2-Hydroxy-6-oxo-6phenylhexa-2,4-dienoate (HOPDA) hydrolase catalyzes the hydrolytic cleavage of HOPDA to bemzpate and 2-hydroxypenta-2, 4-dienoate (HPD) during microbial catabolism of biphenyl and polychlorinated biphenyls. A HOPDA hydrolase gene (pcbD) was isolated from the genomic library of Pseudomonas sp. P20 and designated as pCNUO1201; a 7.5-kb XbaI DNA fragment from Pseudomonas sp. P20 was inserted into the pBluescript SK(+) XbaI site. E. coli HB101 harboring pCNU1201 exhibited HOPDA hydrolase activity. The open reading frame (ORF) corresponding to the pcbD gene consisted of 855 base pairs with an ATG initiation codon and a TGA termination codon. The ORF was preceded by a rebosome-binding sequence of 5'-TGGAGC-3' and its G+C content was 55 mol%. The pcbD gene of Pseudomonas sp. P20 was located immedeately downstream of the pcbC gene encoding 2,3- dihydroxybiphenyl 1,2-dioxygenase, and approximately 4-kb upstream of the pcbE gene encoding HPD hydratase. The pcbK gene was able to encode a polypeptide with a molecular weight of 31,732 containing 284 amino acid residues. The deduced amino acid sequence of the HOPDA hydrolase of Pseudomonas sp. P20 exhibited high identity (62%) with those of the HOPDA hydrolases of P. putida KF715, P. pseudoalcaligenes KF707, and Burkholderia cepacia LB400, and also significant homology with those of other hydrolytic enzymes including esterase, transferase, and peptidase.
Park, Sang-koo;Son, Won-geun;Lee, Hu-jang;Kim, Young-hwan;Kang, Ho-jo
Korean Journal of Veterinary Research
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v.44
no.1
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pp.89-98
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2004
This study was carried out to investigate the serotype, and antimicrobial susceptibility and analyze the plasmid profile for the 145 isolates of L. monocytogenes isolated from livestock products and these product processing plants in Gyeongnam, Korea. All of L. monocytogenes strains belonged to serotype 1/2b (57.9%), 1/2a (20.0%), 4b (11.4%), 1/2c, 3b, 4c (each 2.9%) and 4d (0.7%). Serotype 1/2b, 1/2a, 4b from each source were found predominantly. Serotype 1/2b was predominantly higher than other serotype, and there was no significant difference between serotypes isolated from livestock products and product processing plants. 4b was major serotype isolated from raw milk and pork, and serotypes isolated from beef, chickens and slaughterhouse were 1/2b and 1/2a. The susceptibility of 145 strains of L. monocytogenes to 14 antibiotics commonly used in veterinary and human therapy was determined by disk diffusion method. All of L. monocytogenes strains were susceptible to amikacin, ampicillin, cephalothin, chloramphenicol, gentamicin, kanamycin, neomycin and penicillin. L. monocytogenes strains had the highest resistance with colistin (100%), oxytetracycline (44.8%), tetracycline (43.4%) followed by erythromycin (2.8%), spectinomycin (1.4%) and streptomycin (0.7%). Tetracycline resistance, and serotype distribution of the isolates from sample sources were significantly different. Resistance to at least one antibiotic was observed in all of them and 7 different resistant profiles were recorded. The most common resistance pattern were CL-OTC-TC (colistin-oxytetracycline-tetracycline) (42.8%). Among all tested isolates, two different plasmid profiles were observed. Of the 97 examined strains, 14 (14.4%) contained either the 8 and 11 kb plasmid or the 11 kb.
Kim, You Geun;Pham, Diep Ngoc;Lee, Yeong Hun;Jo, Ji Joong;Choe, Eun Yong;Lee, Young Hyeon;Kim, Sung Bae;Kim, Chang-Joon
Clean Technology
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v.23
no.4
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pp.401-407
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2017
This paper describes a shake-flask fermentation of Acacia flower producing whitening- and antioxidant- agents. Tyrosinase activity was inhibited in the presence of traditional and flask-fermentation broths whereas no inhibitory effect of flower extract was observed. Tyrosinase inhibition was 40% in the presence of solution containing 10% of extract from fermentation broth and it increased by increase in the concentration of it. Arbutin ($20mg\;mL^{-1}$) and kojic acid ($80{\mu}g\;mL^{-1}$) gave 90% and 58% inhibition, respectively. The result indicates that whitening activity of 40% extract solution was comparable to that of kojic acid ($80{\mu}g\;mL^{-1}$). The comparable antioxidant activity was observed for 60% extract and $10mg\;mL^{-1}$ vitamin solution. No noticeable toxicity was observed with extract. The physicochemical stability of fermentation supernatant was observed at room temperature storage condition. The result clearly shows that shake-flask fermentation of Acacia flower produced whitening agent for functional cosmetics.
A series of organic-inorganic hybrids, PCL/EP/$SiO_2$, involving epoxy resin and triethoxysilane-terminated polycaprolactone elastomer (PCL-TESi) were prepared via polymerization of diglycidyl ether of bisphenol A (DGEBA) with amine curing agent KB-2 and sol-gel process of PCL-TESi. The curing reactions were started from the initially homogeneous mixture of DGEBA, KB-2 and the PCL-TESi. The organicinorganic hybrids containing up to 4.95% (wt) of $SiO_2$ were obtained and characterized by FT-IR, transmission electron microscopy (TEM), differential scanning calorimetry (DSC) and thermogravimetry analysis (TGA). It was experimentally shown that the swelling property in toluene, morphologies and thermal properties of the resulting hybrids were quite dependent on the contents of $SiO_2$. The crosslink network density decreases with increasing of the PCL-TESi. And in TEM, the phase separated morphology of these hybrids was found, which resulted from the coagulation of Si-O-Si networks resulting from $-Si(OC_2H_5)_3$ of PCL-TESi self-curing by hydrolytic silanol condensation, with the advancement of the curing reaction in the modified epoxy resin systems. Meanwhile, the change of the $SiO_2$ content made the morphologies changed from aggregated particles of Si-O-Si in the hybrid to nanocluster of interconnected Si-O-Si particles, then to aggregated Si-O-Si dispersing in the continuous cured epoxy phase again, and last to co-continuous interpenetrating network. The glass transition behavior of the hybrid material was cooperative motion of large chain segments, which were hindered by the inorganic Si-O-Si network. And in TG analysis, the characteristic temperature at 5% of weight loss was evidently increased from $120.5^{\circ}C$ of pure cured epoxy to $277.6^{\circ}C$ of 3.84% (wt) of $SiO_2$ modified epoxy due to the existence of Si-O-Si when PCL-TESi was added in the hybrid.
A new natural C-benzylated chalcone, $2',4'-dihydroxy-3'-(2-hydroxybenzyl)-6{\c}-methoxychalcone$ (2), along with two other flavonoids, tiliroside and kaempferol 3-O-rutinoside, and an oxoaporphine alkaloid, lanuginosine were isolated from the aerial parts of Ellipeiopsis cherrevensis (Annonaceae). Two known polyoxygenated cyclohexene derivatives, ferrudiol and zeylenol, and a new analog, ellipeiopsol D, were also isolated. The chalcone 2 exhibited cytotoxic activity against human small-cell lung-cancer (NCl-H187), epidermoid carcinoma (KB) and breast cancer (BC) cell lines with $IC_{50}$ values of 1.40, 5.31 and $13.92\;{\mu}g/mL$, respectively. This compound also showed antimalarial activity against Plasmodium falciparum with an $IC_{50}$ value of $7.1\;{\mu}g/mL$ as well as antimicrobacterial activity against Mycobacterium tuberculosis with a MIC of 25 mg/mL.
A mutant (HSMl) of Cryphonectria parasitica created during transformation reproduced the hypovirulent symptoms in virus-free wild type. Its phenomena have been proved with morphological marker such as reduced sporulation, pigmentation, and laccase production. In addition to the changes in phenotypic characteristics, down-regulations of Lac1, Crp1, Vir1 and Vir2 were also observed. The integration of transforming vector was confirmed and located within genome by marker rescuing. Vector integration occurred between two genes, Cpg2 and Cpg3, which resulted in the disruption of neither Cpg2 nor Cpg3. Both Cpg2 and Cpg3 genes, sized at 1.8 kb and 1.9 kb respectively, were rarely transcribed genes in Cryphonectria parasitica. Cpg2 expression was significantly overexpressed from 4 to 5 day old culture of both UEP1 and HSM1 while no differences were observed in Cpg3 expression. It appears that an aberration from the normal expression of Cpg2, not Cpg3, results in the hypovirulent symptoms in virus-free wild type.
pMB4 is a 2.4-kilobase plasmid of Staphylococcus aureus TR-1 that confers inducible resistance to the macrolide-lincosamide-streptogramin B(MLS) antibiotics. By subcloning studies, it was found that the MLS resistance determinant was located at 1.0Kb fragment between Sau3AI and TaqI sites. DNA sequence of the MLS resistant determinant, named ermC-4 was determined, and found to be highly homologous with that of ermC. Because the leader peptide sequence of ermC-4 was identical with that of ermC, the expression of the resistance gene is thought to be controlled by posttranscriptional attenuation in S. aureus TR-1.
This study was carried out to investigate the characteristics of root growth in Kentucky bluegrass sod(KBS) and creeping bentgrass sod(BGS) transplanted in summer(August 9) and fall(September 19), respectively. Hydroponic system was also used to observe rooting development in the study. Root development differed in KBS by transplanting time. It reached to more than 5 cm after 100 days In summer and 50 days in fall. However, BGS's root grew over 6cm after 40 days, regardless of the season. There was no significant differences in BGS, regardless of any cutting treatment. In the case of KBS, it was best with sod culled with 0.5cm deep and 1.5cm long. But it grew beyond 5 cm in root growth under any treatment after 40 days in transplanting. In a hydroponic study, BGS produced root over 100cm for 80 days through a summer season. However, the root of KBS did only grow in condition below $20^{\circ}C$. These results indicated that root growth characteristics were variable in BGS and KBS. It was considered that rooting development of BGS might be improved with sufficient irrigation in summer, and KBS grows well in lower temperature of $10{\sim}18^{\circ}C$, as compared with BGS. As to establishing the lawn with a sodding method, it should be careful in transplanting time, especially KBS.
Genetic determinant for the secondary metabolism was studied in heterologous expression in Streptomyces lividans TK-24 using Streptomyces griseus ATCC 10137 as a donor strain. Chromosomal DNA of S. griseus was ligated into the high-copy number Streptomyces shuttle plasmid, pWHM3, and introduced into S. lividans TK-24. A plasmid clone with 4.3-kb BamHI DNA of S. griseus (pMJJ201) was isolated by detecting for stimulatory effect on actinorhodin production by visual inspection. The 4.3-kb BamHI DNA was cloned into pWHM3 under the control of the strong constitutive ermEp promoter in both directions (pMJJ202); ermEp promoter-mediated transcription for coding sequence reading right to left: pMJJ203; ermEp promoter-mediated transcription for coding sequence reading left to right) and reintroduced into S. lividans TK-24. The production of actinorhodin was markedly stimulated due to introduction of pMJJ202 on regeneration agar. The introduction of pMJJ202 also stimulated production of actinorhodin and undecylproidigiosin in submerged culture employing the actinorhodin production medium. Introduction of pMJJ203 resulted in a marked decrease of production of the two pigments. Nucleotide sequence analysis of the 4.3-kb region revealed three coding sequences: two coding sequences reading left to right, ORF1 and ORF2, one coding sequence reading right to left, ORF3. Therefore, it was suggested that the ORF3 product was responsible for the stimulation of antibiotic production. The C-terminal region of ORF3 product showed a local alignment with Myb-related transcriptional factors, which implicated that the ORF3 product might be a novel DNA-binding protein related to the regulation of secondary metabolism in Streptomyces.
For the expression of CGTase gene(cgtS) kom Bacillus stearothemophilus NO2 in Saccharomyces cerevisiae, cgtS gene was subcloned into the Eschepichia coll-yeast shuttle vector, pVT103-U. The constructed plasmid, pVT-CGTS was introduced to 5. cemi-siae 2805 cell, and then the cgtS gene under the control of adhl promoter was successfully expressed in the yeast transformant and 87% of the total activity was detected into the fermentation medium. Therefore, the signal peptide of B. stearothemephilus NO2 CeTase showed high secretion efficiency in 5. cerevisiae. Optimal conditions of the recombinant yeast cell f3r expression of CGTase was achieved, when 5. cerevisiae 2805/pv7-CGTS was cultivated on YP medium at 2% dextrose, pH 5.5,$30^{\circ}C$ and the expression level of CGTase was 0.624units/mL for 48 h culture.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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