Yang, Sung-Su;Kim, Su-Gwan;Park, Byung-Sun;Go, Dae-San;Yu, Sun-Kyoung;Kim, Chun Sung;Kim, Jeongsun;Kim, Do Kyung
International Journal of Oral Biology
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제41권3호
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pp.105-111
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2016
${\beta}-carotene$ is present in carrots, pumpkins, and sweet potatoes. It suppresses many types of cancers by regulating cellular proliferation and apoptosis through a variety of mechanisms. However, the effects of ${\beta}-carotene$ on oral cancer cells have not been clearly established. The main goal of this study was to investigate the effects of ${\beta}-carotene$ on cell growth and apoptosis in oral cancer cells. Our results demonstrate that treatment with ${\beta}-carotene$ induced inhibition of cell growth, and that the effect was dependent on ${\beta}-carotene$ treatment time and concentration in KB cells. Furthermore, treatment with ${\beta}-carotene$ induced nuclear condensation and fragmentation in KB cells. ${\beta}-carotene$ promoted proteolytic cleavage of procaspase-3, -7, -8 and -9 with associated increases in the concentration of cleaved caspase-3, -7, -8 and -9. In addition, the level of cleaved PARP was increased by ${\beta}-carotene$ treatment in KB cells. These results suggest that ${\beta}-carotene$ can suppress cell growth and induce apoptosis in KB human oral cancer cells, and that it may have potential usefulness in anti-cancer drug discovery efforts.
Angelica decursiva has been used in Korean traditional medicine as an antitussive, an analgesic, an antipyretic and a cough remedy. However, its anti-cancer properties have not yet been well defined. In our current study, we report the cytotoxic activity and the mechanism of cell death induced by ethanol extracts of Angelica decursiva (EEAD) against the human oral cancer cell line, KB. Treatment of KB cells with EEAD induced apoptotic cell death in both a dose- and time-dependent manner as determined by MTT assay and DNA fragmentation. However, no cytotoxic effects of EEAD against human normal oral keratinocytes (HNOK) were evident. By western blot analysis, we found that apoptosis in KB cells is associated with a decrease in procaspase-7 and -9. In addition, the activation of caspase-7 was detectable in living KB cells by fluorescence microscopy. These results suggest that EEAD exhibits anti-cancer activity in KB cells via apoptosis and thus has potential as an anticancer agent in future drug development strategies.
까나리 액젓 부산물의 자원화를 위한 연구의 일환으로 까나리 액젓부산물을 건조, 분쇄하여 미생물 배지로의 활용 가능성을 조사하였다. 조사 균주로는 Escherichia coli$(Gram^-)$, Bacillus subtilis$(Gram^+)$ 발광미생물인 Photobacterium phosphoreum을 이용하였으며, 기준 LB 배지와 비교 분석하였다. 일반적으로 까나리 액젓부산물 배지는 E. coli나 B. subtilis와 같은 미생물에 필요한 일부 성분이 LB 배지에 비해 부족함을 보였다. 탄소원은 까나리 부산물 자체에 충분한 것으로 나타났으며, growth factor yeast extract 0.5%를 까나리 액젓부산물배지에 첨가하거나, 단백질원인 0.5% peptone과 0.3%의 yeast extract 혼합물을 보강한 까나리 액젓 부산물배지에서는 LB 배지와 같은 세포증식을 보였으며 각 까나리 액젓부산물배지의 제조단가는 LB 배지 조성단가의 46%, 19% 정도로 매우 저렴하였다. 또한 P. phosphoreum은 까나리 부산물 배지에 염과 glycerol을 첨가한 결과 생체발광을 보였다. 따라서 폐기 처분되고 있는 까나리 액젓부산물을 미생물배지로의 자원화와 환경오염문제를 해결할 수 있는 가능성을 제시하였다.
루틴은 항발암, 소염제, 항바이러스성 기능을 갖는 물질이다. 미생물이 만들어낸 폴리에스테르인 PHBV와 루틴을 전기방사하여 나노섬유 부직포를 얻었다. 나노섬유 부직포의 항균성은 황색포도상구균(Staphylococcus aureus), 폐렴간균(Klebsiella pneumoniae)을 사용하여 평가하였고, KB 셀을 이용하여 세포독성을 평가하였다. 그 결과 루틴을 3 wt% 함유할 때 지지체는 우수한 항균성을 보였으며, KB 셀을 이용한 실험결과로부터 루틴을 함유하는 PHBV 지지체는 세포독성을 나타내지 않음을 알 수 있었다.
옥수수의 색소합성을 조절하는 pattern allele의 하나인 R-mb유전자의 구조와 유전적 분석을 수행하였다. R-mb 유전자의 유전분석을 수행한 결과를 검토하여 볼 때 후대로 진행됨에 따라 색소 발현빈도_의 감소경향을 보이고 있었다. 또한 R-mb 유전자가 몇 개의 R subcomplex로 존재하는가를 알기 위해서는 우선 R specific probe인 pR-nj:1를 이용하여 Southern blot hybridization을 실시한 결과 약 3.9kb 및 약 7.75kb영역에서 2개의 band가 관찰되었다. R-mb 유전자를 클로닝하기 위하여 λFIXIIvector를 이용하여 library를 만들고 이로부터 mb-II, III, V, Ⅵ, Ⅶ 등 5개의 clone을 3차의 screen을 거쳐 확보하고 이중 mb-II 및 mb-Ⅵ를 중심으로 제한효소지도를 작성하였으며, 이 유전자의 구조와 기타 R locus관련 유전자들과 비교하였으며, 이러한 두 개의 R 요소가 어떻게 색소발현에 영향을 미치는가에 대에 검토하였다.
본 연구는 출아형 효모 Saccharomyces cerevisiae에서 자외선의 상해 시 이를 정상으로 회복시키는 절제회복 (excision repair) 유전자로 알려진 RADA4의 특성 규명을 위하여 균류 Coprinus cinereus에서 이와 유사한 유전자를 분리하였다. RAD4 유사 유전자를 분리하기 위하여 균류 C. cinereus의 염색체 DNA를 전기영동하여 분리한 다음 효모 RAD4 DNA를 probe로하여 이와 hybridization하였다. 이 결과 RAD4 유사 유전자는 3.2 kb의 insert DNA를 갖고 있었다. 또한 Southern hybridization으로 이 유사 유전자는 fungus C. cinereus의 염색체에 존재함을 확인하였다. 분리한 RAD4 유사 유전자의 전사체 크기는 2.5 kb 였으며, 자외선의 상해 시 전혀 'inducibility가 없음을 Northern hybridization으로 확인하였다. 또한 유사유전자 부분을 삭제하였을 때 이 부분이 없는 세포는 전혀 생존을 못하였다. 이 결과 분리한 RAD4 유사유전자는 세포의 생존에 관여함을 알 수 있었다.
풍기일대 솝개산편마암복합체는 미그마타이트질 편마암, 반상변정질 편마암, 석류석 화강암질 편마암 그리고 흑운모 화강암질 편마암이 주를 이룬다. 변성염기성암들이 부우딘 또는 포획암으로 존재하며 석류석-사방휘석 백립암이 소규모로 나타난다. 이 지역은 앰피볼라이트상의 변성작용을 받은 북서에서 백립암상의 변성작용을 받은 남동으로 갈수록 변성도가 점진적으로 증가한다. 앰피볼라이트상의 대표 광물조합은 흑운모-백운모-K장성-사장석$\pm$석류석$\pm$녹염석이며 앰피볼라이트-백립암상 전이대는 침상 또는 섬유상을 보이는 규선석의 생성이 특징적이다. 백립암상의 변성작용을 받은 지역에서 석류석-사방휘석 백립암은 석류석-사방휘석-흑운모-사장석의 광물조합을, 변성염기성암은 단사휘석-사장석$\pm$각섬석$\pm$사방휘석$\pm$석류석의 광물조합을, 미그마타이트질 편마암은 석류석-흑운모-규선석-근청석$\pm$스피넬의 광물조합을 각각 보인다. 백립암상 변성작용이후 후퇴변성작용에 의해 미그마타이트질 편마암은 스피넬, 강옥, 홍주석 등을 생성하며 변성염기성암은 단사휘석과 사장석의 접합부에서 얇은 띠상의 석류석을 생성한다. TWEEQU에 의해 계산된 최대 변성온도-압력은 미그마타이트질 편마암에서 $916^{\circ}C$/6.6kb이며 석류석-사방휘석 백립암에서 $826^{\circ}C$/6.3kb이다. 백립암상의 전진변성과정을 지시하는 석류석 반상변정내에 포획된 사장석과 흑운모를 사용하여 구한 온도-압력은 $866^{\circ}C$/7.5kb이며 석류석의 가장자리와 그에 접하는 흑운모를 사용하여 구한 온도-압력은 $726^{\circ}C$/4.8kb로 온도와 압력이 감소하는 시계방향 압력-온도경로를 보인다. 미그마타이트질 편마암과 석류석 화강암질 편마암에서 석류석과 흑운모의 가장자리 조성을 사용하여 구한 온도들은 $556-741^{\circ}C$로 넓은 범위를 보여 백립암상의 변성작용이후 수회변성정도가 차이가 있었음을 지시한다. 흑운모 화강암질 편마암은 석류석의 산출이 적고 석류석의 스페서틴 함량이 높아 정확한 변성환경을 규명하기 힘들다. 단사휘석과 사장석사이에 띠상으로 나타나는 석류석을 함유하는 변성염기성암의 변성온도-압력은 $635-707^{\circ}C$/4.1-4.3kb이다. 이러한 구조는 퇴변성작용의 진화과정이 등압하 온도감소(IBC, isobaric cooling)환경을 거쳤음을 지시한다. 이상의 결과들은 풍기지역이 시계방향의 압력-온도 경로를 가지는 백립암상의 변성작용후에 IBC를 겪었음을 지시한다.
당귀의 품종과 수집종의 구분 수단으로 내추대성과 추대성 당귀의 구분과 수입 약재와 국산 약재를 건재로 혼용하여 사용하였을 때 기원 식물을 판별하기 위해 RAPD based primer를 선발하고자 PCR을 수행한 결과는 다음과 같다. 임의의 10-mer primer와 20-mer primer 등 총 72개의 primer를 사용하여 3개의 내추대성 특이적인 primer를 찾았는데, URP04 primer에서는 1.7 kb 부근에서 내추대성 특이적인 band가 나타났고, OPD11 primer에서는 1.2 kb 부근에 band가 없는 것이 내추대성으로 나타났으며, OPP09 primer에서는 1 kb 부근의 major band가 없고 1.2 kb와 0.8 kb부근에 band가 있는 만추당귀 특이적인 band pattern이 나타났다. 한편 OPC02 primer는 참당귀내에서 내추대성과 추대성 4집단 모든 sample에서 똑같은 band pattern을 보였던 primer로써, 이 primer를 사용하여 국내산 참당귀를 중국당귀, 일당귀와 판별할 수 있었고, OPD11과 OPP09 및 URP04 primer는 참당귀내에서 내추대성과 추대성을 구분 할 수 있었던 primer들로써 이들 primer로도 참당귀를 중국당귀, 일당귀와 판별할 수 있었다.
Shin, Chul Kyo;Sung Hwan Im;Woo Koo Kim;Kyung Bo Moon
Journal of Microbiology and Biotechnology
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제6권3호
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pp.219-220
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1996
The pKH2 isolated from the multidrug-resistant Staphylococcus aureus SA2 is a 40.98-kb plasmid and mediates resistance to ampicillin, clindamycin, erythromycin, kanamycin, and streptomycin. The 3.4-kb HindIII fragment conferring kanamycin resistance was cloned from the pKH2 into pBluescriptII $KS^+$ and partial sequence determination of that fragment was carried out. Sequence analysis revealed that the kanamycin resistance gene which encoded aminoglycoside 3'-phosphotransferase was linked to the streptothricin resistance gene. But a nonsense mutation was found in the streptothricin resistance gene and this mutation resulted in a truncated protein of streptothricin acetyltransferase. Homology comparison with nucleotide sequence databases revealed that the 3.4-kb HindIII fragment of pKH2 had been derived not from S. aureus but from Gram-negative Campylobacter coli.
Using yeast, Saccharomyces cerevisiae, and the integrate vector system, we have isolated and characterized an autonomously replicating sequence (ARS) from Aspergillus nidulans. The DNA fragment, designated ANR1, is 5.0 kb in size and maintained free from the chromosome in S. cerevisiae. The YIplac211-ANR1 recombinant plasmid, which consists of sequences derived from the yeast integrative vector YIplac211 and 5.0 kb ANR1 fragment, showed a 104-fold enhancement in transformation efficiency over that found for YIplac211, and was easily recovered from the transformed yeast. Genetic analysis of transformants showed that YIplac21-ANR1 could be over 96% cured when cultured over 20 generations in complete medium and thus suggests that this sequence is mitotically unstable. In A. nidulans, recombinant plasmid PILJ16-4.5 which carries the 4.5 kb EcoRI fragment of ANR1 showed a 170-fold enhancement in transformation efficiency compared to that of the integrative vector PILJ16.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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