Background: Pseudotyped virus systems that incorporate viral proteins have been widely employed for the rapid determination of the effectiveness and neutralizing activity of drug and vaccine candidates in biosafety level 2 facilities. We report an efficient method for producing severe acute respiratory syndrome coronavirus 2 (SARS-CoV-2) pseudovirus with dual luciferase and fluorescent protein reporters. Moreover, using the established method, we also aimed to investigate whether Korean Red Ginseng (KRG), a valuable Korean herbal medicine, can attenuate infectivity of the pseudotyped virus. Methods: A pseudovirus of SARS-CoV-2 (SARS-2pv) was constructed and efficiently produced using lentivirus vector systems available in the public domain by the introduction of critical mutations in the cytoplasmic tail of the spike protein. KRG extract was dose-dependently treated to Calu-3 cells during SARS2-pv treatment to evaluate the protective activity against SARS-CoV-2. Results: The use of Calu-3 cells or the expression of angiotensin-converting enzyme 2 (ACE2) in HEK293T cells enabled SARS-2pv infection of host cells. Coexpression of transmembrane protease serine subtype 2 (TMPRSS2), which is the activator of spike protein, with ACE2 dramatically elevated luciferase activity, confirming the importance of the TMPRSS2-mediated pathway during SARS-CoV-2 entry. Our pseudovirus assay also revealed that KRG elicited resistance to SARS-CoV-2 infection in lung cells, suggesting its beneficial health effect. Conclusion: The method demonstrated the production of SARS-2pv for the analysis of vaccine or drug candidates. When KRG was assessed by the method, it protected host cells from coronavirus infection. Further studies will be followed for demonstrating this potential benefit.
The antifatigue and endurance promoting properties of two Korean medicinal herb extracts and molasses with various mineral components were studied by evaluating forced-swimming capacity and biochemical parameters in ICR mice. The treatment groups were orally administered mineral beverages which were contained 6% sugar with the mixture of Maesil (Prunus mume fruit) extracts, Omija (Schisandra chinensis fruit) extracts and molasses for 4 weeks. The exercised forced-swimming tests were conducted after 28 days of beverage supplementation. The swimming times to exhaustion were longer 1.5${\sim}$2 times in group 6 and group 10 than control goup (Control: 93.2${\pm}$10.4 sec; Beverage 6; 190.8${\pm}$25.6 sec, Beverage 10; 173.6${\pm}$21.8 sec; p<0.05). Moreover, the activity of hexokinase (Control: 5.23${\pm}$0.38 ${\mu}mol$l/g tissue; Beverage 6: 5.99${\pm}$0.18 ${\mu}mol$/g tissue, Beverage 10: 6.13${\pm}$0.25 ${\mu}mol$/g tissue, p<0.05) and citrate synthase (control: 42.9${\pm}$1.87 ${\mu}mol$/g tissue; Beverage 6: 56.8${\pm}$3.98 ${\mu}mol$/g tissue, Beverage 10; 59.5${\pm}$3.09 ${\mu}mol$/g tissue, p<0.05) were also significantly higher than those of control group. Even if the treatment groups had long swimming than control group, there is no significant difference in the glycogen contents of gastrocnemus muscle or liver between the control group and each treatment group. This demonstrated an improvement in endurance. These results suggest that reported herbal beverage is very effective to combat fatigue, improve endurance and increase overall physical activity.
This study was performed in order to investigate the antioxidant properties of hot water extract from the root and aerial part of the Syneilesis palmata in respect to its potential use as food, cosmetics material, or medicinal resource. The results showed that the S. palmata root hot water extract (RHW) possessed a higher content of total flavonoid compounds (4.58 mg/g) and total polyphenol compounds (59.11 mg/g). The SOD-like activities of the RHW and APHW were 23.74% and 21.61%, respectively, at a concentration $2,000{\mu}g/mL$. In the nitrite scavenging ability of a $2,000{\mu}g/mL$ concentration, the RHW showed 63.06% (pH 1.2) and 47.16% (pH 3.0). The $IC_{50}$ values of the nitrite scavenging abilities were $99.93{\mu}g/mL$ (ascorbic acid), $1,150.85{\mu}g/mL$ (RHW), and $1,610.25{\mu}g/mL$ (APHW). The $IC_{50}$ values of DPPH free radical scavenging abilities were $99.87{\mu}g/mL$ (RHW) and $118.29{\mu}g/mL$ (APHW). The inhibition values ($IC_{50}$) of xanthine oxidase were $139.62{\mu}g/mL$ (RHW) and $111.11{\mu}g/mL$ (APHW). In all of the experiments, the S. palmata root hot water extracts have higher activities than the aerial hot water extract, except for the xanthine oxidase inhibitory activity. These results suggest that the S. palmata is a potentially useful antioxidant source for the development of functional nutraceuticals, cosmetics and medicine.
Kim, So Young;Kim, Jeong-Hwan;Kim, Sung Ok;Park, Seh-Kwang;Jeong, Ji-Won;Kim, Mi-Young;Lee, Hyesook;Cheong, JaeHun;Choi, Yung Hyun
Journal of Life Science
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v.29
no.11
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pp.1273-1280
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2019
Age-related macular degeneration (AMD) is one of the leading causes of blindness in the elderly population, and damage to retinal pigment epithelial (RPE) cells due to oxidative stress contributes to the development of AMD. Glycyrrhiza uralensis Fischer is one of the most widely used herbal medicines for the treatment of various diseases in Asian countries. Although recent studies indicated that treatment with G. uralensis can protect cells from oxidative stress, its mechanisms in RPE cells remain unknown. We evaluated the effect of a G. uralensis ethanol extract (GU) on $H_2O_2$-induced oxidative injury in ARPE-19 RPE cells. The GU pretreatment attenuated reactive oxygen species (ROS) generation induced by $H_2O_2$, which was associated with induced expression of nuclear factor erythroid-derived-2-like 2 (Nrf2) and heme oxygenase-1 (HO-1). GU also suppressed $H_2O_2$-induced DNA damage and mitochondrial dysfunction. The inhibitory effect of GU on $H_2O_2$-induced apoptosis was associated with the protection of caspase-3 activation. Overall, GU appeared to protect RPE cells from oxidative injury by inhibiting DNA damage and reducing apoptosis. Further studies are needed to determine the regulation of Nrf2-mediated HO-1 expression, but our results suggest the possibility of using GU to reduce the risk of AMD.
Kim, Hee-Yeon;Nam, Woong-Shik;Kim, Seong-Hee;Jang, Hye-Ryang;Lee, Mi-Kyoung;Kim, Tae-Wan;Lee, Sang-Kyu
Journal of Life Science
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v.22
no.8
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pp.991-998
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2012
Ginseng is one of the most commonly used herbal medicines and health foods. Korean red ginseng (KRG; Panax ginseng C.A. Meyer) extract is known to have potential therapeutic activities, such as anti-viral effects, the amelioration of food allergies, anti-oxidant effects, and obesity reduction. Nevertheless, no reports have been issued the modulatory effects of KRG extract on the activity of cytochrome P450 (CYP). In the present study, we investigated the modulatory effect of KRG extract in vitro and in vivo by using pooled human liver microsomes and male ICR mice. When human liver microsomes were incubated with KRG extract at 0.01-10 mg/ml, CYP1A2, 2B6, 2C19, 2D6, and 3A were not significantly inhibited by KRG extract, although CYP2B6 was slightly inhibited. Mice were orally administered KRG extract at 50, 250, or 500 mg/kg daily for 3, 7, or 14 days. However, the activities of CYPs in mouse livers were not significantly different from those of vehicle-treated controls. In conclusion, no significant ginseng-drug interaction was observed. KRG extract did not significantly modulate the activities of CYPs in vitro or in vivo.
Alcohol-induced fatty liver (steatosis) results from excessive generation of reducing equivalents by ethanol metabolism. Generally, chronic ethanol treatment causes hepatosteatosis by regulating sterol regulatory element-binding protein 1c (SREBP-1c), which increases the synthesis of hepatic lipids. The effect of ethanol on SREBP-1c is mediated through mammalian sirtuin-1 (SIRT-1), a NAD+-dependent protein deacetylase that regulates hepatic lipid metabolism. Ginseng is a widely used herbal medicine that is used in Asia for its anti-diabetes and anti-obesity effects. The pharmacological and therapeutic effects of ginseng are primarily produced by bioactive constituents known as ginsenosides. Here, we examined the regulatory effects of Korean red ginseng (KRG) extracts on SREBP-1c and SIRT-1 on lipid homeostasis in AML-12 mouse hepatocytes. AML-12 cells were treated with ethanol and/or KRG extracts (0 - 1,000 μg/ml). Lipid droplets were assayed using Oil red O staining, and western blotting was used to measure SIRT-1 and SREBP-1 expression. Treatment with KRG extracts restored SIRT-1 expression and reduced SREBP-1c expression in ethanol-treated cells. We also showed that KRG extract and ginsenosides Rb2 and Rd significantly decreased SREBP-1 acetylation in ethanol-treated cells. These results show that treatment with KRG extract and its active ginsenoside constituents Rb2 and Rd protected against alcohol-related hepatosteatosis via regulation of SIRT-1 and downstream acetylation of SREBP-1c, which altered hepatic lipid metabolism.
Kwon, Hyuk-Woo;Shin, Jung-Hae;Cho, Hyun-Jeong;Rhee, Man Hee;Park, Hwa-Jin
Journal of Ginseng Research
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v.40
no.1
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pp.76-85
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2016
Background: Binding of adhesive proteins (i.e., fibrinogen, fibronectin, vitronectin) to platelet integrin glycoprotein IIb/IIIa (${\alpha}IIb/{\beta}3$) by various agonists (thrombin, collagen, adenosine diphosphate) involve in strength of thrombus. This study was carried out to evaluate the antiplatelet effect of total saponin from Korean Red Ginseng (KRG-TS) by investigating whether KRG-TS inhibits thrombin-induced binding of fibrinogen and fibronectin to ${\alpha}IIb/{\beta}3$. Methods: We investigated the effect of KRG-TS on phosphorylation of vasodilator-stimulated phosphoprotein (VASP) and dephosphorylation of phosphatidylinositol 3-kinase (PI3K) and Akt, affecting binding of fibrinogen and fibronectin to ${\alpha}IIb/{\beta}3$, and clot retraction. Results: KRG-TS had an antiplatelet effect by inhibiting the binding of fibrinogen and fibronectin to ${\alpha}IIb/{\beta}3$ via phosphorylation of VASP ($Ser^{157}$), and dephosphorylation of PI3K and Akt on thrombin-induced platelet aggregation. Moreover, A-kinase inhibitor Rp-8-Br-cyclic adenosine monophosphates (cAMPs) reduced KRG-TS-increased VASP ($Ser^{157}$) phosphorylation, and increased KRG-TS-inhibited fibrinogen-, and fibronectin-binding to ${\alpha}IIb/{\beta}3$. These findings indicate that KRG-TS interferes with the binding of fibrinogen and fibronectin to ${\alpha}IIb/{\beta}3$ via cAMP-dependent phosphorylation of VASP ($Ser^{157}$). In addition, KRG-TS decreased the rate of clot retraction, reflecting inhibition of ${\alpha}IIb/{\beta}3$ activation. In this study, we clarified ginsenoside Ro (G-Ro) in KRG-TS inhibited thrombin-induced platelet aggregation via both inhibition of $[Ca^{2+}]_i$ mobilization and increase of cAMP production. Conclusion: These results strongly indicate that KRG-TS is a beneficial herbal substance inhibiting fibrinogen-, and fibronectin-binding to ${\alpha}IIb/{\beta}3$, and clot retraction, and may prevent platelet ${\alpha}IIb/{\beta}3$-mediated thrombotic disease. In addition, we demonstrate that G-Ro is a novel compound with antiplatelet characteristics of KRG-TS.
Kang, Man Jung;Sundan, Suresh;Lee, Gi An;Ko, Ho Cheol;Chung, Jong Wook;Huh, Yun Chan;Gwag, Jae Gyun;Oh, Se Jong;Kim, Yeon Gyu;Cho, Gyu Taek
Korean Journal of Plant Resources
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v.26
no.3
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pp.362-369
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2013
Agastache rugosa, a member of the mint family (Labiatae), is a perennial herb widely distributed in East Asian countries. It is used in traditional medicine for the treatment of cholera, vomiting, and miasma. This study assessed the genetic diversity and population structures on 65 accessions of Korean mint A. rugosa germplasm based on inter simple sequence repeat (ISSR) markers. The selected nine ISSR primers produced reproducible polymorphic banding patterns. In total, 126 bands were scored; 119 (94.4%) were polymorphic. The number of bands generated per primer varied from 7 to 18. A minimum of seven bands was generated by primer 874, while a maximum of 18 bands was generated by the primer 844. Six primers (815, 826, 835, 844, 868, and 874) generated 100% polymorphic bands. This was supported by other parameters such as total gene diversity ($H_T$) values, which ranged from 0.112 to 0.330 with a mean of 0.218. The effective number of alleles ($N_E$) ranged from 1.174 to 1.486 with a mean value of 1.351. Nei's genetic diversity (H) mean value was 0.218, and Shannon's information index (I) mean value was 0.343. The high values for total gene diversity, effective number of alleles, Nei's genetic diversity, and Shannon's information index indicated substantial variations within the population. Cluster analysis showed characteristic grouping, which is not in accordance with their geographical affiliation. The implications of the results of this study in developing a strategy for the conservation and breeding of A. rugosa and other medicinal plant germplasm are discussed.
It is believed that traditional Korean medicines can be managed more scientifically through the development of logical criteria to verify their region of cultivation, and that this could contribute to the advancement of the traditional herbal medicine industry. This study attempted to determine such criteria for Sansuyu. The volatile compounds were obtained from 20 samples of domestic Corni fructus (Sansuyu) and 45 samples of Chinese Sansuyu by steam distillation. The metabolites were identified in the NIST Mass Spectral Library via the obtained gas chromatography/mass spectrometer (GC/MS) data of 53 training samples. Data binning at 0.2 min intervals was performed to normalize the number of variables used in the statistical analysis. Multivariate statistical analyses, such as principle component analysis (PCA), partial least squares-discriminant analysis (PLS-DA), and orthogonal partial least squares-discriminant analysis (OPLS-DA) were performed using the SIMCA-P software package. Significant variables with a variable importance in the projection (VIP) score higher than 1.0 were obtained from OPLS-DA, and variables that resulted in a p-value of less than 0.05 through one-way ANOVA were selected to verify the marker compounds. Finally, among the 11 variables extracted, 1-ethylbutyl-hydroperoxide (9.089 min), nonadecane (20.170 min), butylated hydroxytoluene (25.319 min), 5β,7βH,10α-eudesm-11-en-1α-ol (25.921 min), 7,9-bis(2-methyl-2-propanyl)-1-oxaspiro[4.5]deca-6,9-diene-2,8-dione (34.257 min), and 2-decyldodecyl-benzene (54.717 min) were selected as markers to indicate the origin of Sansuyu. The statistical model developed was suitable for the determination of the geographical origin of Sansuyu. The cultivation areas of four Korean and eight Chinese Sansuyu samples were predicted via the established OPLS-DA model, and it was confirmed that 11 of the 12 samples were accurately classified.
The purpose of this study was to evaluate of quality variation of Sibujeondaebotang according to storage period and temperature (5 and $25^{\circ}C$) Identificaion test, pH, specific gravity, heavy metal, microbial limit test and glycyrrhizic acid, paeoniflorin content of Sibjeondaebotang were performed during 12 months. The significant change was not shown on identificaion test, specific gravity, microbial limit test under long term storage and the result suited a safe level standards of 'Korean National Standard of Traditional Medicinal (Herbal and Botanical) Materials - "Sibjeondaebotang"'. The test of pH showed meaningful changes between two storage temperature (5 and $25^{\circ}C$) according to increasing storage period. The contents of glycyrrhizic acid and paeoniflorin had no relation with storage temperature($5^{\circ}C$, $25^{\circ}C$) but it showed a tendency to decrease according to the length of storage period. We predicted shelf-life of glycyrrhizic acid and paeoniflorin at storgae temperature(5 and $25^{\circ}C$) as about 6 and 3 months, respecttively. Therefore considering glycyrrhizic acid and paeoniflorin, sibjeondaebotang is determined to be in good condition within 3 months, regardless of the room temperature and refrigerated temperature. We were expected to serve as a basis for the guideline of medication counseling sibjeondaebotang.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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