Chitosan membranes crosslinked with glutaraldehayde that contained chiral environment were prepared. The chitosan membranes were characterized using FTIR and swelling index measurements. Their swelling index in water ranged from 100 to 70%, depending on the crosslinking time. The separation of D- and L-isomers of tryptophan was achieved through a pressure driven membrane separation process, using the self-supporting crosslinked chitosan membranes. The chiral separation performance of the membranes depended strongly on the swelling index of the membranes and the separation conditions such as concentration of feed solutions and different operating pressures. Especially when a chitosan membrane with a swelling index of 70% was used, almost complete optical resolution of D- and L-tryptophan was obtained ; enantiomeric excess (ee %) of 97.92% and flux of 2.26 g/㎡$.$h.
본 연구에서는 토양으로부터 분리한 Indole-3-acetic acid (IAA) 고생산 균주인 Pantoea agglomerans SRCM 119864의 IAA 생산량을 증가시키기 위해 반응표면분석법을 활용하여 배지 조성 최적화를 수행하였다. Plackett-Burman design (PBD)을 이용하여 전구체인 L-tryptophan 이외의 IAA 생산에 영향을 주는 배지 성분 11개의 영향을 조사하였으며, 통계학적 분석을 통해 IAA 최적생산을 위한 배지 인자로 sucrose, tryptone, sodium chloride를 선정하였다. PBD에서 선정된 3가지 인자와 L-tryptophan의 농도 최적화를 수행하기 위해 적은 실험수로도 최적값을 분석할 수 있는 hybrid design을 설계하였다. 실험 모형에서 예측한 P. agglomer- ans SRCM 119864 균주의 IAA 최적 생산을 위한 배지 조성과 농도는 sucrose 13.38 g/l, tryptone 18.34 g/l, sodium chloride 9.71 g/l, L-tryptophan 6.25 g/l로 분석되었으며, 이때의 IAA 생산량은 64.34 ±1.07 mg/l로 예측되었다. ANOVA 분석을 통하여 실험 모형의 통계학적 유의성과 적합성을 검증하였으며, 설계한 최적 조성배지에서 모델 검증실험을 수행하여 IAA 생산량을 측정한 결과, 예측된 IAA 생산량과 매우 유사함을 확인하였으며, 최종 최적화 수행을 통해 IAA 생산량을 기본 배지 대비 44.56% 증가시켰다. 본 연구를 통하여 토양에서 IAA를 고생산하는 균주를 선별하여 배지 조성 최적화를 수행하였으며, 이를 바탕으로 지속가능한 농업 및 작물 생산량 증대를 위한 산업화 기초자료로서 활용될 수 있을 것으로 기대된다.
Kim, Dong-Sub;Lee, In-Sok;Jang, Cheol-Seong;Hyun, Do-Yoon;Lee, Sang-Jae;Seo, Yong-Weon;Lee, Young-Il
Journal of Plant Biotechnology
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제5권1호
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pp.33-41
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2003
Microspore-derived cell lines resistant to 5-methyltryptophan (5MT, a tryptophan analog) or S-(2-aminoethyl)-L-cysteine (AEC, a Iysine analog) were selected in rice by in vitro mutagenesis. For selection of 5MT or AEC resistant cell lines, suspension-cultured cells were irradiated with gamma rays. Thirteen 5MT resistant cell lines were selected and they were able to grow stably at 2 times higher 5MT concentration. A feedback insensitive form of anthranilate synthesis, the pathway specific control enzyme for tryptophan synthesis, was detected from the 5MT resistant lines. Contents of the free amino acids in five resistant lines (MR12-1 to MR12-5) showed a 7.4 to 46.6 times greater level than that in the control culture. Tryptophan, phenylalanine, and tyrosine levels in the shikimate pathway were 28.1 and 22.5 times higher in MR12-3 and MR12 4, respectively, than that measured in the control cells. Four AEC resistant cell lines were isolated from cultures grown on medium containing 1 mM AEC, They were able to grow stably with 2 mM AEC, while sensitive calli were inhibited by 0.5 mM AEC. Aspartate kinase activities of the resistant lines were insensitive to the natural inhibitor, Iysine, and accumulated 2.2 to 12.9-fold higher levels of free Iysine than that of the control cells. Especially, the levels of aspartate, asparagine, and methionine in the aspartate pathway showed higher accumulation in the AEC resistant lines than that in the control cells.
두 개의 D-아미노산 물질을 분리함에 있어서 이온성 액체의 영향을 고찰하였다. 아미노산 물질로서 D-tryptophan과 N-CBZ-D-phenylalanine을 사용하였으며, 이온성 액체로서 1-butyl-3-methylimidazolium tetrafluoroborate(${[BMIm]}^+{[BF_4]}^-$)을 사용하였고, 역상 액체 크로마토그래피로 분석하였다. 이동상은 각각 65%, 70%, 80% 메탄올을 주성분으로 0.5, 1.0, 1.5, 2.0, 4.0, 6.0, 8.0, 10.0, 12.0과 15.0 mmol/L의 농도의 이온성 액체를 첨가하였고, 칼럼($3.9{\times}300mm$)에 $15{\mu}m$의 입자 크기를 가진 $C_{18}$ 실리카 겔을 충진하여 사용하였다. 이온성 액체를 첨가함으로써 D-tryptophan의 체류인자는 거의 변화가 없었지만, N-CBZ- D-phenylalanine의 체류인자는 감소하였다. 두 물질의 분리도는 메탄올의 함량과 이온성 액체의 농도에 따라 변화하였다. 메탄올의 함량이 낮을수록, 이온성 액체의 농도의 증가에 따라서 분리도는 증가하는 경향을 나타내었다
The effects of protoberberine compounds on serotonin biosynthesis in P815 cells were investigated. Protoberberine compounds such as berberine, palmatine and coralyne decreased serotonin content dose-dependently, but coptisine did not. The $IC_{50}$ values of berberine, palmatine and coralyne were $3.0\;{\mu}M,\;16.5\;{\mu}M\;and\;14.5\;{\mu}M$, respectively. Protoberberine compounds at concentrations up to $20\;{\mu}M$ were not cytotoxic towards P815 cells. The activity of tryptophan hydroxylase, a ratelimiting enzyme in serotonin biosynthesis, was inhibited by the exposure of berberine, palmatine and coralyne in P815 cells (14.9-19.3% inhibition at $2-15\;{\mu}M$), but that of aromatic L-amino acid decarboxylase was not. These results suggest that the inhibition of tryptophan hydroxylase activity by berberine, palmatine and coralyne might partially contribute to the decrease in serotonin content in P815 cells.
본 실험은 쪽 세포의 현탁배양에서 indirubin 생산을 위한 indole의 처리 시기와 처리 기간 및 첨가량을 찾기 위하여 수행하였으며 얻어진 결과는 다음과 같다. 1. Indole 첨가시 세포 생장량은 억제되었다. 2. Tryptophan 첨가시 세포 생장량의 증가는 크지 않았다. 3. Indole과 L-tryptophan을 고체레지에 첨가한 경우 indole을 첨가한 배지에서 만 indirubin이 검출되었다. 4. Indirubin 생산에 적절한 indole 첨가 농도는 고체배지에서 200mg으로 나타났다. 5. 현탁배양 중 indole 첨가시기를 달리한 결과 배양 20일 후 indole을 첨가한 배지에서 세포와 배지내 indirubin 농도가 높았다. 6. 고체배양보다 현탁배양에서 세포내에 축적된indirubin이 많았으며 배지 내 로 상당량의 indirubin이 유출되었다.
Zahir, Z.A.;Shah, M. Kashif;Naveed, M.;Akhter, M. Javed
Journal of Microbiology and Biotechnology
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제20권9호
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pp.1288-1294
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2010
Rhizobium phaseoli strains were isolated from the mung bean (Vigna radiata L.) nodules, and the most salt tolerant and high auxin producing rhizobial isolate N20 was evaluated in the presence and absence of L-tryptophan (L-TRP) for improving the growth and yield of mung bean under saline conditions in a pot experiment. Mung bean seeds were inoculated with peat-based inoculum and NP fertilizers were applied at 30-60 kg/ha, respectively. Results revealed that imposition of salinity reduced the growth and yield of mung bean. On the contrary, the separate application of L-TRP and Rhizobium appeared to mitigate the adverse effects of salt stress. However, their combined application produced more pronounced effects and increased the plant height (28.2%), number of nodules per plant (71.4%), plant biomass (61.2%), grain yield (65.3%), and grain nitrogen concentration (22.4%) compared with untreated control. The growth promotion effect might be due to higher auxin production in the rhizosphere and improved mineral uptake that reduced the adverse effects of salinity. The results imply that supplementing Rhizobium inoculation with L-TRP could be a useful approach for improving the growth and yield of mung bean under salt stress conditions.
Kim, Hong-Suk;Park, Hyoung-Joon;Heu, Sunggi;Jung, Jin
Journal of Applied Biological Chemistry
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제44권4호
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pp.173-176
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2001
This report concerns the role of indole-3-acetic acid (IAA) in bacterial pustule disease of soybean. Pustule production in soybean leaves caused by Xanthomonas axonopodis pv. glycines was accompanied by a drastic increase in IAA content of host tissues. The phytopathogenic bacterium synthesized IAA in a tryptophan concentration-dependent manner when grown in a defined minimal medium. In complex media, however, the pathogen showed no response to tryptophan feeding, implying that the bacterial biosynthetic machinery of IAA is strictly regulated by nutrient availability of its growth environments. The results may suggest that IAA of bacterial origin and tryptophan of plant origin be involved in the process of pustule symptom development in soybean.
고지혈증 치료제인 Lovastatin을 Aspergillus terreus로부터 생산하기 위해 최적의 탄소원, 질소원, 인산염 및 아미노산을 선정하였다. 단일 탄소원에서는 글리세롤 45mL/L가 Lovastatin 256mg/L로 포도당 45g/L의 기본배지보다 약 3.5배 이상의 높은 Lovastatin 생산량을 나타내었다. 탄소원이 지방산 합성에 이용되는 것을 차단하고 Lovastatin으로의 합성을 촉진하기 위해 기름 증류를 탄소원으로 이용한 결과, 높은 Lovastatin 생산량과 균재량을 나타내었으나, 글리세롤 45mL/L가 Lovastatin 생산량이 낮았다 포도당 50g/L와 글리세롤 50mL/L를 혼합한 복합 탄소원이 Lovastatin 298mg/L로 기본배지에 비해 약 4배 이상의 가장 높은 Lovastatin 생산량을 나타냈었다. 질소원의 영향은 뚜렷하여 질소원에 따라 Lovastatin 생산량이 큰 차이를 나타내었으며, 그 중에서 peptonized milk가 가장 Lovastatin 생산량이 높았다. 인산염 중에서는 $K_2HPO_4$가 가장 높은 Lovastatin 생산량을 나타내었다. 이상에서 얻어진 최적 배지에 각종 아미노산을 첨가한 결과 L-hisbhine과 L-tryptophan이 가장 효과적이었으며, 최적 농도는 둘다 6g/L였다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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