이 연구는 김치에서 분리한 항균활성이 우수한 요구르트 제조용 유산균 스타터를 개발하기 위함이다. 분리한 103개의 산생성 균주를 PCR로 screening하여 72개의 유산균을 분리하였다. 분리균의 배양액을 paper disk method를 사용하여 병원성 미생물(E. coli, S. Enteritidis, S. aureus)에 대한 항균활성을 측정하였고, 활성이 강한 균주를 선별하여 API 50CHL과 16S rRNA sequencing 방법으로 균을 동정하였다. 균은 L. plantarum으로 확인되어 L.plantarum LHC52로 명명하였다. L. plantarum LHC52는 특히 E. coli에 대해 높은 항균성을 나타내었다. L.plantarum LHC52를 사용하여 제조한 요구르트의 미생물학적, 이화학적 특성과 관능검사 결과 대조구와의 유의적인 차이는 없었다. 그 결과 김치에서 분리한 L. plantarum LHC52의 항균활성이 우수한 요구르트 제조 스타터 균주로서 사용 가능함을 확인하였다.
본 연구에서는 Lactobacillus plantarum (L. plantarum) ilchiwhangchil 1785와 L. plantarum ilchiwhangchil 2020을 이용하여 황칠나무 잎 가지 추출물 및 수액의 발효 조건을 검토하였다. 지수성장기의 L. plantarum ilchiwhangchil 1785와 L. plantarum ilchiwhangchil 2020 균주를 발효에 사용하였다. 발효 중에 발효액의 pH 변화와 생균수의 변화를 분석하였다. 그 결과, 적당한 발효 조건은 잎 가지 추출물 20 wt% 및 수액 1 wt%를 함유하고, $37^{\circ}C$에서 2일간 발효시키는 것이었다. 잎 가지, 수액 발효 추출물의 항균력은 최소저해농도법(MIC)과 disk diffusion 방법을 이용하여 대장균(Escherichia coli, E. coli), 포도상구균(Staphylococcus aureus, S. aureus), 녹농균(Pseudomonas aeruginosa, P. aeruginosa)을 대상으로 비교하였다. 비발효 추출물을 함유한 배지에서 배양한 것보다 황칠나무 잎 가지 추출물 및 수액의 발효액을 함유한 배지에서 배양한 세 가지 균주 모두에서 항균활성이 증가하였다. 또한, 황칠나무 발효 추출물의 함량에 비례하여 항균 활성이 증가하였다. 연구 결과는 황칠나무 잎 가지 추출물 및 수액의 발효물의 천연보존제, 화장품소재 및 천연물 포장소재 등 천연 생기능성 물질로의 응용가능성을 시사한다.
Kim, Hangeun;Kim, Hye Sun;Park, Woo Jung;Chung, Dae Kyun
Journal of Microbiology and Biotechnology
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제25권11호
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pp.1849-1855
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2015
Staphylococcus aureus plays an important role in sepsis, septic shock, pneumonia, and wound infections. Here, we demonstrate that Lactobacillus plantarum extracts inhibited S. aureus-induced cell death of a human epithelial cell line, HT-29. In particular, we have shown that S. aureus-induced cell death was abolished by neutralization of α-toxin, indicating that α-toxin is the major mediator of S. aureus-induced cell death. DNA fragmentation experiment and caspase assay revealed that the S. aureus-induced cell death was apoptosis. L. plantarum extracts inhibited the generation of effector caspase-3 and the initiator caspase-9 in S. aureus- or α-toxin-induced cell death. Moreover, expression of Bcl-2, an anti-apoptotic protein, was activated in L. plantarum extract-treated cells as compared with the S. aureus- or α-toxin-treated only cells. Furthermore, S. aureus-induced apoptosis was efficiently inhibited by lipoteichoic acid and peptidoglycan of L. plantarum. Together, our results suggest that L. plantarum extracts can inhibit the S. aureus-mediated apoptosis, which is associated with S. aureus spreading, in intestinal epithelial cells, and may provide a new therapeutic reagent to treat bacterial infections.
치자황색소로부터 미생물에 의해 변환된 색소의 색조차이를 규명하고자 L. plantarum과 S. epidermidis에 의해 변환된 색소를 Amberlite XAD-4 column chromatography로 정제 한 다음 Sephadex LH-20 column의 gel filtration 용출양상과 분리된 색소의 분광학적 특성을 조사 하였다. L. plantarum에 의해 변환된 색소는 crocetin보다 큰 분자크기를 갖고 588 nm에서 홉수극대를 갖는 단일의 청색소를 생성하며, S. epidermidis에 의해 변환된 색소는 L. plantarum에 의해 생성되는 588 nm에 흡수극대를 갖는 청색소와 함께 crocetin 보다 작은 분자크기와, 413 nm에서 흡수극대를 갖는 황색소를 동시에 생성함으로서 청녹색을 띠는 것임이 밝혀졌다.
The antitumor effects of mice fed with cell lysate of Lactobacillus plantarum were studied. The abdominal cancer induced by Sarcoma-180 was markedly inhibited and the expected life span was extended by 60% for the Balb/c mice fed with L. plantarum cell lysate for two weeks. A similar result was obtained for the rat inoculated with Spontaneous Osteosarcoma(SOS). The primary tumor volume of SOS was reduced by 70% for the rats fed with L. plantarum cell lysate (100mg/kg/day) for one week before the inoculation of SOS, while only 42% for the rats fed with the same amount of cell lysate for one week after the inoculation of tumor cell line, SOS. As lung was the metastasis site of SOS, the weight of lung was measured to determine the degree of metastasis inhibition by the L. plantarum cell lysate feeding. The rats fed with cell lysate for one week showed a remarkable inhibition of lung metastasis by 63%(before) and 46%(after), respectively. These results indicate that the feeding of L. plantarum cell lysate to mouse or rat can induce a strong stimulation of mucosal or systemic immune system and these effects results in an efficient antitumor activity.
Lactiplantibacillus plantarum (L. plantarum) ST was isolated from De'ang pickled tea in Yunnan Province, China. The genomes of strain ST were fully sequenced and analyzed using the PacBio RS II sequencing system. Our previous study has shown that L. plantarum ST is a potential probiotic strain. It had strong tolerance in the simulated artificial gastrointestinal tract, and in the antagonism tests, this strain showed strong antibacterial activity. Therefore, as a probiotic, it may be used in animal breeding. L. plantarum ST genome was composed of 1 circular chromosome and 7 plasmids. The length of the whole genome was 3320817 bp, and the annular chromosome size was 3058984 bp, guanine + cytosine (G ± C) content (%) was 44.76%, which contained 2945 protein-coding sequences (CDS). This study will contribute to a further comprehensive understanding of L. Plantarum ST at the genomic level and provide a theoretical basis for its future application in animal breeding.
Park, Sun-Young;Cho, Seong-A;Kim, Sae-Hun;Lim, Sang-Dong
한국축산식품학회지
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제34권5호
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pp.647-655
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2014
Obesity is strongly associated with several metabolic and chronic diseases and has become a major public health problem of worldwide concern. This study aimed to investigate the physiological characteristics and anti-obesity effects of Lactobacillus plantarum Q180. Lactobacillus plantarum Q180 was isolated from the faces of healthy adults and found to have a lipase inhibitory activity of $83.61{\pm}2.32%$ and inhibited adipocyte differentiation of 3T3-L1 cells ($14.63{\pm}1.37%$) at a concentration of $100{\mu}g/mL$. The strain was investigated for its physiological characteristics. The optimum growth temperature of L. plantarum Q180 was $37^{\circ}C$. Lactobacillus plantarum Q180 showed higher sensitivity to novobiocin in a comparison of fifteen different antibiotics and showed the highest resistance to rifampicin, polymyxin B and vancomycin. The strain showed higher ${\beta}$-galactosidase and N-acetyl-${\beta}$-glucosaminidase activities. It also did not produce carcinogenic enzymes such as ${\beta}$-glucuronidase. The survival rate of L. plantarum Q180 in MRS broth containing 0.3% bile was 97.8%. Moreover, the strain showed a 97.2% survival rate after incubation for 3 h in pH 2.0. Lactobacillus plantarum Q180 was displayed resistance to Escherichia coli, Salmonella Typhimurium and Staphylococcus aureus with rates of 55.6%, 38.0% and 47.6%, respectively. These results demonstrate that L. plantarum Q180 has potential as a probiotic with anti-obesity effects.
The growth characteristics and the cellular protein patterns of the Lactobacillus plantarum isolated and identified from oat silage were examined in order to confirm whether it will be used practically as probiotics or not. L plantarum was identified by morphological and biochemical tests including of final conforming by API 50CHL kit. The cultivation in MRS broth of the strain under the condition of different temperature, proved that they grew into $2.0{\times}10^{9}$ in $25^{\circ}C$, into $1.4{\times}10^{9}$ in $35^{\circ}C$ but they decreased into $4.5{\times}10^{5}$ growth in $45^{\circ}C$. The comparison of the growth by measurement of O.D600nm value after 24 hour cultivation between L plantarum and commercial probiotics, showed that the strain had a higher growth than commercial as 1.841 : 1.623. The measurement of it under bile acid's existence, indicated that this isolation was not influenced by bile acid and the tolerance was $3.2{\times}10^{9}$, $3.9{\times}10^{9}$ and $3.2{\times}10^{9}$, respectively, when each of 0%, 1%, and 2% oxigall existed. The examination of their antibiotics susceptibility by disk diffusion test, proved that L plantarum showed resistance against danofloxacin(5mcg), gentamycin(10mcg), kanamycin(30mcg), neomycin(30mcg) and streptomycin(10mcg). Based upon the test of the bacteriocin formation of this L plantarum, it was found out that the inhibition zone was not formed. In growth of L plantarum and E coli in nutrient broth, all E coli died out within 6 hours after cultures.
Interferon (IFN)-λ plays an essential role in mucosal cells which exhibit strong antiviral activity. Lactobacillus plantarum (L. plantarum) has substantial application potential in the food and medical industries because of its probiotic properties. Alphacoronaviruses, especially porcine epidemic diarrhea virus (PEDV) and transmissible gastroenteritis virus (TGEV), cause high morbidity and mortality in piglets resulting in economic loss. Co-infection by these two viruses is becoming increasingly frequent. Therefore, it is particularly important to develop a new drug to prevent diarrhea infected with mixed viruses in piglets. In this study, we first constructed an anchored expression vector with CWA (C-terminal cell wall anchor) on L. plantarum. Second, we constructed two recombinant L. plantarum strains that anchored IFN-λ3 via pgsA (N-terminal transmembrane anchor) and CWA. Third, we demonstrated that both recombinant strains possess strong antiviral effects against coronavirus infection in the intestinal porcine epithelial cell line J2 (IPEC-J2). However, recombinant L. plantarum with the CWA anchor exhibited a more powerful antiviral effect than recombinant L. plantarum with pgsA. Consistent with this finding, Lb.plantarum-pSIP-409-IFN-λ3-CWA enhanced the expression levels of IFN-stimulated genes (ISGs) (ISG15, OASL, and Mx1) in IPEC-J2 cells more than did recombinant Lb.plantarum-pSIP-409-pgsA'-IFN-λ3. Our study verifies that recombinant L. plantarum inhibits PEDV and TGEV infection in IPEC-J2 cells, which may offer great potential for use as a novel oral antiviral agent in therapeutic applications for combating porcine epidemic diarrhea and transmissible gastroenteritis. This study is the first to show that recombinant L. plantarum suppresses PEDV and TGEV infection of IPEC-J2 cells.
본 연구에서는 시판 생막걸리에서 분리한 유산균의 probiotics 특성을 연구하기 위해 내산성, 내담즙성, 장 부착능에 효능이 있는 6개 균주를 선별하여 동정하였다. 생막걸리에서 분리한 유산균을 pH 2.5의 산성 및 담즙산(0.3% oxgall) 조건에서 내산성과 내담즙성을 측정한 결과 BSM-2, BSM-3, GSM-3, TJH-1, EHJ-1, EHJ-2의 6개 균주에서 각각 $10^7$, $10^8CFU/mL$ 높은 생존률을 나타내어 우수한 내산성과 내담즙성을 확인할 수 있었다. 내산성과 내담즙성에 효능이 있는 6개 균주의 16S rDNA 분석 결과, L. plantarum (BSM-2, EHJ-1) L. casei (GSM-3, EHJ-2), L. brevis (BSM-3), P. pentosaceus (TJH-1)의 4개 group이 동정되었다. 장부착능에서는 다른 유산균에 비해 장내 부착능이 뛰어난 것으로 알려진 L. rhamnosus GG를 대조군으로 사용하였으며 HT-29 cell에 대해 6종의 유산균이 모두 장 부착능을 보였으며 L. casei(GSM-3, EHJ-2)가 가장 장 부착능이 높았다. 항산화능력은 L. plantarum BSM-2와 EHJ-1에서 각각 32.44%, 24.65%의 DPPH radical 소거능을 보였다. 시판 생막걸리에서 분리된 유산균은 다양한 식중독 원인 세균에 대하여 항균활성을 지니고 있었으며, 본 연구에서는 유산균이 생성하는 항균물질인 bacteriocin이 아닌 유산균 발효 중 젖산을 생성하면서 pH의 저하로 항균활성을 보인다는 결과를 확인할 수 있었다. Probiotics로의 기능성을 가진 6개 균주의 콜레스테롤 저하능력은 L. plantarum BSM-2와 EHJ-1에서 각각 68.82%, 56.38%의 높은 감소율을 나타내었다. 시판 생막걸리에서 분리한 유산균의 probiotic 특성을 조사해 본 결과 L. plantarum BSM-2, EHJ-1, L. brevis BSM-3, L. casei GSM-3, EHJ-2, P. pentosaceus TJH-1 모두 프로바이오틱스의 기본특성을 지니고 있어 프로바이오틱 균주로서 이용가치가 충분하다고 판단되어지며, L. plantarum BSM-2가 내산성, 내담즙성이 가장 우수한 결과를 나타내었고, 장 부착성이 우수하였으며, 뛰어난 항산화 능력과 항균력을 지니며, 콜레스테롤 저하능도 뛰어나 가장 우수한 프로바이오틱 균주라고 판단된다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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