Endotoxemia induces production of inflammatory mediators and acute phase proteins, leading to multiorgan injury and systemic inflammation. Hypothalamic-pituitary-adrenal (HPA) axis activation and glucocorticoids (GCs) release modify endotoxemia-induced inflammatory responses. In the present study, we investigated whether pre-exposure of GCs influences endotoxin-induced production of inflammatory mediators in hepatocytes. Hepa1c1c-7 cells were pretreated with low concentrations of corticosterone for 24 h and then cultured without corticosterone in the presence or absence of LPS. Our results demonstrated that LPS alone significantly enhanced production of IL-6 and CRP but reduced vascular endothelial growth factor (VEGF) compared to controls. Combination of corticosterone pretreatment and LPS significantly upregulated production of IL-6, IL-$1{\beta}$, and VEGF but downregulated CRP compared to those in LPS alone. These findings suggest that in low concentration of corticosterone-preexposed hepatocytes, endotoxemia may induce upregulation of IL-6, IL-$1{\beta}$, VEGF and but downregulation of CRP.
Objectives : In this study, the effect of Dipsaci Radix(DR, Dipsacus asperoides C.Y. Cheng et T. M. Ai) water extract on LPS-induced inflammatory response in RAW264.7 cells were investigated. Methods : Dried roots of DR was extracted with water for 3 h(DR-W extract). RAW264.7 cells, a mouse macrophage line, were incubated with different concentrations of DR-W extract for 30 min and then stimulated with LPS at indicated times. Cell toxicity was determined by MTT assay. The concentrations of nitric oxide (NO) and prostaglandin $E_2$ ($PGE_2$) were measured by Griess assay and enzyme immunoassay (EIA), respectively. The expression of inducible nitric oxide synthease (iNOS) and cyclooxyganase (COX)-2 mRNA and protein was determined by RT-PCR and Western blot, respectively. Results : DR-W extract was significantly inhibited LPS-induced productions of NO and PGE2 in RAW264.7 cells. DR-W extract was not suppressed the expressions of iNOS mRNA and protein in LPS-stimulated RAW264.7 cells. Conclusions : This study suggests that DR-W extract can attenuate inflammatory response via inhibition of the NO and PGE2 production in activated macrophages.
The Journal of Korean Medicine Ophthalmology and Otolaryngology and Dermatology
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v.20
no.2
s.33
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pp.77-88
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2007
Objectives : This experimental study was performed to investigate the effects of Yeouigeumhwang-san(YUGHS) on anti-inflammation and anti-Propionibacterium acnes. Methods : The cytotoxicity of YUGHS about viability of Raw 264.7 cell was tested by using a colorimetric tetrazolium assay(MTT assay). To investigate the anti-inflammatory effets of YUGHS on LPS-induced macrophage Raw 264.7 cell, we used ELISA kit and Western blots. Inhibitory effects of YUGHS on Propionibactrium acnes were investigated by using paper disk diffusion method. Results : 1. YUGHS has no cytotoxicity under 50 ${\mu}g/ml$ concentration but over 50 ${\mu}g/ml$ has a little cytotoxicity in Raw 264.7 cell. 2. Concentration of 100 ${\mu}g/ml$ YUGHS inhibited the production of NO in the Raw 264.7 cell stimulated with LPS. 3. All concentrations of YUGHS did not inhibit the production of $TNF-{\alpha}$ in the Raw 264.7 cell stimulated with LPS. 4. All concentrations of YUGHS significantly inhibited the production of $PGE_2$ in the Raw 264.7 cell stimulated with LPS. 5. YUGHS did not inhibit the expression of COX-2 but concentration of 50 ${\mu}g/ml$ YUGHS inhibited iNOS expression in the Raw 264.7 cell stimulated with LPS. 6. YUGHS has the effect of blocking $NF-{\kappa}B$ into nucleus in LPS-induced macrophage Raw 264.7 cell 7. YUGHS did not have the inhibitory effect of Propionibactrium acnes. Conclusions : These results indicate that Yeouigeumhwang-san has anti-inflammatory effets. If further study is performed, the use of Yeouigeumhwang-san will be valuable and benificial in the therapy of acnes.
Objectives: This study was designed to examine immuno-modulatory effects of Evodia Rutaecarpine by activating innate immune system and inhibiting inflammation. Methods: First, Cell cytotoxicity was examined with 4T1 breast carcinoma and TG-induced macrophage. To investigate activating innate immune system of Evodiamine Rutacarpine Extract (ERE) on macrophage, we tested tumor necrosis factor-alpha (TNF-α), interleukin-12 (IL-12), and interleukin-6 (IL-6). In addition, TNF-α and nitric oxide (NO) induced by lipopolysaccharide (LPS) were measured after treating with ERE to observe innate immune modulating effect of ERE on RAW 264.7 cell. Also, mitogen-activated protein kinase (MAPK) and nuclear factor κB (NF-κB) were examined by western blot analysis. Results: In cytotoxicity analysis, ERE significantly affected tumor cell growth above specific concentration. Also, ERE significantly affected macrophage growth above specific concetration. As compared with the control group, the production of TNF-α, IL-12 and IL-6 were increased in TG-induced macrophage. As compared with the control group, TNF-α and IL-6 were significantly up-regulated in RAW 264.7 cell. The expression of TNF-α and NO induced by LPS after treating ERE was significantly decreased compared with control group. In addition, We observed ERE inhibited the phosphorylation levels of p-extracellular signal-regulated kinase (p-ERK), p-Jun N-terminal kinase (p-JNK), and p-p38 in western blotting by treating ERE on RAW 264.7 cell. Conclusions: ERE seems to have considerable impact on the anti-cancer effect by activation of innate immune system and inflammation control.
Objectives : Uncontrolled activation of microglia may directly toxic to neurons by releasing various substances such as inflammatory cytokines, nitric oxide(NO), prostaglandin E2 and superoxide. In this study, the effects of the several subfractions isolated from Coptidis Rhizoma extract were investigated on NO production in LPS-stimulated BV2 microglial cells, Methods : Coptidis Rhizoma extract prepared with 80% methanol, and then fractionated with ethylacetate, chloroform, n-butanol and water. BV2 cells were pretreated four subfractions of Coptidis Rhizoma with various concentrations, and then stimulated with LPS. Cytotoxicity of each fraction was measured by MTT assay. NO production was determined in culture surpernatants by Griess reagent. Results : Ethylacetate, chloroform and butanol fractions of Coptidis Rhizoma extract significantly decreased LPS-induced NO production in BV2 cells as a dose-dependent manner without cytotoxicity. Ethylacetate fraction of Coptidis Rhizoma extract was most effective on inhibition of NO production in LPS-stimulated BV2 cells compared with other fractions. Conclusion : This data indicates that Ethylacetate fraction of Coptidis Rhizoma extract shows strong antiinflammatory effects through inhibition of LPS-induced microglial activation.
Although hepatic microcirculatory dysfunction occurs during endotoxemia, the mechanism responsible for this remains unclear. Since Kupffer cells provide signals that regulate hepatic response in inflammation, this study was designed to investigate the role of Kupffer cells in the imbalance in the expression of vasoactive mediators. Endotoxemia was induced by intraperitoneal E. coli endotoxin (LPS, 1 mg/kg body weight). Kupffer cells were inactivated with gadolinium chloride ($GdCl_3$, 7.5 mg/kg body weight, intravenously) 2 days prior to LPS exposure. Liver samples were taken 6 h following LPS exposure for RT-PCR analysis of mRNA for genes of interest: endothelin (ET-1), its receptors $ET_A$ and $ET_B$, inducible nitric oxide synthase (iNOS), heme oxygenase (HO-1), and tumor necrosis factor-$\alpha$ (TNF-$\alpha$). mRNA levels for iNOS and TNF-$\alpha$ were significantly increased 31.8-fold and 26.7-fold in LPS-treated animals, respectively. This increase was markedly attenuated by $GdCl_3$, HO-1 expression significantly increased in LPS-treated animals, with no significant difference between saline and $GdCl_3$ groups. ET-1 was increased by LPS. mRNA levels for $ET_A$ receptor showed no change, whereas $ET_B$ transcripts increased in LPS-treated animals. The increase in $ET_B$ transcripts was potentiated by $GdCl_3$. We conclude that activation of Kupffer cells plays an important role in the imbalanced hepatic vasoregulatory gene expression induced by endotoxin.
Essential oil-excluded Artemisia princeps Pamp var Ssajuarissuk (AP) was fermented with Lactobacillus brevis K-1, which was isolated from cabbage Kimchi, and the anti-inflammatory effects of AP and fermented AP (FAP) on lipopolysaccharide (LPS)-induced inflammatory response in peritoneal macrophages were investigated. AP and FAP inhibited LPS-induced TNF-$\alpha$, IL-$1{\beta}$, COX-2, iNOS and COX-2 expression, as well as NF-${\kappa}B$ activation. AP and FAP also reduced ear thickness, inflammatory cytokine (TNF-$\alpha$, IL-$1{\beta}$ and IL-6) expression and NF-${\kappa}B$ activation with 12-O-tetradecanoylphorbol-13-acetate (TPA) induced dermatitis in mice. Furthermore, AP and FAP also reduced exudate volume, cell number, protein amount, inflammatory cytokines (TNF-$\alpha$, IL-$1{\beta}$ and IL-6) expression and NF-${\kappa}B$ activation in carrageenan-induced air pouch inflammation in mice. The inhibitory effects of FAP were more potent than those of non-fermented AP. Based on these findings, we propose that FAP can improve inflammatory diseases, such as dermatitis, by inhibiting the NF-${\kappa}B$ pathway.
The Journal of Korean Medicine Ophthalmology and Otolaryngology and Dermatology
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v.18
no.1
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pp.154-171
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2005
Herbal mixture water extract of (Rheum coreanum Scutellaria baikalensis, Phellodendron amurese), which exhibit several beneficial effects including acne and skin diseases, was tested for anti-microbial activity and anti-inflammation effects. The herbal mixture extract showed antimicrobial activity against Stapylococcus epidermis and Propionbacterium acne. The growth of Stapylococcus epidermis and Propionibacterium acne was inhibited completely by addition of 1.0% of the extract. Also in the present study we examined the mixture extract on compound 48/80 induced allergy and LPS induced cyclooxygenase-2(COX-2) gene expression in RAW264.7 macrophage. The results indicated the ear swelling and histamine release induced by compound 48/80 were dose-dependently reduced, ranging 18-36% and 10-61%, respectively. Furthermore the extract inhibited the expression of LPS-induced COX-2 proteins and mRNAs without an appreciable cytotoxic effects on RAW264.1 cells. The cytotoxicity of the extract using MTT assay showed the cytotoxicity of 6% and 13% against L929 cell line. Based on these results, it is concluded that the herbal mixture water extract can be applied to this acne and skin diseases therapy.
Kim, Ah-Yeon;Shim, Hyun-Jin;Kim, Su-Yeon;Heo, Sung-Hye;Youn, Hyung-Sun
Biomedical Science Letters
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v.24
no.2
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pp.102-107
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2018
Toll-like receptors (TLRs) play an important role for host defense against invading pathogens. The activation of TLRs signaling leads to the activation of $NF-{\kappa}B$ and the expression of pro-inflammatory gene products such as cytokines and inducible nitric oxide synthase (iNOS). To evaluate the therapeutic potential of cardamonin, which is a naturally occurring chalcone from Alpinia species (zingiberaceous plant species), $NF-{\kappa}B$ activation and iNOS expression induced by MALP-2 (TLR2 and TLR6 agonist) or LPS (TLR4 agonist) were examined. Cardamonin inhibited the activation of $NF-{\kappa}B$ induced by MALP-2 or LPS. Cardamonin also suppressed the iNOS expression induced by MALP-2 or LPS. These results suggest that cardamonin has the specific mechanism for anti-inflammatory responses by regulating of TLRs signaling pathway.
Kim, Su Yeon;Heo, Sunghye;Kim, Seung Han;Kwon, Minji;Park, Sin-Aye;Youn, Hyung-Sun
Biomedical Science Letters
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v.25
no.3
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pp.267-274
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2019
Toll-like receptors (TLRs) are one of the families of pattern recognition receptors (PRR) to recognize pathogen-associated molecular patterns (PAMPs). PAMPs stimulate TLRs to initiate specific immunoactivity. The activation of TLRs signaling leads to the expression of pro-inflammatory gene products such as cytokines and inducible nitric oxide synthase (iNOS). To evaluate the therapeutic potential of dehydrocostus lactone (DHL), which is a natural sesquiterpene lactone derived from various medicinal plants, iNOS expression induced by LPS (TLR4 agonist), MALP-2 (TLR2 and TLR6 agonist), or Poly[I:C] (TLR3 agonist) were examined. DHL suppressed the iNOS expression induced by LPS, MALP-2, or Poly[I:C]. DHL also inhibited nitrite production induced by LPS, MALP-2, or Poly[I:C]. These results suggest that DHL can modulate TLRs signaling pathways resulting in anti-inflammatory effect.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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