Lactadherin은 모유의 유지방구막의 당단백질의 하나로 mucin, butyrophilin과 결합된 복합체이다. 특히 모유중의 mucin과 lactadherin은 출생 직후 면역력이 약한 유아를 병균의 침입으로부터 효율적으로 방어하여 초기 유아의 생존과 성장 및 발달에 매우 중요한 역할을 수행한다. Lactadherin은 유아 설사의 원인이 되는 rotavirus의 번식과 성장을 억제한다. 아울러 이 단백질은 새로운 혈관의 형성을 촉진하는 주요한 단백질로 알려져 있으며, 이 단백질의 결핍이 치매의 발생과 관련되는 것으로 보고되고 있다. 본 연구는 이처럼 중요성이 강조되는 lactadherin에 대한 생화학적 및 생리학적인 연구를 하기 위한 기초연구를 진행하였다. 한국 여성의 유선조직에서 mRNA를 분리하였고, 1.2 kb lactadherin cDNA 유전자를 cloning하여 염기서열과 아미노산 배열을 결정하였다. 이 cDNA를 pET vector에 삽입하여 E. coli에서 43 kD 단백질을 발현시켰으며 Western blot으로 확인하였으며, 이 단백질을 정제하여 토끼에서 항체를 생산하여, 한국 여성의 모유에서 발현되는 70, 55, 46, 30 kD의 band를 확인하였다. 아울러 백인 여성의 lactadherin 유전자와 한국 여성의 정상 및 유방암 조직의 유전자 비교에서 다양한 SNP가 관찰되었고 변이의 다형성이 관찰되었다.
호열균 B. stearotheymophilus으로부터 단백질 고차구조 형성을 촉진하는 내열성 PPIase를 정제하기 위해, 이 균체를 대량으로 배양 집균, 파쇄하여 효소활성을 측정하였다. 효소의 활성측정은 N-succinyl-Ala-Ala-Pro-Phe-p-nitroanilide(pAN)를 기질로 사용하였다. chymotrypsin은 기질 이성체(cis-trans 형)의 한쪽(trans)만을 특이적으로 분해하는 반응을 이용하여 PPIase 활성을 측정하였다. 호열균 추출시료로 부터 효소활성을 확인한 후, DEAE-sepharose CL-6B, Sephadex G-75로 정제 후, 최종적으로 Superose TM-12 (FPLC) gel-필트레이션으로 분자량 18kDa의 본 효소를 정제하였다. 정제한 효소의 화학적 특징을 조사한 결과 pH 7.5~8.0사이에 안정하였으며, 최적 pH는 8.0으로 나타났다. 그리고 $65^{\circ}C$에 30분간 열처리 후, 효소활성을 측정한 결과 50%이상의 잔존 활성을 갖는 내열성 효소임을 확인하였다. 정제 단백질의 N-말단 아미노산 분석은 Edman 분해법으로 39 아미노산 잔기를 결정하였다. 그리고 PPIase의 재구성(refolding) 반응은, 요소로 변성시킨 기질 RNase 1을 이용하여 이 단백질의 재구성 (refolding) 실험을 조사한 결과, PPIase는 변성 기질 RNase 1의 재구성(refolding)을 촉진하는데 높은 효과를 가지고 있었다. 호열균 유전자 라이브러리로부터 PPIase 유전자 약 3kb을 클로닝하였다. 재조합 플라스미드 cPI-40에서 프라이머(A-1, B-2)를 이용하여 PPIase N-말단을 코드하는 유전자를 PCR법으로 증폭하여, 염기배열을 결정한 결과 증폭된 단편은 165염기로 형성된 55 아미노산 잔기를 코드하는 open reading frame(ORF)가 연속되고 있었다. 그리고 Edman법으로 결정한 PPIase의 39아미노산 잔기가 이 배열내에 완전히 보존되어 있었다. 이 결과로부터 이 ORF는PPIase구조 유전자의 1/3에 해당하는 단편임을 확인하였다.
자연계로부터 식물병원균인 Pseudomonas syringae pv. Tabaci에 감염하는 bacteriophage 를 분리하였다. 이 phage의 안정성을 조사한 결과 중성 부근 pH에서 가장 안정하였고 50${\circ}C$ 이상에서는 안정성이 급격히 감소하였으며 흡착시간 별로는 10분까지는 빠른 흡착율을 보이다가 그 후부터는 서서히 감소하였다. 또한 흡착에는 금속이온을 필요로 하였으며 흡착온도는 20${\circ}C$에서 가장 높게 나타났고 20~40분에서 가장 높게 나타났다. 또한 배양온도에 따라 plaque 양상이 달랐는데 10${\circ}C$에서는 clear plaque를, 20, 30${\circ}C$에서는 turbid plaque를 형성하였다. 20${\circ}C$에서 잠복기는 약 3시간이었고 평균 방출수는 200PFU/cell이었다. 유전물질로는 ds DNA를 가지고 있었고 크기는 30kb 정도이었다.
Streptomyces setonii (ATCC 39116) is a Gram-positive thermophilic soil actinomycetes capable of degrading single aromatic compounds including phenol and benzoate via ortho-cleavage pathway. we isolated approximately 6.3-kb S. setonii DNA fragment containing a thermophilic catechol 1,2-dioxygenase(C12O) gene. Here we further revealed that the 6.3-kb S. setonii DNA fragment was organized into two putative divergently-transcribed clusters with 6 complete and one incomplete open reading frames (ORFs). The first cluster with 3 ORFs showed significant homologies to previously known benA, benB, and benC, implying a part of benzoate catabolic operon. The second cluster revealed an ortho-cleavage catechol catabolic operon with three translationally-coupled ORFs (catR, catB, catA). Each of these individually-cloned ORFs was expressed in E. coli and identified as a distinct protein band with a theoretical molecular weight in SDS-PAGE. The expression of the cloned S. setonii catechol operon was induced in a heterologous S. lividans by specific single aromatic compounds including catechol, phenol, and 4-chlorophenol. The simitar induction pattern was also observed using a luciferase gene-fused reporter system, implying that S. setonii employs an inducer-specific regulatory mechanism for aromatic compound metabolism.
The high-P metamorphic belt in central China, between the Sino-Korean and the Yangtze continental plates, is composed of the low-T and high-P metamorphic belt on the south and the high-T and high-P metamorphic belt on the north. The low-T and high-P metamorphic belt consists predominantly of bimodal metamorphic volcano-sedimentary sequences of Middle to Upper Proterozoic, characterized by the occurrences of blueschists, which have undergone a progressive metamorphism from blueschist through greenschist to epidote amphibolite facies with metamorphic conditions of 7~14 kb and 350~$560^{\circ}C$. The high-T and high-P and high-P metamorphic belt mainly consists of the Upper Archean to Lower Proterozoic crystalline basement characterized by the aboundant occurrences of eclogites formed at 12~28 kb and 620~$840^{\circ}C$. The formation of high-P metamorphic belt is related to the collision between the Sino-Korean and the Yangtze continental plates during Indosinian orogeny. The two belts may extend to central Korean Peninsula correlating respectively to the Okchon belt and the Kyonggi massif based on comparative studies of geography, tectonics and petrology. Therefore, much attention should be paid to search for such high-P metamorphic rocks as blueschists or eclogites in those two areas, which can play a key role for understanding the tectonic evolution of the Korean Peninsula.
Oh In Kio;Lee Hyun Ok;Ahn Jong Woong;Kim Hyung Min;Shin Ji Hee;Lim Jin A;Chun Hyun Ja;Baek Seung Hwa
동의생리병리학회지
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제16권6호
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pp.1270-1276
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2002
Compounds 1 - 12 were tested for their growth inhibitory effects against tumor cell lines using two different 3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyl-2H-tetrazolium bromide (MTT) and sulforhodamine B protein (SRB) assays and antimicrobial activity. The cytotoxic activity of methyl-4-[{(2E)-3,7-dimethyl-2,6-octadienyl}oxy]-3-methoxy benzoate (1) exhibit more active than that of 5-fluorouracil (11) on human oral epithelioid carcinoma (KB, ATCC No. OCL 17) cell lines. But this compound (1) on human skin melanoma (SK-MEL-3, HBT 69) cell lines shows less active than that of adriamycin (12). However, compound 9 showed the antimicrobial activity against S. epidermidis (MIC, 15.625 ㎍/㎖), S. aureus, C. albicans (MIC, 31.25 ㎍/㎖), S. mutans, S. typhimurium, P. putida (MIC. 125 ㎍/㎖) and P. aeruginosa (MIC, 500 ㎍/㎖).
경기육괴의 남서부에 해당하며 옥천구조대의 북쪽에 위치한 백동-홍성 일대의 충청남도 일원에는 선캠브리아기의 편마암복합체내에 초염기성암체들이 소규모 렌즈상의 암체로 이 지역에 우세한 구조선 방향인 북북동 방향으로 배열되어 산출된다. 이들 초염기성암채들이 조산대에 형성되는 알파인형이며 전형적인 상부 맨틀기원의 암석이 부분용융된 맨틀 잔여물로서 지표로의 이동과정에서 변성작용을 받아 대부분은 사문석화 혹은 활석화된 것으로 보고되어 있다. 본 연구의 주대상인 변성염기성암을 포함하는 백동지역의 초염기성암은 홍성도폭내 덕정리 편암암체 내에 주변 편마암체와 단층으로 접하면서 나타난다. 덕정리 편마암체는 주로 각섬석 화강편마암으로 구성되어있다. 백동지역의 초염기성암내에는 변성염기성암이 층상으로 협재되어 나타난다. 이들 변성염기성암은 석류석, 단사휘석, 각섬석, 사장석으로 주로 이루어진 석류석 각섬암이며 금홍석도 포함하고 있다. 많은 석류석 주변에는 사장석과 각섬석으로 이루어진 심플렉타이트가 발달되어있다. 석류석 각섬암내 심플렉타이트가 형성되지 않은 석류석 가장자리로부터 계산된 변성 온도-압력 조건은 590-72$0^{\circ}C$, 9-l0kb이며 심플렉타이트가 잘 형성된 석류석 주변부로부터는 490-$600^{\circ}C$, 4-6.3kb의 변성 온도-압력 조건이 계산되었다. 이에 반해 변성염기성암을 포함한 초염기성암체 주변에 나타나는 석류석-각섬석 화강편마암으로 부터는 570-78$0^{\circ}C$, 11.6-l6kb의 변성 온도-압력 조건을 얻었다. 석류석 각섬암에서 석류석내에 포획물로 나타나는 휘석(Xjd, 4-11)이 기질에 나타나는 휘석(Xid, 1-6)보다 높은 제이다이트 성분을 갖는다. 이는 석류석 중심부가 석류석 주변부보다 변성압력 조건이 높았을 가능성을 지시한다. 즉 연구지역의 석류석 각섬암은 주변의 각섬석 화강편마암과 같이 에콜로자이트상-상부각섬암상-고압백립암상의 점이대에 해당하는 변성작용을 받은후 초염기성암의 사문암화 작용시기에 1차 후퇴변성작용을 그리고 그후의 활석화 시기에 심플렉타이트를 형성하는 2차 후퇴변성작용을 받았다. 이러한 후퇴변성작용시기에 많은 유체가 침입하였고 그 결과 초염기성암내의 변성염기성암이 주변 화강편마암보다 후퇴변성작용을 강하게 받았을 것으로 예상된다. 변성염기성암의 변성연대를 구하기 위해 두 석류석 각석암 시료에 대해 석류석-전암 Sm-Nd 등시선 연령을 구하였다. 두 개의 석류석 각섬암으로부터 계산된 전암-석류석 연령은 297.9$\pm$5.7(2$\sigma$)Ma 그리고 268.7$\pm$3.3(2$\sigma$)Ma를 나타낸다. 석류석의 Sm-Nd 폐쇄온도가 700-75$0^{\circ}C$임을 고려할 때 두 석류석 각섬암으로부터 계산된 연대는 최고 변성작용 혹은 초기 냉각 시기를 지시할 가능성이 높다. 한편 전암의 두 동위원소 자료로부터 계산된 전암의 연령은 408Ma이다. 이러한 연구 결과는 연구지역의 석류석 각섬암이 시루리아기 후기 혹은 데본기 초기에 관입 후 석탄기 후기에서 페름기 중기에 주변 화강편마암과 함께 섭입작용을 받았을 가능성을 지시한다.
At the present study, it was aimed to explore the molecular genetic characterization of multiple antimicrobial resistant Salmonella spp. isolates from pigs and cattle. A total of 138 Salmonella Typhimurium (S. Typhimurium) isolates were typed with phage, among them, 83.3% of S. Typhimurium tested could divide into a 10 phage types. Definitive type 193 (DT193) (25.4%) and DT195 (24.6%) were exhibited as the dominant types. DT104 and U302 were found from pigs and cattle. On the other hand, S. Enteritidis had 6 phage types, of them, phage type 21 (PT21) and PT11b were the popular types. In the plasmid profiles, 135 of S. Typhimurium isolates were exhibited 1 to 6 plasmid bands which molecular weight ranged from 90 to 2kb. 35 isolates (25.4%) harbored a 90kb plasmid which is thought to be the serotype specific virulence plasmid. Two of twenty five S. Enteritidis had common plasmids at 2 and 1.5kb. With multiplex polymerase chain reaction, virulence genes (invA and spvC) were detected from all Salmonella spp. from 167 of S. Typhimurium, S. Enteritidis and chloramphenicol resistant S. Schwarzengrund, but some drug resistant genes, such as PSE-1, cml/tetR and flo were not determined but other drug resistant genes, for example TEM and int were found. The detection rates of spvC, TEM and int gene was 35.3%, 29.3% and 72.5%, respectively. The TEM gene was highly popular in S. Typhimurium, which was detected from ampicillin and amoxicillin resistant strains as 95.9%. int gene was able to detect from all the isolates identified as multidrug resistsnt (MDR), particularly DT193 was thought as the most prevalent virulence and multidrug resistance isolate. The major plasmid profile and drug resistance pattern of DT193 were 90, 40, 10.5, 6.3, 3.0kb and ACCbDNaPSSuT, respectively. MDR was commonly found in other phage types, particularly DT104, U302 and DT203.
본 논문에서는 110nm eFlash 셀을 사용한 512Kb eFlash IP를 설계하였다. eFlash 셀의 프로그램, 지우기와 읽기 동작을 만족시키는 row 구동회로(CG/SL 구동회로), write BL 구동회로( write BL 스위치 회로와 PBL 스위치 선택 회로), read BL 스위치 회로와 read BL S/A 회로와 같은 eFlash 코어회로(Core circuit)를 제안하였다. 그리고 프로그램 모드에서 9.5V와 erase 모드에서 11.5V의 VPP(Boosted Voltage) 전압을 공급하는 VPP 전압 발생기회로는 기존의 단위 전하펌프 회로로 cross-coupled NMOS 트랜지스터를 사용하는 대신 body 전압을 ground에 연결된 12V NMOS 소자인 NMOS 프리차징 트랜지스터의 게이트 노드 전압을 부스팅하는 회로를 새롭게 제안하여 VPP 단위 전하펌프의 프리차징 노드를 정상적으로 VIN(Input Voltage) 전압으로 프리차징 시켜서 VPP 전하펌프 회로의 펌핑 전류를 증가시켰다. 펌핑 커패시터로는 PMOS 펌핑 커패시터에 비해 펌핑전류가 크고 레이아웃 면적이 작은 12V native NMOS 펌핑 커패시터를 사용하였다. 한편 110nm eFlash 공정을 기반으로 설계된 512Kb eFlash 메모리 IP의 레이아웃 면적은 $933.22{\mu}m{\times}925{\mu}m(=0.8632mm^2)$이다.
This study presents a linkage disequilibrium (LD) analysis and effective population size ($N_e$) for the entire Hanwoo Korean cattle genome, which is the first LD map and effective population size estimate ever calculated for this breed. A panel of 4,525 markers was used in the final LD analysis. The pairwise $r^2$ statistic of SNPs up to 50 Mb apart across the genome was estimated. A mean value of $r^2$ = 0.23 was observed in pairwise distances of <25 kb and dropped to 0.1 at 40 to 60 kb, which is similar to the average intermarker distance used in this study. The proportion of SNPs in useful LD ($r^2{\geq}0.25$) was 20% for the distance of 10 and 20 kb between SNPs. Analyses of past effective population size estimates based on direct estimates of recombination rates from SNP data demonstrated that a decline in effective population size to $N_e$ = 98.1 occurred up to three generations ago.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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