A growth experiment was conducted to evaluate the nutritivie values of supplemental lysine and methionine in broiler chicks. Two types of L-lysine, liquid and powder type, and DL-methionine were added to the diets at different levels of dietary protein with two growth phases, 0-3 weeks and 4-6 weeks named starter and grower, respectively. Six hundred seventy two chicks were allotted in 14 treatments; 3 controls by dietary CP level (starter-grower) with CP 23-21%, CP 21-19% and CP 20-18, 8 groups of liquid and powder lysine supplementation of 0.1, 0.2, 0.3 and 0.4%, and 3 groups of lysine and methionine supplementation. Body weight, feed intake, and excreta were measured and analyzed to determine growth performance, amino acid digestibilities, and the quantity of excreted nitrogen in feces. Chicks fed CP 23-20 with 3,200 ME kcal showed significantly better growth performance than those fed CP 21-18 for 6 weeks. The supplementation of 0.2% of either type of lysine to CP 21-19 diet improved weight gain and feed efficiecy to the extent that CP 23-21 diet was fed. Physical type of lysine did not affect chick's growth and amino acid digestibilities of the diets. The level of CP in the diet significantly affected nitrogen excretion in feces. Supplementation of lysine and methionine to CP 21-18 diet reduced fecal nitrogen by 10% compared to CP 23-21 diet. It was confirmed that 0.2% of supplemental lysine to the broiler diet spared the dietary protein by 3%, and also reduced nitrogen excretion in feces by 10%.
Muramatsu, T.;Hatano, T.;Ueda, Y.;Furuse, M.;Okumura, J.
Asian-Australasian Journal of Animal Sciences
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제7권2호
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pp.279-288
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1994
Three experiments were conducted with female Japanese Saanen goats to investigate the effects of rumen protected methionine (RPMet) on N utilization and whole-body protein turnover. Whole-body leucine flux from which whole-body protein turnover rates were derived was measured by primed- continuous infusion of L-[$^{15}N$] leucine in combination with gas chromatography-mass spectrometry. Throughout the experiments RPMet was added to a diet to supply 1.5 g DL-methionine per goat per day. Irrespective of the major N sources (i.e., protein or urea) in the diet, both N deposition and whole-body protein synthesis were increased (p<0.05), and urinary N excretion was decreased (p<0.05) by supplementing with RPMet, but not by supplementing with methionine. It was concluded, therefore, that under the present experimental conditions, the RPMet supplement was efficiently bypassed to result in enhanced body protein synthesis of the goat.
Methionine sulfoxide reductase A (MSRA) is a ubiquitous enzyme that has been demonstrated to reduce the S enantiomer of methionine sulfoxide (MetSO) to methionine (Met) and can protect cells against oxidative damage. In this study, we isolated a novel MSRA (SlMSRA2) from Micro-Tom (Solanum lycopersicum L. cv. Micro-Tom) and characterized it by subcloning the coding sequence into a pET expression system. Purified recombinant protein was assayed by HPLC after expression and refolding. This analysis revealed the absolute specificity for methionine-S-sulfoxide and the enzyme was able to convert both free and protein-bound MetSO to Met in the presence of DTT. In addition, the optimal pH, appropriate temperature, and $K_m$ and $K_{cat}$ values for MSRA2 were observed as 8.5, $25^{\circ}C$, $352{\pm}25\;{\mu}M$, and $0.066{\pm}0.009\;S^{-1}$, respectively. Disk inhibition and growth rate assays indicated that SlMSRA2 may play an essential function in protecting E. coli against oxidative damage.
기체 크로마토그래피-전자포획검출기 (gas chromatograph-electron capture detector : GC-ECD)를 이용하여 사람의 혈액 내에 존재하는 homocysteine (Hcy), 관련 화합물인 cysteine (Cys)과 methionine (Met)에 대해 선택적이고 감도 좋은 분석방법에 대하여 연구하였다. 시료는 혈장 내에서 환원과정을 거친 후 ethyl chloroformate (ECF)와 pentafluoropropyl alcohol (PEP-OH) 유도체화 시약을 사용하여 N(O,S)-ethylearhonyl pentafluoropropyl (PEP) ester 유도체를 만들어 추출의 효율을 높이면서 동시에 GC-ECD에 대한 크로마토그래피 성질을 향상시켰다. 생성된 유도체들은 chloroform으로 추출한 후 잔류물을 완전히 건조시키고 hexane으로 추출하여 GC-ECD로 분석하였다. Hcy와 Met는 $5-50{\mu}mol/L$, Cys는 $40-400{\mu}mol/L$ 범위에서 $R^2=0.990$ 이상의 직선상의 상관관계를 나타내었다. 이 작성한 질량곡선을 통해서 5명의 자원자들의 혈액 중에 존재하는 Hcy, Cys, met의 함량을 분석하였다.
$^{99m}Tc-Methionine$ complexes from enantiomeric and racemic methionines were prepared controlling reaction parameters such as pH and the concentration of stannous chloride. Some radiochromato-graphic systems were also examined to determine the labelling yields of $^{99m}Tc$ complexes. The best resolutions of $^{99m}Tc$ complexes were obtained at ITLC-SA developed with acetone and paper chromatography with n-butanol saturated with 0.3N HCI. In the former system, $HR-{99m}Tc$ and $^{99m}Tc-methionine$ complex remained at origin, while $^{99m}TcO_4^-$ moved with Rf value of 1.0. In latter process, $HR-^{99m}Tc$ stayed at the origin, while $^{99m}TcO_4^-\;and\;^{99m}Tc-methionine$ complexes moved with Rf value of 0.5. By combining of two chromatographic systems, the contents of three $^{99m}Tc$ species were calculated easily. $^{99m}Tc$ Labelling from enantiomeric and racemic methionines had little differences and the optimal condition was found at pH 9.00 and the molar ratio of methionine to stannous chloride of 24:1. The yields of $^{99m}Tc$ complexes from D-, L-, and DL-methionines were 87.6%, 94.1%, and 97.9%, respectively. The results indicated that methionine containing relatively hydrophobic methylthio group $(-SCH_3)$ would be labelled with $^{99m}Tc$ by stannous chloride method.
The relative performance and immune response was evaluated in White Leghorn layers fed liquid DL-methionine hydroxyl analogue-free acid (MHA-FA) relative to dry DL-methionine (DLM) in maize-soybean-sunflower based diets. Three graded levels of methionine (Met) from DLM or MHA-FA were added to the basal diet containing 0.27% Met on an equimolar basis to achieve 0.30, 0.36 and 0.42% Met in the diet. Each diet was fed ad libitum to 25 replicates of one bird (individual feeding) each, from 24 to 40 weeks of age. A regime of 16 h light was provided and all the layers were kept under uniform management throughout the experimental period. None of the parameters studied were influenced by the interaction between source and level of Met in diets. Similarly, the majority of parameters, except for daily feed consumption and immune response (influenced by level) and egg specific gravity and shell thickness (influenced by source), were not affected by either source or level of Met in the diets. Feed consumption was significantly lower in the birds fed a diet containing 0.42% Met compared to those fed lower levels of Met. The cutaneous basophilic hypersensitivity response to PHA-P and antibody titre (32 and 40 wk) to inoculation of sheep red blood cells increased significantly by increasing the concentration of Met in the diet from 0.30 to 0.36%. Thus, the Met requirement for immune competence was higher than for optimum production. The source of Met significantly influenced the egg specific gravity and shell thickness. The specific gravity and shell thickness of eggs increased significantly when MHA-FA was used as the source of Met in the diet compared to DLM. From the study it is concluded that Met requirement for immune competence (360 mg/b/d) is higher than for optimum production (300 mg/b/d). MHA-FA was comparable with DLM as a source of Met for production performance and immunity, when the bioavailability of MHA-FA was considered as 88% of DLM. Further, MHA-FA improved egg shell quality compared to DLM.
Among human antimicrobial peptides (hAMPs), DCD-1L has a broad spectrum of antimicrobial activity over a wide pH range and in high salt concentrations. It offers a promising alternative to conventional antibiotics. The 458-bp-long dermcidin cDNA was amplified by PCR using a human fetal cDNA library as a template. The 147-bp fragment of the MDCD-1L gene encoding an additional methionine residue was subcloned into the pTYB11 vector. Recombinant MDCD-1L was expressed as an intein fusion protein in E. coli, and then purified by affinity chromatography using chitin beads. A small peptide with a molecular mass of about 5 kDa was detected by tricine gel electrophoresis. The recombinant MDCD-1L peptide was purified from the gel and its amino acid sequence was determined by nanoLC-ESI-MS/MS analysis. The initiating amino acid, methionine, remained attached to the N-terminal region of recombinant MDCD-1L. Purified MDCD-1L showed antimicrobial activity against a Micrococcus luteus test strain.
Kim, Hyun-Jin;Yeu, Ji-Eun;Lee, Dong-Suk;Kang, Mi-Sun
International Journal of Oral Biology
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제44권4호
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pp.152-159
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2019
The oral care probiotic strain Weissella cibaria CMU (oraCMU) inhibits volatile sulphur compounds associated with halitosis, presumably by inhibiting the growth of associated oral pathogens. In the present study, we investigated whether oraCMU inhibits the production of these compounds by suppressing the expression of mgl. This gene encodes L-methionine-α-deamino-γ-mercaptomethane-lyase (METase) and is involved in the production of methyl mercaptan (CH3SH) by Porphyromonas gingivalis. Therefore, we specifically investigated the effects of oraCMU on the growth, CH3SH production, METase activity, and mgl expression of P. gingivalis. The minimum inhibitory concentrations of cell-free supernatant and secreted proteins from oraCMU were 125 mg/mL and 800 ㎍/mL, respectively. At sub-minimum inhibitory concentration levels, these metabolites inhibited CH3SH production, but they also reduced P. gingivalis viability. Only heat-killed oraCMU decreased CH3SH production without affecting P. gingivalis viability. Heat-killed oraCMU also inhibited METase activity toward L-methionine and mgl mRNA expression (p < 0.05). In summary, we demonstrated the inhibition of volatile sulphur compounds via the antimicrobial action of oraCMU and, for the first time, the inhibition of such compounds by heat-killed oraCMU, which occurred at the molecular level.
고지혈증 치료제인 Lovastatin을 Aspergillus terreus로부터 생산하기 위해 최적의 탄소원, 질소원, 인산염 및 아미노산을 선정하였다. 단일 탄소원에서는 글리세롤 45mL/L가 Lovastatin 256mg/L로 포도당 45g/L의 기본배지보다 약 3.5배 이상의 높은 Lovastatin 생산량을 나타내었다. 탄소원이 지방산 합성에 이용되는 것을 차단하고 Lovastatin으로의 합성을 촉진하기 위해 기름 증류를 탄소원으로 이용한 결과, 높은 Lovastatin 생산량과 균재량을 나타내었으나, 글리세롤 45mL/L가 Lovastatin 생산량이 낮았다 포도당 50g/L와 글리세롤 50mL/L를 혼합한 복합 탄소원이 Lovastatin 298mg/L로 기본배지에 비해 약 4배 이상의 가장 높은 Lovastatin 생산량을 나타냈었다. 질소원의 영향은 뚜렷하여 질소원에 따라 Lovastatin 생산량이 큰 차이를 나타내었으며, 그 중에서 peptonized milk가 가장 Lovastatin 생산량이 높았다. 인산염 중에서는 $K_2HPO_4$가 가장 높은 Lovastatin 생산량을 나타내었다. 이상에서 얻어진 최적 배지에 각종 아미노산을 첨가한 결과 L-hisbhine과 L-tryptophan이 가장 효과적이었으며, 최적 농도는 둘다 6g/L였다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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