In this paper, an air isolate (NITT6L) has been screened based on hemolytic activity, emulsification activity, drop collapsing test, and oil displacement test, as well as lipase activity. It was found that strain NITT6L was able to reduce the surface tension of the medium from 61.5 to 39.83 mN/m and could form stable emulsions with tested vegetable oils. Morphological, biochemical, 16S rRNA sequencing analyses, and fatty acid methyl ester analysis using gas chromatography confirmed that the air isolate under study was Pseudomonas aeruginosa. Characterization of the biosurfactant using agar double diffusion assay revealed that the biosurfactant was anionic in nature, and CTAB-methylene blue assay and Molisch test revealed its glycolipid nature. The FT-IR spectrum confirmed that the crude biosurfactant was a rhamnolipid. Using unoptimized medium containing sucrose as the carbon source, the isolate was found to produce 0.3 mg/ml of rhamnolipid in batch cultivation (shake flask) at $37^{\circ}C$ and pH 7. Optimization of the medium components was carried out using design of experiments and the yield of rhamnolipid has been enhanced to 4.6 mg/ml in 72 h of fermentation.
Anaerobic fermentative bacteria were isolated from the acidogenic reactor of a labora- tory scale 2-stage anaerobic digestor. The isolate 1-6 was selected for its ablity to produce more fatty acids from distillery wastewater than others, and was identified as a strain of Clostridium. The isolate Clostridium sp. 1-6 is a thermophilic bacterium growing at 55$\circ$c , and grew best at pH 5.5. An acidogenic reactor using immobilized cells of the isolate Clostridium sp. 1-6 removed about 15% of COD from distillery wastwater as hydrogen, producing about 50 mM butyrate and about 10 mM acetate, when the reactor was operated at the hydraulic retention time(HRT) of 0.8 hr. It is proposed that this system can be used to convert the distillery wastewater to hydrogen and butyrate. More than 90% of COD was removed from the wastewater by anaerobic digestion using a 2-stage digestor consisting of a UASB methanogenic reactor and an acidogenic reactor of the immobilized cells of isolate Clostridium sp. 1-6.
Kim, Hye Soo;Kim, Chul Hwan;Kwon, Hyun Sook;Cho, Soo Jeong
한국버섯학회지
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제14권1호
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pp.21-26
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2016
The mannanase-producing bacteria, designated YJ17, was isolated from spent mushroom (Flammulina velutipes) substrates. The isolate YJ17 was a facultative anaerobic and was grown at temperatures ranging from $20^{\circ}C$ to $50^{\circ}C$ with an optimal temperature of $40^{\circ}C$. The DNA G+C content of the YJ17 was 44 mol%. The major fatty acids were anteiso-15:0 (38.9%), 17:0 (7.6%), and iso-15:0 (36.5%). The 16S rRNA gene sequence similarity between the isolate YJ17 and other Bacillus strains was from 98% to 99%. In the phylogenetic analysis based on these sequences, the isolate YJ17 and Bacillus amyloliquefaciens clustered within a group together and separated from other species of Bacillus. Based on the physiological and molecular properties, the isolate YJ17 was classified within the genus Bacillus as B. amyloliquefaciens YJ17. The optimal pH and temperature for mannanase activity of B. amyloliquefaciens YJ17 were pH 7.0 and $50^{\circ}C$, respectively.
This study was conducted to estimate the cultural characteristics, the production of antibiotic, and the selection of optimal media for mass culture of Bacillus licheniformis N1 isolate which was previously reported as an antagonistic bacterium to Botrytis cinerea. We investigated initial pH, temperatures and shaking speed for good cultural conditions and antibiotics production by N1 isolate. According to the results, the optimal conditions of initial pH, temperatures, and shaking speed were determined to be pH 5.0~5.5, 30~35$^{\circ}C$ and 250 rpm, respectively. Also, the optimal conditions for the antagonism by N1 isolate highly appeared in the initial pH as 5.0, and the mycelial growth inhibition was high when the substances used such as glucose or corn starch as carbon sources, and biji(soybean curd residue) flour as a nitrogen source. Furthermore, inhibitory area was significantly expanded, when 3% or 5% of corn starch was added into 5% of Biji flour as nitrogen source, were respectivley selected for mass culture of N1 isolate. Among them, 5% Biji flour medium showed higher cell density more than 10 times that in NB medium after 48 hour incubation. Therefore, the optimal medium was determined as 5% biji flour added 3~5% of corn starch for high density of cells.
반추위에서 분리한 곰팡이(IS-13)의 conjugated linoleic acid 생산 과정을 조사하고conjugated linoleic acid를 생산하는 곰팡이를 동정하기 위하여 본 연구를 실시하였다. IS-13 곰팡이가 함유된 배양액에 linoleic acid를 첨가한 결과 linoleic acid는 배양 12시간 이내에 conjugated linoleic acid와 trans-11 vaccenic acid로 biohydrogenation되었다. IS-13 곰팡이의 동정은 internal transcribed spacer 1 영역(ITS1)을 sequence하여 GenBank 유래의 관련 23속(종)의 반추위 곰팡이와 비교하였다. IS-13 곰팡이의 ITS1의 length는 218 bp인 것으로 확인되었으며, 염기서열 분석 결과 Orpinomyces species와 98% 일치하여 반추위내 Orpinomyces species는 conjugated linoleic acid 생산에 깊이 관여하는 것으로 확인되었다. 연구결과 본 균주는 Orpinomyces 속에 속하는 균으로 동정되었다.
In this study, we tested possibility of replacing nitrite salts, which were always added during the meat product processing, with the metabolites produced by antimicrobial and red pigment producing Monascus strains. We have already shown that Monascus No. 116 strain has the highest antimicrobial activity among the strains isolated from Ang-Khak. Monascus isolate No. 229 was chosen due to its outstanding red pigment producing ability. The red pigment production by No. 229 was highest in the medium containing 8% sucrose, 2% yeast extract, 0.1% K2HPO4, 0.5% MgSO4. Optimum pH and temperature for the red pigment production were pH 6.2 and 3$0^{\circ}C$, was found in spot or Rf value 0.54 on TLC plate using ethyl acetate-acetone-water (4:4:1, v/v/v) as development solvent system. Isolate No. 116 and No. 229 were cultured in a optimal condition for the antimicrobial activity and red pigmentation. The culture concentrates were applied in situ to the production of instantly processed ham. Mixed application of 89 ppm Na-nitrite and 300 ppm of culture broth concentrate of Monascus isolate No. 116 and 500 ppm of red color produced by Monascus isolate No. 229 showed similar results with the single application of 94 ppm Na-nitrite. These results confirmed that the antimicrobial activity and red pigment of Monascus strains might be valuable to replace Na-nitrite salt in meat processing.
2006년 5월 전북 군산시에 위치한 미꾸라지 양식장에서 미꾸라지가 대량으로 폐사하였다. 병어는 궤양을 동반한 체표의 출혈반점과 아가미 빈혈 및 울혈 있었고 간의 퇴색과 비장, 신장의 종대 및 장의 출혈이 나타났다. 병어의 간, 비장, 신장에서 그람음성의 단간균이 검출되었고 생화학적 시험측정 결과 분리균은 Aeromonas sobria로 판명되었다. 분리균과 A. sobria가 소유한 aerolysine 유전자 일치 여부를 분석한 결과 같은 유전자를 가지고 있음이 판명되었다. 분리균을 미꾸라지에 농도별로 복강주사 한 결과 자연발생어의 증상과 일치하였다. 그럼으로 A. sobria는 양식 미꾸라지의 새로운 세균성 질병의 원인균이 될 가능성이 높다고 판단된다.
Single spore isolates of Plasmodiophora brassicae e4 and e9 obtained from diseased Chinese cabbage were identified as race 4 and race 9, respectively, by the Williams' differential variety set. To confirm the possibility of variation in same generation and progeny of a single spore isolate of P. brassicae, random amplified polymorphic DNA (RAPD) analysis was conducted using the URP 3, 6 and OPA 7 primers. There was no difference in band type at each part of the gall of Chinese cabbage obtained by inoculation of e4 and e9 and amplification using the URP 3 and 6 primers when the same generation was analyzed. In addition, the progeny analysis, which was expanded to the third generation and conducted using the URP 3 and OPA 7 primers, revealed no differences in the band type of the e4 isolate. Based on these results, the single spore isolate of P. brassicae was genetically stable.
An obligate methanol-oxidizing bacterium, Methylobacillus sp. strain SK1, which grows only on methanol was isolated from soil. The isolate was nonmotile Gram-negtive rod. It does not have internal membrane system. The colonies were small, whitish-yellow, and smooth. The guanine plus cytosine content of the DNA was 48 mol%. Cellular fatty acids consisted predominantly of large amounts of straight-chain saturated $C_{16:0}$ acid and unsaturated $C_{16:1}$ acid. The major ubiquinone was Q-8, and Q-10 was present as minor component. The cell was obligately aerobic and exhibited catalase, but no oxidase, activity. Poly-.betha.-hydroxybutyrate, endospores, or cysts were not observed. the isolate could grow only on methanol in mineral medium. Growth factors were not required. The isolate was unable to use methane, formaldehyde, formate, methylamine, and several other organic compounds tested as a sole source of carbon and energy. Growth was optimal at 35.deg.C and pH 7.5. It could not grow at 42.deg.C. The doubling time was 1.2h at 30.deg.C when grown with 1.0%(v/v) methanol. The growth was not affected by antibiotics inhibiting cell wall synthesis and carbon monoxide but was completely suppressed by those inhibiting protein synthesis. Methanol was found to be assimilated through the ribulose monophosphate pathway. Cytochromes of b-, c-, and o- types were found. Cell-free extracts contained a phenazine methosulfate-linked methanol dehydrogenase activity, which required ammonium ions as an activator. Cells harvested after the late exponential phase seemed to contain blue protein.ein.
Prevalence of tan spot of wheat caused by the fungus Pyrenophora tritici-repentis has become more prevalent in Oklahoma as no-till cultivation in wheat has increased. Hence, developing wheat varieties resistant to tan spot has been emphasized, and selecting pathogen isolates to screen for resistance to this disease is critical. Twelve isolates of P. tritici-repentis were used to inoculate 11 wheat cultivars in a greenhouse study in splitplot experiments. Virulence of isolates and cultivar resistance were measured in percent leaf area infection for all possible isolate x cultivar interactions. Isolates differed significantly (P < 0.01) in virulence on wheat cultivars, and cultivars differed significantly in disease reaction to isolates. Increased virulence of isolates detected increased variability in cultivar response (percent leaf area infection) (r = 0.56, P < 0.05) while increased susceptibility in cultivars detected increased variance in virulence of the isolates (r = 0.76, P < 0.01). A significant isolate × cultivar interaction indicated specificity between isolates and cultivars, however, cluster analysis indicated low to moderate physiological specialization. Similarity in wheat cultivars in response to pathogen isolates also was determined by cluster analysis. The use of diverse isolates of the fungus would facilitate evaluation of resistance in wheat cultivars to tan spot.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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