본 연구는 한우 24두의 혈액으로부터 geno- mic DNA를 추출하여 leptin 유전자의 intron 1부터 3’-UTR 부분까지의 염기 서열을 결정하여 총 25개의 SNPs을 발굴하였다. 발굴된 SNPs 중 16개는 기존의 서양 품종에서도 발견되는 것으로 그 빈도는 대부분의 경우 유사하였으나, 서로 유의성이 있도록 상이한 경우도 있었다. Intron 1의 T1064G, exon 2에서 발견된 nonsynonymous SNP(T1163A, Val to Glu)과 exon 3의 C3011G 및 G3256A(Gly to Asp) SNPs은 기존에 보고되지 않은 한우에서 새롭게 발견된 것으로 종 간의 차이를 나타내는 것으로 사료된다. 이러한 한우의 SNPs 정보는 한우의 유전형을 결정하고, 도체 및 육질 형질 등 중요 경제 형질과의 연관 분석을 통하여 중요한 유전자 표지 확보 및 한우 판별 등의 응용에 이용될 수 있을 것으로 사료된다.
The PCR- restriction fragment length polymorphism (RFLP) in and around TM4 of SLC11A1 gene and its association with the incidences of brucellosis in Hariana breed (Bos indicus) and Holstein Friesian crossbred (Bos indicus${\times}$Bos taurus) cattle was examined. A fragment of 954 bp encoding the TM4 was amplified, and RFLP was identified by digestion of the amplicon independently with AluI and TaqI. The amplicon (GenBank Acc. No. AY338470 and AY338471) comprised of a part of exon V (<59 bp) and VII (62>), and entire intron 5 (423 bp), exon VI (71 bp) and intron 6 (339 bp). Digestion with AluI revealed the presence of two alleles viz, A (281, 255, 79 and 51 bp) and B (541, 255, 79 and 51 bp). The frequency of A allele was estimated as 0.80 and 0.73 in Hariana and crossbred cattle, respectively. Due to presence of a polymorphic TaqI site at intron 5, two alleles: T (552 and 402 bp) and Q (231, 321 and 402 bp) were identified. The frequency of T allele was estimated as 0.96 and 0.97, respectively. For association study, on the basis of serological tests and history of abortion, the animals were grouped into "affected" and "non-affected". However, no association could be established with the observed RFLPs.
This study was carried out to investigate the association of POU1F1 (POU domain, class 1, transcription factor 1, Pit1, renamed as POU1F1) gene with backfat thickness (mm), carcass weight (kg), pH, and color values ($L^*$, $a^*$, $b^*$) in crossbred pigs (Landrace ${\times}$ Yorkshire ${\times}$ Duroc). Frequency of the AA genotype indel was at the highest level (66.67%). Frequency of A allele (0.81) was higher than that of b allele (0.19). This population followed Hardy-Weinberg equilibrium. Carcass weights and $a^*$ values of the three genotypes were all significantly different (p < 0.05), respectively. However, backfat thickness, $L^*$, $b^*$, visual color, and pH of the three genotypes were not significantly different (p > 0.05). Visual color was negatively correlated with $L^*$ (r = -0.521) and $b^*$ (r = -0.390) values, $L^*$ value was correlated with $b^*$ (r = 0.419) value, and $a^*$ value was positively correlated with $b^*$ (r = 0.612) value. These results indicate that the POU1F1 gene affected carcass weight and meat redness.
Hwang, Il Ki;Kim, Seung-Oh;Hwang, Mi Sook;Park, Eun-Jeong;Ha, Dong-Soo;Lee, Sang-Rae
ALGAE
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제33권1호
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pp.49-54
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2018
Red algal mitochondrial genomes (mtDNAs) can provide useful information on species identification. mtDNAs of Pyropia / Porphyra (Bangiales, Rhodophyta) have shown diverse variation in their size and gene structure. In particular, the introns and intronic open reading frames found in the ribosomal RNA large subunit gene (rnl) and cytochrome c oxidase subunit 1 gene (cox1) significantly vary the mitochondrial genome size in Pyropia / Porphyra species. In this study, we examined the exon / intron structure of rnl and cox1 genes of Pyropia yezoensis at the intraspecific level. The combined data of rnl and cox1 genes exhibited 12 genotypes for 40 P. yezoensis strains, based on the existence of introns. These genotypes were more effective to identify P. yezoensis strains in comparison to the traditional DNA barcode cox1 marker (5 haplotypes). Therefore, the variation in gene structure of rnl and cox1 can be a novel molecular marker to discriminate the strains of Pyropia species.
Appetite-related neuropeptides proopiomelanocortin (POMC) and Neuropeptide Y (NPY) are essential for regulating feeding behavior and energy homeostasis. The objective of this study was to evaluate the effects of variants in POMC and NPY genes on growth, carcass and meat quality traits in rabbits. A total of six SNPs were identified for POMC (n = 2) and NPY (n = 4) genes by direct sequencing. Three SNPs were subsequently genotyped by using MassArray system (Sequenom iPLEXassay) in 235 individuals, which belong to three meat rabbit breeds, including 93 Ira rabbits; 81 Champagne rabbits and 61 Tianfu black rabbits. The SNP c.112-12G>T was in intron-exon boundaries (intron 1) of POMC gene, and the association analysis showed that individuals with TT genotype had a greater 84 d body weight (BW84), eviscerated weight and semi-eviscerated weight than those with GT genotype (p<0.05); the TT individuals were also higher than those GG in the ripe meat ratio (RMR) (p<0.05). The g.1778G>C SNP, which was in complete linkage with other three SNPs (g.1491G>A, g.1525G>T and g.1530C>T) in intron 1 of NPY gene, was significantly correlated with eviscerated slaughter percentage and semi-eviscerated slaughter percentage in rabbits, and the individuals with CC genotype had a better performance than CG genotype (p<0.05). These findings would provide primary clues for the biological roles of POMC and NPY underlying the rabbit growth-related traits.
비육 출하돈 집단에서 MYL2 intron 5 A345G와 ADCYAP1R1 intron 2 A337G에 대한 유전자형의 분포와 도체형질과의 연관관계를 분석하였다. 조사에 이용된 두 유전자 모두 3가지 유전자형이 모두 출현하였으며, 빈도는 각각 MYL2에서 AA 10.6%, AG 45.6%, GG 43.8%, ADCYAP1R1에서 AA 60.5%, AG 34.6%, GG 22.2%로 확인되었다. MYL2 유전자형 중 G 대립인자를 보유한 돼지(-G)의 도체중과 등지방두께는 AA 동형접합자형을 보유한 도체보다 2.4kg 이상 더 무겁고, 1.3mm 이상 등지방두께가 더 두꺼운 경향을 보이고(p<0.05), 근내지방도, 육색, 조직감, 수분삼출도, 근육분리도에서는 유의차를 보이지 않았다(p>0.05). ADCYAP1R1의 유전자형 중 GG 동형접합자형인 도체에서는 조직감이 다소 떨어지는 경향을 보였으며, AA 동형접합자의 수분삼출도가 다소 높은 수준을 나타내었으나(p<0.05), 도체중, 등지방두께, 근내지방, 육색, 근육분리도에는 유의차를 보이지 않았다(p>0.05). 돼지에서 MYL2 A345G와 ADCYAP1R1 A337G의 유전자형이 비육 출하돈의 도체형질에 어느 정도 영향을 주고 있으나, 유전자의 기능에 직접적인 영향을 줄 수 있는 염기변이의 탐색 등 다양한 연구가 수반되어야 할 것으로 사료된다.
Gene expression of two glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase (GAPDH) paralogs was examined during Edwardsiella tarda challenge and heavy metal exposures in mud loach (Misgurnus mizolepis; Cypriniformes) kidney and spleen. Transcription of the two mud loach GAPDH paralogs (mlGAPDH-1 and mlGAPDH-2) was significantly modulated by these stimulatory challenges in an isoform-dependent manner. Based on the real-time RT-PCR analysis, the mlGAPDH-2 transcripts were more preferentially induced by E. tarda challenge, whereas the mlGAPDH-1 transcripts were proven to show more inducibility in response to heavy metal exposure using Cd, Cu, Mn and Zn at $5{\mu}M$. Their isoform-specific response patterns were closely in accordance with the TF binding profiles in promoter and intron-1 of the two mlGAPDH isoforms, in which the mlGAPDH-2 has more binding sites for immune-related transcription factors than mlGAPDH-1 while the mlGAPDH-1 possesses exclusively metal responsive elements in its intron. Collectively, the mlGAPDHs are potentially involved in cellular pathways independent of glycolysis and the two GAPDH paralogs might undergo functional diversification or subfunctionalization at least at the transcription level.
생물체의 체내 지방대사에 아주 중요하게 작용하는 LPL의 유전자 구조변이가 한우의 경제형질에 미치는 효과를 구명하고자, 사람 등 포유류에서 주요한 변이부위로 인식되어 온 LPL유전자의 exon 5${\sim}$exon 6 영역에서 구조변이를 탐색하였다. 부모가 각기 다른 한우 24두를 이용하여 PCR 증폭산물 1674 bp (exon 5${\sim}$exon 6)에서 총 8 좌위의 SNP 검출하였는데, 이는 SNP 검출율이 약 1SNP/210bp로 기존 SNP 검출율 보다 비교적 높은 비율이며, 검출된 SNP들 간에 95% 이상의 높은 연관(linkage) 관계를 보여 비교적 잘 보존되어 있는 영역으로 사료된다. 그리고 검출된 SNP를 PCR-RFLP 기법을 이용하여 표현형질 기록치를 확보한 한우 33차 후대검정축 129두의 유전자형을 결정하였다. 그 결과 intron 5번의 제한효소 Hae III로 처리한 823A\longrightarrowG 변이부위가 측정된 모든 도체형질에서 유전자형에 따라 뚜렷한 차이를 보였으며, 특히 근내지방도와 통계적 유의성이 인정되었다(p<0.05). 사람 및 생쥐에서 LPL의 촉매활성부위를 암호화하는 exon 5번 및 6번에서의 변이는 LPL의 활성도에 영향을 미치며, 이는 혈액내의 중성지방농도 및 지방대사에 작용한다는 보고가 있다. 이들 변이구조와 95% 이상 강한 연관을 보이는 intron 5번의 구조변이는 근내지방도와 유의적으로 관찰되었다. 앞으로, intron 5번의 823A\longrightarrowG 변이가 어떤 근거로 근내지방도와 유의적으로 나타났는지 그 근거를 증명할 수 있는 추가적인 실험이 필요한 것으로 사료된다.
We characterized a cytoplasmic actin gene locus in greenling Hexagrammos otakii (Scorpaeniformes). Genomic clones isolated from the greenling DNA library contained two homologous cytoplasmic actin gene copies (HObact2.1 and HObact2.2) in a tail-to-head orientation. Their gene structure is characterized by six translated exons and one non-translated exon. Exon-intron organization and the nucleotide sequences of the two actin gene isoforms are very similar. However, only the HObact2.1 isoform contains microsatellite-like, dinucleotide repeats in the 5'-flanking region (named HOms2002) and intron 1 following the non-translated exon 1 (named HOms769). One microsatellite locus (HOms769) was highly polymorphic while the other (HOms2002) was not. Based on bioinformatic analysis, different transcription factor binding motifs are related to stress and immune responses in the two actin isoforms. Semiquantitative and real-time reverse transcription-PCR assays showed that both isoform transcripts were detectable ubiquitously in all the tissues examined. However, the basal expression levels of each isoform varied across tissues. Overall, the two isoforms showed a similar, but not identical, expression pattern. Our data suggest that the cytoplasmic actin genes may be the result of a recent duplication event in the greenling genome, which has not experienced significant subfunctionalization in their housekeeping roles.
셀룰로오스의 가수분해 기작을 구명하기 위하여 Phanerochaete chrysosporium으로부터 74A (PcGHF74A) 유전자를 클로닝한 결과 2162 bp의 염기서열에 해당하는 721개의 아미노산을 가지고 있으며, 다른 사상균에서 유래한 GHF74와 70~77%의 상동성을 나타냈다. Phanerochaete chrysosporium GHF74B (PcGHF74B)는 family 1에 속하는 Cellulose Binding Module (CBM)을 가지고 있으며 셀룰로오스 배양계에서 다양한 전사산물이 존재하였다. PcGHF74B 전사산물에서 나타난 splice variants를 조사하기 위해서 annotation data와 sequence data로부터 primer를 설계하여 RT-PCR분석을 수행하였으며 그 결과 다양한 배양조건에서 splice variants가 존재함을 확인하였다. 첫 번째는 annotation data와 다르게 11번째 intron을 포함하고 있어 full length로 추정되어지는 것으로 2562 bp에 stop codon이 존재했으며, 두 번째는 7번째 exon 1187 bp에 stop codon을 가지고 있으며 12개의 exon으로 구성되어 있다. 세 번째는 10개의 exon과 9개의 intron을 포함하고 있으며 7번째 exon에 stop codon이 존재했다. Splice variants로서 intron에 나타난 stop codon으로 인해 활성단백질의 합성이 일어나지 않을 것이며 비활성 단백질을 생성하거나 원래의 GHF74의 기능이 아닌 다른 새로운 기능을 갖는 단백질을 생성할 수 있을 것으로 사료된다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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