을 가장 잘 억제하고 관련 유전자 발현을 선택적으로 조절하는 anti-allergy 효과를 나타낸다고 사료된다.

In vitro Characterization of Bacteriocin Produced by Lactic Acid Bacteria Isolated from Nem Chua, a Traditional Vietnamese Fermented Pork

  • Pilasombut, Komkhae;Rumjuankiat, Kittaporn;Ngamyeesoon, Nualphan;Duy, Le Nguyen Doan
    • 한국축산식품학회지
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    • 제35권4호
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    • pp.473-478
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    • 2015
  • The aim of this study was to screen and In vitro characterize the properties of bacteriocin produced by lactic acid bacteria isolated from Vietnamese fermented pork (Nem chua). One hundred and fifty LAB were isolated from ten samples of Nem chua and screened for bacteriocin-producing lactic acid bacteria. Antimicrobial activity of bacteriocin was carried out by spot on lawn method against both gram positive and gram negative bacteria. One isolate, assigned as KL-1, produced bacteriocin and showed inhibitory activity against Lactobacillus sakei, Leuconostoc mesenteroides and Enterococcus faecalis. To characterize the bacteriocin-producing strain, optimum temperature, incubation period for maximum bacteriocin production and identification of bacteriocin-producing strain were determined. It was found that the optimum cultivation temperature of the strain to produce the maximum bacteriocin activity (12,800 AU/mL) was obtained at 30℃. Meanwhile, bacteriocin production at 6,400 AU/mL was found when culturing the strain at 37℃ and 42℃. The isolate KL-1 was identified as L. plantarum. Antimicrobial activity of cell-free supernatant was completely inhibited by proteolytic enzyme of trypsin, alpha-chymotrypsin and proteinase K. Bacteriocin activity was stable at high temperature up to 100℃ for 10 min and at 4℃ storage for 2 d. However, the longer heating at 100℃ and 4℃ storage, its activity was reduced.

Effect of Low Salt Concentrations on Microbial Changes During Kimchi Fermentation Monitored by PCR-DGGE and Their Sensory Acceptance

  • Ahmadsah, Lenny S. F.;Min, Sung-Gi;Han, Seon-Kyeong;Hong, Yeun;Kim, Hae-Yeong
    • Journal of Microbiology and Biotechnology
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    • 제25권12호
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    • pp.2049-2057
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    • 2015
  • Various salt concentrations (1.0%, 1.3%, 1.6%, 1.9%, and 2.1% labeled as sample A, B, C, D, and E, respectively) were investigated for microbial diversity, identification of Lactic Acid Bacteria (LAB) in salted kimchi cabbage, prepared under laboratory conditions. These samples were stored at 4°C for 5 weeks in proper aluminum-metalized pouch packaging with calcium hydroxide gas absorber. A culture-independent method known as polymerase chain reaction - denaturing gradient gel electrophoresis was carried out to identify LAB distributions among various salt concentration samples that had identified 2 Weissella (W. confusa and W. soli), 1 Lactobacillus (Lb. sakei), and 3 Leuconostoc (Lc. mesenteroides, Lc. lactis, and Lc. gelidum) in the overall kimchi samples. The pH, titratable acidity, viable cell counts, and coliform counts were not affected by salt variations. In order to assess sensory acceptance, the conducted sensory evaluation using a 9-point hedonic scale had revealed that samples with 1.3% salt concentration (lower than the manufacturer's regular salt concentration) was more preferred, indicating that the use of 1.3% salt concentration was acceptable in normal kimchi fermentation for its quality and safety. Despite similarities in pH, titratable acidity, viable cell counts, coliform counts, and LAB distributions among the various salt concentrations of kimchi samples, the sample with 1.3% salt concentration was shown to be the most preferred, indicating that this salt concentration was suitable in kimchi production in order to reduce salt intake through kimchi consumptions.

저염 발효오이로부터 16S rDNA-PCR과 RFLP분석을 통한 부패균의 신속한 확인 (16S rDNA-PCR and RFLP Analysis for rapid identification of Spoilage Bacteria from low Salt Cucumber Brine)

  • 김재호;장혜영
    • KSBB Journal
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    • 제19권1호
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    • pp.72-77
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    • 2004
  • 건강에 대한 관심의 증대로 인한 저염식품의 개발 필요성에 맞추어 오이발효에 염의 농도를 낮추게 되면 정상적 일차발효 후에 이차발효가 진행됨으로써 결국 부패하게 된다. 장기간에 걸쳐 다양한 균의 복합적 작용으로 진행되는 저염 발효오이의 부패 과정을 이해하기 위하여 이에 관련된 균을 분리 동정하였다. 부패발효액을 무기배양하여 균을 분리하고 이들의 16s rRNA 유전자 부분을 universal primer를 이용한 PCR로서 증폭하여 서열분석 하였다. 분석된 800 염기 길이의 서열 전체를 그대로 이용하여 NCBI의 BLAST로서 유사종을 찾고 RDP의 Sequence Aligner와 Sequence Match에서 재확인하여 분리된 균을 3속 8종으로 동정하였다. Database 내의 표준균 서열을 기반으로 한 제한효소 지도와 동정된 균의 PCR 생성묵의 제한효소 처리결과(RFLP)를 비교하여 동정 결과를 실험으로 검정하였다. 동정과정에서 sequencing 결과 전체를 이용하는 점과 RDP를 통한 확인과 RFLP를 이용한 검정은 동정 결과에 대한 신뢰도를 한층 증가시켰다. 또 분리된 8종은 개별적 특징의 조사나 적절한 조합을 이룰 때의 상호 의존도 등을 조사할 수 있게 함으로써 여러 균에 의한 복합적 과정인 부패를 순차적 혹은 요인별로 나누어 살펴보는 연구를 가능하게 한다.