고추와 사과에서 분리한 20개와 14개의 탄저병균 중에서 2001-45가 스테롤 생합성을 저해하는 살균제에 대하여 저항성 균주로 판명되었다. 2001-45는 myclobutanil, tebuconazole, hexaconazole, nuarimol 등에 대하여 153.5, 42.7, 34.0, 17.1 $\mu\textrm{g}$/ml로, 실험에 사용한 다른 탄저병균들 보다 높은 EC$_{50}$ 값을 보이며, 서로간에 교차 저항성을 나타냈다. 하지만 prochloraz(스테를 생합성 저해 살균제)에 대한 EC$_{50}$ 값은 0.07 $\mu\textrm{g}$/ml로, 감수성균인 2001-44와 JC24 보다도 감수성이 높았다. 20, 25, 3$0^{\circ}C$에서 스테롤 생합성 저해 살균제에 대하여 저항성인 2001-45의 균사 생장은 2001-44와 비슷하였으며, 또 다른 감수성인 JC24보다는 빨랐다. 그러나 PDA상에서의 포자 형성 능력과 고추열매에 대한 병원성은 JC24보다 현저하게 떨어졌다.
The presence of Citrus tristeza virus (CTV) has previously been reported in citrus growing regions of Turkey. All serologically and biologically characterized isolates including I$\breve{g}$d${\i}$r, which was the first identified CTV isolates from Turkey, were considered mild isolates. In this study, molecular characteristics of the I d r isolate were determined by different methods. Analysis of the I$\breve{g}$d${\i}$r isolate by western blot and BD-RT-PCR assays showed the presence of MCA13 epitope, predominantly found in severe isolates, in the I$\breve{g}$d${\i}$r isolate revealing that it contains a severe component. For further characterization, the coat protein (CP) and the RNA-depen-dent RNA polymerase (RdRp) genes representing the 3' and 5' half of CTV genome, respectively, were amplified from dsRNA by RT-PCR. Both genes were cloned separately and two clones for each gene were sequenced. Comparisons of nucleotide and deduced amino acid sequences showed that while two CP gene sequences were identical, two RdRp clones showed only 90% and 91% sequence identity in their nucleotide and amino acid sequences, respectively, suggesting a mixed infection with different strains. Phylogenetic analyses of the CP and RdRp genes of I$\breve{g}$d${\i}$r isolate with previously characterized CTV isolates from different citrus growing regions showed that the CP gene was clustered with NZRB-TH30, a resistance breaking isolate from New Zealand, clearly showing the presence of severe component. Furthermore, two different clones of the RdRp gene were clustered separately with different CTV isolates with a diverse biological activity. While the RdRp-1 was clustered with T30 and T385, two well-characterized mild isolates from Florida and Spain, respectively, the RdRp-2 was most closely related to NZRB-G90 and NZRB-TH30, two well-characterized resistance breaking and stem pitting (SP) isolates from New Zealand confirming the mixed infection. These results clearly demonstrated that the I$\breve{g}$d${\i}$r isolate, which was previously described as biologically a mild isolate, actually contains a mixture of mild and severe strains.
2020년 전라북도 완주 소재 약용작물 전시포장에서 재배중인 범부채(Iris domestica) 140개체 가운데 3개체의 잎에서 괴사증상이 발견되었다. Reverse transcription polymerase chain reaction 검정결과 증상을 나타내는 3개체가 tomato spotted wilt virus (TSWV)에 감염된 것으로 확인되었다. 증상주로부터 분리한 TSWV 분리주 'Blackberry lily-kr1'의 전체 염기서열을 결정하였으며, 유전자 은행에 있는 다른 분리주들과 L, M, S 분절유전체 부위의 염기서열 상동성을 비교하였다. 'Blackberry lily-kr1' 분리주는 L 분절 유전체는 우리나라에서 보고한 'JJ' 분리주(MF159046) 또는 'HJ' (LC273305) 분리주와 상동성이 높았으며, M과 S 분절 유전체는 'JJ' 분리주(MF159058과 KY021439)와 가장 상동성이 높았다. MEGA X 프로그램의 maximum likelihood 방법을 이용하여 'Blackberry lily-kr1'의 다른 TSWV 분리주들과의 계통학적 연관성에 관한 분석을 한 결과 L, M, S 분절유전체 모두 고추에서 분리한 'JJ' 분리주 및 환삼덩굴(Humulus japonicas)에서 분리한 'HJ' 분리주와 높은 연관성을 보였다. 건전한 I. domestica 식물에 'Blackberry lily-kr1'을 감염시킨 Nicoatiana rustica 식물 즙액을 접종한 결과 50일 후에 잎에 괴사 또는 이중 고리형태의 괴사 증상이 형성되었다. 이는 노지에서 재배하는 범부채에서 관찰된 괴사증상이 TSWV 감염에 의한 것임을 시사하는 결과이다. 이 연구는 우리나라에서 범부채에서 TSWV 발생에 관한 최초의 보고이다.
Mammalian reovirus (MRV) causes respiratory and intestinal disease in mammals. Although MRV isolates have been reported to circulate in several animals, there are no reports on Korean MRV isolates from wildlife. We investigated the biological and molecular characteristics of Korean MRV isolates based on the nucleotide sequence of the segment 1 gene. In total, 144 swabs from wild animals were prepared for virus isolation. Based on virus isolation with specific cytopathic effects, indirect fluorescence assays, electron microscopy, and reverse transcription-polymerase chain reaction, only one isolate was confirmed to be MRV from a Korean roe deer (Capreolus pygargus). The isolate exhibited a hemagglutination activity level of 16 units with pig erythrocytes and had a maximum viral titer of 105.7 50% tissue culture infectious dose (TCID50)/mL in Vero cells at 5 days after inoculation. The nucleotide and amino-acid sequences of the partial segment S1 of the MReo2045 isolate were determined and compared with those of other MRV strains. The MReo2045 isolate had nucleotide sequences similar to MRV-3 and was most similar (96.1%) to the T3/Bat/Germany/342/08 strain, which was isolated in Germany in 2008. The MReo2045 isolate will be useful as an antigen for sero-epidemiological studies and developing diagnostic tools.
A Gram-negative, catalase- and oxidase-positive, coccus-shaped bacterium was isolated from a rabbit with keratoconjunctivitis. Colonies of the isolate were round, smooth, and exhibited hemolytic activity on 5% sheep blood agar. Scanning electron microscopy revealed 0.4 to $0.5{\mu}m$ diameter oval cocci. Partial 16S rRNA gene (1446 bp) sequence analysis demonstrated the isolate had significant homology with the Moraxella cuniculi CCUG2154 strain isolated from a rabbit in Germany in 1973. Our isolate was designated as APQAB1701. Antibiotic susceptibility tests demonstrated that APQAB1701 was sensitive to 24 antibiotics; 3 of the antibiotics (nalidixic acid, spectinomycin, and colistin) had minimal inhibitory concentrations ${\geq}32{\mu}g/mL$ against the isolate.
The complete nucleotide sequences of both RNA of an isolated Barley mild mosaic virus (BaMMV) from Iksan, Korea, have been determined. RNA1 was 7273 nucleotides long and encodes for a polyprotein of 2261 amino acids, which contains the eight putative functional proteins. RNA2 was 3520 nucleotides long and encodes for a polyprotein of 894 amino acids, which contains two functional proteins. Results of multiple sequence alignment showed 92.9% similarity with Na1 isolate, followed by Sil, UK(F), Asl1, Remis M and UK(M) isolates, respectively. Comparison of the BaMMV-Iks polyproteins with the corresponding proteins of BaMMV-Na1 isolates showed 95% amino acid sequence identity. The phylogenetic analysis revealed that Iks isolate was closely related to Na1 strain and have a common origin.
Pak, Son-il;Hwang, Cheol-yong;Youn, Hwa-young;Han, Hong-ryul
대한수의학회지
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제39권2호
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pp.376-382
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1999
A methicillin-resistant Staphylococcus aureus (MRSA) isolate was recovered from a 9-month-old female Shih-Tzu dog with canine distemper virus infection. We performed in vitro antimicrobial susceptibility test to determine the most effective antimicrobial drug against the isolate and thus, to emphasize its potential clinical importance in animal practices. Isolate was confirmed MRSA by oxacillin agar screening test. The isolate was fully resistant to all $\beta$-lactam antibiotics and was susceptible to glycopeptides. Of the other antibiotics, mupirocin, TMP/SMZ (trimethoprim-sulfamethoxazole), and chloramphenicol showed inhibitory effect at the concentration of 4x MIC. The MICs ranged 0.25->$128{\mu}g/ml$, and MBCs ranged 0.5->$128{\mu}g/ml$. The combined TMP/SMZ with cefamandole or novobiocin showed synergistic effect, whereas the combination of novobiocin plus cefamandole or teicoplanin resulted in antagonistic effects. Although MRSA in animals so far has been reported in the geographically limited countries, at least theoretically, it could be occurred in the future more frequently through either human or animal origin. The use of this combination may be of value in this situation. As with all antimicrobial agents, inappropriate or unnecessarily prolonged therapy may contribute to the emergence of resistance strains and loss of efficacy.
BACKGROUND: Identification and characterization of endophytic yeasts inhabiting the roots of Ulmus parvifolia Jacq. and Quercus salicina Blume require biotechnological and culture-based techniques. METHODS AND RESULTS: Homogenized U. parvifolia and Q. salicina root samples were spread onto four types of agar medium containing ancgtibiotics, L-sorbose, and Triton X-100. In total, 25 yeast strains were isolated and subjected to phylogenetic analysis based on their internal transcribed spacer region sequences. The results revealed that the yeast genera Cyberlindnera (12 isolates) and Cryptococcus (1 isolate) were associated with roots of U. parvifolia; and the genera Rhodotorula (8 isolates), Trichosporon (3 isolates), and Kluyveromyces (1 isolate) were associated with roots of Q. salicina. Additionally, a Kluyveromyces isolate produced a detectable level of bioethanol. The yeast strains reported herein may be used in industrial production of biosurfactants and bioethanol. CONCLUSION: Our findings revealed that the endophytic yeast genera Cyberlindnera and Cryptococcus predominated in roots of U. parvifolia; and the genera Rhodotorula (8 isolates), Trichosporon (3 isolates), and Kluyveromyces (1 isolate) predominated in roots of Q. salicina. Additionally, Kluyveromyces isolates produced a detectable level of bioethanol.
Ayim, Benjamin Yaw;Kim, Young-Tae;Das, Kallol;Kang, In-Kyu;Lee, Seung-Yeol;Jung, Hee-Young
한국균학회지
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제47권3호
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pp.181-186
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2019
A designated fungal isolate, KNU-US-1802E was isolated from the soil in Uiseong, Korea. To identify characteristics of the isolate, it was cultured on PDA media for 6 days at $35^{\circ}C$. Colonies on PDA are flat, light gray, dense, with entire margins; reverse dark gray to black, with white margins. Aerial mycelia were smooth-walled, hyaline and 40~42 mm diameter after 6 days at $35^{\circ}C$. Conidia were hyaline, one-celled, ellipsoidal to fusiform, forming long chains with average length ${\times}$ width of $5.0{\pm}0.3{\times}2.9{\pm}0.2{\mu}m$. Molecular analysis indicates that the internal transcribed spacer (ITS) region and partial beta-tubulin (tub2) gene sequence showed 100% and 99% similarities, respectively with Acrophialophora ellipsoidea CGMCC 3.15255 collected from China. Phylogenetic analysis by the neighbor-joining (NJ) method shows that the KNU-US-1802E was clustered with A. ellipsoidea CGMCC 3.15255 in a phylogenetic tree constructed using the concatenated sequences of ITS region and tub2 gene sequences with a high bootstrap value. Based on these findings, the isolate KNU-US-1802E was identified as Acrophialophora ellipsoidea, and this is the first report of this isolate in Korea.
Ayim, Benjamin Yaw;Sung, Gihwan;Kang, In-Kyu;Lee, Seung-Yeol;Jung, Hee-Young
한국균학회지
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제47권2호
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pp.125-130
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2019
A fungal isolate, designated KNU-JJ-1824, was isolated from a soil sample collected from a field on Jeju, Korea. Colonies of the isolates cultured on PDA, MEA and CMAD for 14 days grew to diameters of 49~51 mm, 60~63 mm, and 47~50 mm, respectively. The colonies of this fungal isolate were dark green in color on both sides, and had irregular margins on the PDA media. Mycelia submerged and exhibited clear lines from the center to the edge on MEA media. On CMAD media, they were dark brown to greenish-brown, with narrow white margins. The shape of the conidia was guttulate, fusiform or clavate, and $1.9{\sim}3.4{\times}6.5{\sim}10.2{\mu}m$ in size. A molecular phylogenetic tree was constructed using dataset from small subunit (SSU) rDNA and the internal transcribed spacer (ITS) regions, and the isolate was found to cluster with Scleroconidioma sphagnicola UAMH 9731. Based on the results of the phylogenetic tree analysis and the cultural and morphological characteristics, the isolate was identified as Scleroconidioma sphagnicola. We report S. sphagnicola for the first time in Korea.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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