Taxonomic relationships between some inulin containing plants such as Platycodon and Codonopsis have been investigated comparing their contents of inulin crystals, resin, as well as TLC patterns of saponins and acetylenes. Although Platycodon and Codonopsis have been known to be close in anatomic characters, the present results showed that there were significant differences between not only in the genus but also in the species.
K. marxianus inulase는 inulin 배지에서 생성이 증가되고, glucose나 fructose의 탄소원에 의하여 생성이 억제되는 유도효소로서 배양중 최대의 효소활성은 생장곡선의 정지기 초기에 나타났다. 부분 정제된 inulase는 inulin, sucrose, raffinose를 가수분해하며, 이 효소의 inulin과 sucrose에 대한 최적 pH와 최적온도는 동일하게 4.0과 $55^{\circ}C$였으며, 두 기질에 대하여 $Hg^{++}$와 $Ag^{+}$ 이온은 효소활성을 똑같이 크게 억제하는 반면, EDTA에 대해서는 영향이 없었다. 또한 이 효소의 특징은 invertase 활성도 동시에 가지고 있는 endo-type이며, inulin과 sucrose에 대한 Km 값은 각각 $1.2{\times}10^{-2}M$과 $1.3{\times}10^{-4}M$이었다.
The effects of dephenylhydantoin, strychnine, coramine, d-amphetamine and chlorpromazine on $QO_2$ and non-inulin space $Na^+$, $K^+$ concentration of rat cerebral cortical slices incubated in pH 7.4 glycylglycine glucose saline was investigated. In general, there are decreased non-inulin space $Na^+$ concentration or increased non-inulin space $K^+$ concentration or both when the ratio of respiration to non-inulin space is greater than control group except in case of chlorpromazine $10^{-4}\;M$. And it is suggested that the ratio of respiration to non-inulin space is responsible more closely for the non-inulin space Na, K concentration than $QO_2$ expressed per tissue wet weight. Effects of diphenylhydantoin and several other agents on electrolytes and the electroshock seizure threshold are discussed.
Kluyveromyces marxianus var. marxianus isolated as an inulin-assimilating microorganism produces inulin fructotransferase (inulaseII) which catalyses the conversion of inulin into di-D-fructofuranose 1, 2' : 2, 3' dianhydrde (DFAIII). The DFA produced by the organism was isolated by using active carbon column, and identified as DFAIII by high performance liguid chromatography. The culture medium giving maximum inulaseII production was found to consist of 1% sucrose and 0.75% yeast nitrogen base (YNB). The inulasell production was induced by inulin or sucrose as a carbon source and increased by addition of YNB as a nitrogen source. Optimal initial pH of the culture medium, culture temperature and medium volume for the enzyme production were pH 4.7, 30$\circ$C and 140 ml, respectively. Under the optimal conditions described above, the enzyme activity in the culture supematant reached 4.2 units/ml after cultivation for 36 h. The DFAIII was accumulated at 13.25 mg/ml after 48 h of culture in the Jerusalem artichoke tuber medium.
Various Saccharomyces cerevisiae strains were transformed with a 2 ${\mu}$-based multicopy expression plasmid, pYIGP, carrying Kluyveromyces marxianus inulinase gene under the control of GAPDH promoter. Among then two strains, SEY2102 and 2805, showed high levels of cell growth and inulinase expression, and were selected to study their fermentation properties on inulin. Jerusalem artichoke inulin was more effective for cell growth (10∼11 g-dry wt./L at 48 hr) and inulinase expression (1.0 units/mL with SEY2102/pYIGP and 2.5 units/mL with 2805/pYIGP) than other inulin sources such as dahlia and chicory. It was also found that maximal ethanol production of 9 g/L was obtained from Jerusalem artichoke inulin at the early stationary phase (around 30 hr), indicating that recombinant S. cerevisiae cells secreting exoinulinase could be used for the simultaneous saccharification of inulin and ethanol fermentation.
Kim Hyun-Chul;Kim Hyun-Jin;Choi Woo-Bong;Nam Soo-Wan
Journal of Microbiology and Biotechnology
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제16권3호
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pp.360-367
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2006
The endoinulinase gene (inu1) from Pseudomonas mucidolens was expressed on the cell surface of Saccharomyces cerevisiae by fusing with Aga2p linked to the membrane anchored protein, Aga1p. The inu1 gene of P. mucidolens was subcloned into the surface display vector, pCTcon (GAL1 promoter). The constructed plasmid, pCTENIU (8.5kb), was then introduced to S. cerevisiae EBY100 cells and the yeast transformants selected on synthetic defined media lacking uracil and inulin-containing media. The inu1 gene under the control of the GAL1 promoter was successfully expressed in the yeast transformants, and the surface display of endoinulinase confirmed by immunofluorescence microscopy, along with its enzymatic ability to form inulooligosaccharides (IOSs) from inulin. The total endoinulinase activity reached about 2.31 units/ml when the yeast transform ants were cultivated on a YPDG medium. To efficiently hydrolyze the inulin, various reaction conditions were examined, including the pH, temperature, and inulin source. The optimized conditions were then determined as follows: pH, 7.0; temperature, $50^{\circ}C$; inulin source, Jerusalem artichoke. Under the optimized condition and 46 units of endoinulinase per g of inulin, IOSs started to be produced after 10 min of enzymatic reaction. The highest yield, 71.2% of IOSs, was achieved after 30 h of reaction without any significant loss of the initial enzyme activity. As a result of the reaction with inulin, IOSs consisting of inulobiose (F2), inulotriose (F3), inulotetraose (F4), and inulopentaose (F5) were produced, and F4 was the major product.
과산화수소는 유기물에 접촉시에 물과 산소로 급속하게 분해되어 탄수화물과 같은 고분자물질을 저 분자물질로 분해하는 특성을 지니고 였다. 이러한 특성이 inulin의 산 가수분해 반응에 미치는 영향을 초음파를 조사시키면서 연구하였다. 반응조건은 온도가 $50∼60^{\circ}C$ 엽산의 농도가 O.1~O.3%(w/w) 였고, 이 조건하에서 과산화수소 농도가 2.3% (w/v) 일 때 가수분해 효과가 최대로 나타났다. 과산화 수소의 첨가로 control 반응에 비해 9~43% 의 분 해속도 증가를 보였다. 과산화수소를 첨가했을 경우 와 첨가하지 않았을 경우에 활성화에너지는 각각 26kcal/mol과 25kcal/mol로 거의 통일하였다. 따라서 과산화수소에 의한 inulin 가수분해 속도의 상승 효과는 frequency factor의 증가로 해석되 었다.
A bacterial strain LC-413, producing an extracellular inulin fructotransferase (depolymerizing) which converts inulin into di-D-fructofuranose dianhydride (DFAIII), was isolated from soil. Inulin fructotransferase from the isolate identified as a strain Flabobacterium sp. was purified from the culture broth by ammonium sulfate precipitation, followed by column chromatograpies on DEAE-Toyopearl 650 M and phenyl-Toyopearl 650 M. The purified enzyme gave a single band on an electrophoretic disc-gel. The molecular weight of the enzyme was estimated to be 44, 000 Da by SDS-polyacrylamide gel electrophoresis, and 45, 000 Da by gel filtration, suggesting the monomeric state of the enzyme. The isoelectric point of the enzyme was about pH 4.5. The optimal pH and temperature for the enzyme reaction were 6.0 and $50^{\circ}C$, respectively. The purified enzyme digested inulin into di-D-fructofuranose-l, 2': 2, 3'-dianhydride, confirming the enzyme was an inulin fructotransferase (inulinase II).
A bacterial strain LC-413, producing extracellular inulin fructotransferase which converts inulin into di-D-fructofuranose dianhydride(DFAIII) and amount of oilgosaccharides, was isolated from soil and pre-sumed as Flavobacteium sp. LC-413. The enzyme production was induced by inulin as carbon source and enhanced by the addition of 0.3% malt extract and 0.2% {TEX}$NaNO_{3}${/TEX} as nitrogen source. The enzyme activity in the culture supernatant reached at the maximum, 78.6units/ml, after 11 hours of cultivation in the medium composition of 1.5% inulin, 0.2% {TEX}$NaNO_{3}${/TEX}, 0.05% {TEX}$K_{2}${/TEX}{TEX}$HPO_{4}${/TEX}, 0.05% {TEX}$MgSO_{4}${/TEX}.7{TEX}$H_{2}${/TEX}O, 0.05% KCI, a trace amount of {TEX}$FeSO_{4}${/TEX}.7{TEX}$H_{2}${/TEX}O, and 0.3% malt ext. at 3$0^{\circ}C$. The oilgosaccharide produced by enzyme reaction from inulin was identified as DFA III by and {TEX}${13}^C${/TEX}-NMR spectrosocpy.
In nature, two different types of fructose polymers (fructan) are generally found in dietary fibers; these are the fructose homopolymers levan, which is of high molecular weight and is $\beta$-(2,6)-linked, and inulin, which is of low molecular weight and is $\beta$-(2,1)-linked. The effects of levan and inulin on the intestinal physiology of rats were compared. Sprague Dawley rats were fed one of three diets for 3 weeks: a control diet, a basal diet containing 7% of levan, and a basal diet containing 7% of inulin. Cecal enlargement, together with the lowering of cecal pH, occurred in rats fed on the levan and inulin diets (p < 0.05). The levan and inulin diets resulted in a two-fold increase in the amount of short-chain fatty acids in the cecum, when compared to the control diet. The number of total microbes and of lactic acid-producing bacteria in the feces were higher in rats fed the fructan diets than those in rats fed control diet (p < 0.05). The levan diet also significantly increased the cecal $\alpha$-galactosidase activity by 3.8-fold, when compared to the control diet, indicating that levan stimulated the growth of Bifidobacteria in the cecum. These results show that the intake of levan and inulin stimulated the growth of lactic acid-producing bacteria in the cecum and thereby improved intestinal conditions in rats. (Korean J Nutrition 35(9) : 912~918,2002)
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[게시일 2004년 10월 1일]
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