목 적 : 지질 과산화의 주요 지표 중에 하나인 isoprostane($8-iso-PGF_{2{\alpha}}$)을 제대 동맥혈에서 측정하여 신생아에 산화손상을 유발 할 수 있는 주산기 위험인자 및 신생아기 주요 질환과의 관계를 규명하여, 제대 동맥혈 isoprostane이 신생아에서 산화손상의 지표로 사용할 수 있는지를 알아보고자 하였다. 방 법 : 2000년 6월부터 2001년 3월까지 단국대학교병원 신생아 중환자실 및 신생아실에 입원하였던 미숙아 33명과 만삭아 28명을 대상으로 제대 동맥혈에서 혈청을 분리하여 $-70^{\circ}C$에서 냉동 보관 후 isoprostane($8-iso-PGF_{2{\alpha}}$)과 malondialdehyde(MDA)를 측정하였다. 측정된 isoprostane과 MDA 농도를 미숙아와 만삭아에서 각각 비교하였고, 주산기-신생아기 위험인자와 주요 합병증과의 상관관계를 알아보았다. 결 과 : 평균 출생 체중은 미숙아 $1,771{\pm}445gm$, 만삭아 $3,200{\pm}567gm$이었고, 평균 재태 연령은 미숙아 $31.5{\pm}2.0$주, 만삭아 $39.0{\pm}2.0$주였다. 제대 동맥혈 isoprostane 농도는 미숙아 $704.7{\pm}635.6pg/mL$, 만삭아 $423.9{\pm}306.5pg/mL$로 미숙아에서 통계적으로 의미있게 높았으며(P<0.05), MDA도 미숙아 $44.0{\pm}22.9{\mu}M/L$, 만삭아 $28.2{\pm}10.7{\mu}M/L$로 미숙아에서 의미있게 높았다(P<0.05). 미숙아의 경우 isoprostane은 출생 후 24시간에 $478.6{\pm}580.6pg/mL$로 유의하게 감소하였다(P<0.05). 미숙아 제대 동맥혈 isoprostane은 둔위 분만, 양수 과소증, 신생아 가사와 통계적으로 유의한 상관관계가 있었고(P<0.05), 만삭아 제대 동맥혈 isoprostane은 임신성 고혈압과 유의한 상관관계를 보였다(P<0.05). 그러나 미숙아 제대 동맥혈 isoprostane은 신생아기의 주요 합병증과는 상관관계가 없었다. 결 론 : 미숙아에서 제대 동맥혈 isoprostane 농도는 만삭아에 비하여 높고, 일부 주산기-신생아기 위험인자와 연관이 있어서, 주산기-신생아기에 산화손상과 관련된 주요 지표 중에 하나로 사용될 가능성이 있음을 추측하였다.
8-isoprostane (8-$isoPGF_{2{\alpha}}$) is a reliable marker and considered a gold standard for lipid peroxidation. There are very few reports of 8-isoprostane levels in cancer patients, and in patients undergoing chemotherapy. Oxidative stress is however expected and has been observed in patients with cancer. This study measured 8-isoprostane levels in urine by ELISA of 25 patients undergoing chemotherapy for advanced non-small cell lung cancer, at cycles 1, 2, and 3 of treatment. It considers the creatinine clearance of the patients, and correction of 8-isoprostane levels by creatinine clearance, and overnight urine volume methods. The average 8-isoprostane levels in urine increased more than 6 to 12 fold on chemotherapy treatment, from $532{\pm}587$ pg/mL at cycle $1,6181{\pm}4334$ at cycle 2, and $5511{\pm}2055$ at cycle 3. Similar results were obtained if 8-isoprostane levels were corrected for overnight urine volume, giving averages of $285{\pm}244{\mu}g$ at cycle $1,4122{\pm}3349$ at cycle 2, and $3266{\pm}1200$ at cycle 3. No significant difference was seen in average total overnight urine volume or number of urinations between chemotherapy cycles except for a large variation in urine volume between cycle 2 and 3. Creatinine levels were significantly different only between cycles 1 and 2 (p=0.016). In conclusion, cisplatin therapy has been shown to induce high levels of lipid peroxidation in lung cancer patients and can be assessed from the 8-isoprostane marker in overnight urine, with or without urine volume correction.
Lee, Sang Gil;Wang, Taoran;Vance, Terrence M.;Hurbert, Patrice;Kim, Dae-Ok;Koo, Sung I.;Chun, Ock K.
Journal of Microbiology and Biotechnology
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제27권2호
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pp.388-394
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2017
Although several analytical methods for measuring total antioxidant capacity (TAC) have been applied to biological samples, there were often dissimilar results due to the different principles of methods applied. Thus, this study aimed to validate four conventional analytical methods for measuring plasma TAC, including the ABTS assay, DPPH assay, FRAP assay, and ORAC assay, by comparing with urinary 8-isoprostane concentration. In addition, TAC results were compared with antioxidant enzyme activities including superoxide dismutase (SOD) and glutathione peroxidase in erythrocyte, and catalase in plasma. Plasma TAC measure by ABTS assay was strongly correlated with the result by FRAP assay. Plasma TAC by FRAP and ORAC assays were negatively correlated with erythrocyte SOD activity. The agreement among the four TAC assay methods and 8-isoprostane was determined using 95% prediction limits of linear regression, expressed as the mean of 8-isoprostane ${\pm}95%$ prediction limits. The ABTS method better agreed with 8-isoprostane than the other methods, demonstrating narrow prediction of limits. Furthermore, only plasma TAC determined by the ABTS assay was inversely correlated with urinary 8-isoprostane (r = -0.35, p < 0.05). In summary, the ABTS assay would be an appropriate method to measure overall plasma antioxidant capacity and predict the body's antioxidant status.
There are growing evidences suggesting a pivotal role of oxidative stress in the pathophysiology of preeclampsia. We investigated oxidative stress in the rat model of preeclampsia, and in clinical cases. Pregnant female rats were injected intraperitoneally with deoxycorticosterone acetate (DOCA) and given 0.9% saline as drinking water during their pregnancy. We assessed plasma $F_2-isoprostane(8-iso-PGF_{2{\alpha})$ and malondialdehyde (MDA) in a rat model, and the same markers in the plasma of maternal blood and fetal cord blood in pregnant women with preclampsia. Blood samples from the umbilical arteries and veins were collected separately. The concentrations of MDA were increased in the preeclampsia groups of animal and humans, compared with the control group; it was significantly increased in the umbilical artery and vein of the preeclampsia group. The concentrations of $F_2-isoprostane$ were elevated in the preeclampsia groups of animal and humans, compared with the control group, and the increase in $F_2-isoprostane$ concentration was prominent in the umbilical vein than umbilical artery of the preeclampsia group. Therefore, it appears that the placenta has an important role in the pathophysiology of preeclampsia, and the $F_2-isoprostane$ of the umbilical vein may serve as a relatively reliable marker for ischemic/hypoxic injury to the fetus during the perinatal period.
An imbalance between oxidants and antioxidants, in favor of oxidants leading to oxidative stress, is known to play an important role in the pathogenesis of various diseases. Isoprostanes are structurally stable isomers of the conventional enzymatically derived prostaglandins, which are produced in vivo primarily by a free radical catalyzed peroxidation of polyunsaturated fatty acids. In asthmatics, disease severity can occur from environmental exposure to air pollution. Some surveys suggested that air pollutants, especially diesel-exhaust particulates, could trigger allergic sensitization and development of atopic diseases. Sick house syndrome (SHS) presents healthy damage owing to the indoor environment of a building. The aim of this study was to examine isoprostane as a parameter fur oxidative stress in environments related diseases such as sick house syndrome, atopy and asthma. We measured plasma and urinary levels of isoprostane from health volunteers, sick house syndrome, atopy and asthma patients. Plasma isoprostane concentrations in asthma and sick house syndrome group were significantly higher than in control. Urinary isoprostane levels were significantly higher in volunteers with sick house syndrome and asthma compared with health volunteers. These findings suggest that plasma and urinary isoprostane measurement may have useful clinical implications for investigating sick house syndrome and asthma. The interventions that decrease exposure to environmental reactive oxygen species might be beneficial in these diseases.
Lipid peroxidation is a free radical oxidation of polyunsaturated fatty acids such as linoleic acid or arachidonic acid. This process has been related with various pathologies and disease status mainly because of the oxidation products formed during the process. The oxidation products include reactive aldehydes such as malondialdehyde and 4-hydroxynonenal. These reactive aldehydes can form adducts with DNAs and proteins, leading to the alterations in their functions to cause various diseases. This review will provide a short summary on the implication of lipid peroxidation on cancer, atherosclerosis, and neurodegeneration as well as chemical and biochemical mechanisms by which these adducts affect the pathological conditions. In addition, select examples will be presented where antioxidants were used to counteract oxidative damage caused by lipid peroxidation. At the end, isoprostanes are discussed as a gold standard for the assessment of oxidative damages.
생체에서 가장 많은 비율로 분포하고 있는 콜라겐 펩타이드는 동물의 뼈와 해양 생물의 비늘에 많이 함유되어 있다. 콜라겐은 동물 생체의 여러 결합조직에서 구조 단백질로 흔하게 발견된다. 또한, 이들은 생물 의료 자재, 제약, 화장품, 식품 및 가죽 산업에 널리 이용된다. 각종 어류 비늘에서 추출된 펩타이드는 UVB 조사에 의해 유도된 피부의 손상 및 광 노화에 대한 보호 효과가 있었다. 그럼에도 불구하고, UVB 조사에 대한 옥돔 비늘 유래의 펩타이드 특성은 명확히 알려져 있지 않다. 이 연구에서는 옥돔 비늘 추출물에서 분리된 1 kDa 이상(HMP)과 1 kDa 이하(LMP)의 펩타이드를 이용하여 UVB 조사에 의해 유도된 피부 손상과 광 노화에 대한 효과를 연구하였다. 이들 펩타이드는 농도 의존적으로 DPPH 라디칼 소거능을 보였으며 LMP는 HaCaT 인간 피부세포에서 UVB 조사에 의해 유도된 세포 지질 과산화 산물인 8-isoprostane 생성을 억제하였다. 그리고 LMP와 HMP는 B16F10 마우스 흑색종 세포에서 tyrosinase 활성 및 melanin 함량을 감소시켰으며 또한 HaCaT 세포에서 UVB로 유도된 elastase 활성을 감소시켰고 matrix metalloproteinase-1의 활성을 감소시켰다. 이러한 결과는 옥돔 비늘에서 유래된 펩타이드가 미백효과, 항산화제 및 광 노화 억제제로서 유용한 물질이 될 것으로 기대된다.
A reversed-phase high-performance liquid chromatogrphy (RP-HPLC) has been developed to analyze the metabolites of arachidonic acid based on the specificities of ultraviolet absorption of these various metabolites and is sensitive to the nanogram level. This procedure makes it possible to extract complex mixtures of eicosanoids efficiently with a single step and to analyze them simultaneously by RP-HPLC from biological samples using octadesylsilyl silica extraction column and $PGB_2$ as an internal standard. The cyclooxygenase products {prostaglandin $(PG)D_2,\;PGE_1,\;PGE_2,\;PGF_{1{\alpha}},\;PGF{2{\alpha}},\;6-keto-PGF_{1{\alpha}},$ and thromboxane $B_2(TXB_2)}$ and lipid peroxidation product, isoprostanes, of arachidonic acid were monitored by one isocratic HPLC system at 195 nm wavelength. The lipoxygenase products ${leukotriene(LT)B_4,\;LTC_4,\;LTD_4,$ and 5-hydroxyeicosatetraenoic acid (5-HETE), 12-HETE, 15-HETE} were measured by another isocratic HPLC system at 280 nm for LTs and 235 nm for HETEs. This method provides a simple and reliable way to extract and assess quantitatively the final arachidonic acid metabolites.
We investigated antioxidative activity of the ethanol extracts of leaves of Cornus walteri Wanger (CWE) by treated enzyme in human dermal fibroblast (HDFs) irradiated by UVB. We examined the in vitro chemical and cellular antioxidant activities of CWE in HDFs. We employed scavenging assay for the 1,1-diphenyl-2,5-picrylhydrazyl (DPPH) radicals and cellular antioxidative activity of CWE, and we was investigated in $H_2O_2$-treated or UVB-irradiated HDFs. The CWE effectively scavenged DPPH radicals ($IC_{50}$$7.03{\pm}0.4{\mu}g/mL$) when compared to the scavenging activities of L-ascorbic acid ($IC_{50}$$4.69{\pm}0.3{\mu}g/mL$). CWE reduced UVB-induced cellular damage in HS68 cells by MTT assay and inhibited intracellular ROS generation in dose-dependent manner. In addition, CWE also attenuated the elevated levels of 8-isoprostane resulting from UVB-mediated oxidative stress. Collectively, these results suggest that CWE could be a new potential candidate as antioxidant against UVB-induced oxidative stress in HDFs.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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