$Drosophila$$melanogaster$ has been used as a useful model to study development and disease. In this study, we established the primary culture method of $Drosophila$ in the intestine to understand how intestinal stem cells (ISCs) mediate tissue repair during infection and disease. To obtain intestinal cells, we separated intestines from adult flies and isolated single cells by enzymatic treatment. The survival of cultured cells was measured using MTS-analysis. The maximum growth rate of the cells was observed on the 9th day after seeding. In addition, the presence of ISCs and enteroendocrine cells was confirmed by delta and prospero staining. Accordingly, we supposed that $Drosophila$$melanogaster$ gut cells established in this study are probably useful in studies about intestinal stem cell regulation and various diseases occurring in the intestine.
Gong Deuk Bae;Kyong Kim;Se-Eun Jang;Dong-Jae Baek;Eun-Young Park;Yoon Sin Oh
Journal of Applied Biological Chemistry
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v.66
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pp.311-319
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2023
Caveolin-1 (Cav-1) is the main structural component of the caveolae on the plasma membrane, which regulates various cellular processes, including cell growth, differentiation, and endocytosis. Although a recent study demonstrated that Cav-1 might be involved in diabetes-associated inflammation, its exact role in the intestine was unclear. In this study, we examined the intestinal expression of Cav-1 in diabetic conditions. We also investigated its effect on lipopolysaccharide (LPS)-induced inflammation by expressing this protein in human intestinal Caco-2 cells lacking Cav-1. We observed that increased Cav-1 levels and decreased expression of tight junction proteins affected intestinal permeability in high-fat diet-induced diabetic mice. When Caco-2 cells were treated with LPS, Cav-1 enhanced the NF-κB signaling. Moreover, LPS reduced the expression of tight junction proteins while it increased cell-cell permeability and reactive oxygen species generation in Caco-2 cells and this effect was amplified by cav-1 overexpression. LPS treatment promoted phosphorylation of tyrosine-14 (Y14) on Cav-1, and the LPS-induced NF-κB signaling was suppressed in cells expressing non-phosphorylatable Cav-1 (tyrosine-14 to phenylalanine mutant), which reduced intestinal barrier permeability. These results suggest that Cav-1 expression promotes LPS-induced inflammation in Caco-2 cells, and phosphorylation of Y14 on Cav-1 might contribute to the anti-inflammatory response in LPS-induced NF-κB signaling and cell permeability.
We examined the effect of dietary Turkish propolis and flavomycin on growth performance, carcass characteristics, internal organ weights and some serum variables in quail (Coturnix coturnix japonica) birds. One hundred and fifty day-old quails were randomly divided into five groups, with ten replicate pens per treatment and three birds per pen. One group received the basal diet (antibiotic-free), the control. The flavomycin at 10 mg/kg diet and propolis at 0.5, 1 and 1.5 g/kg diet were added to the basal diet. Body weight gain, feed consumption and feed efficiency were determinated weekly. Carcass characteristics, internal organ weights and serum variables were determinated at the end of the study (35 day). The results showed that body weight gain, feed efficiency and carcass weight were improved significantly (p<0.01) when compared to control group for birds fed diets containing propolis and flavomycin between 14 to 35 days. The addition of 1 g/kg propolis to the diet resulted in significantly (p<0.01) better-feed efficiency as compared to control and other treatment groups. There were no significant differences in carcass yield, abdominal fat, liver gizzard, proventriculus and intestinal weight and intestinal pH among the groups. In addition, serum ALP, total protein, uric acid, cholesterol and triglyceride were not influenced by the any supplementation. However, birds fed with propolis tended to have higher serum HDL and lower level than birds fed the control diet. In conclusion, supplementation of propolis and flavomycin during the growth period showed similar effects on growth performance in quail. Therefore, it can serve as a natiral substitute for antibiotics in poultry diets.
The study was conducted to evaluate the effects of dietary organic acid mixture(lactic acid 12%, formic acid 9%, citric acid 5%, butyric acid 5% and phosphoric acid 6%) on growth performance, organ weight, blood immunological parameter and intestinal villi morphology in broilers. Dietary treatments included 1) CON (basal diet), 2) OA1 (basal diet + 0.1% organic acid mixture) and 3) OA2 (basal diet + 0.2% organic acid mixture). Four hundred eighty hatched Arbor Acre broiler chickens were housed in 24 pens of 20 birds each. Eight replicate pens were allotted into each treatment by completely randomized design. Daily weight gain, feed intake and feed/gain were not significantly different among the treatments. In organ weight, that of gizzard was significantly heavier in OA2 than CON (Linear effect = 0.034). However, those of spleen and intestine were not significantly different among the treatments. Blood immunological parameters such as RBC, WBC and lymphocyte were not significantly difference. In intestinal villi morphology, villi length was increased in OA1 compared to CON (Quadratic effect = 0.050). In conclusion, 0.2% organic acid mixture was effective to improve gizzard weight of broilers.
Journal of the Korean Society of Food Science and Nutrition
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v.39
no.3
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pp.356-362
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2010
When pine (Pinus densiflora) needles were fractionated into cold water (PD-CW), hot water (PD-HW) and methanol extract (PD-M), PD-M showed potent simulating activity (1.19-fold of the saline control) for proliferation of bone marrow cells mediated by Peyer's patch cells in vitro. MeOH extracts were prepared by homogenization, stirring or reflux to identify the method of methanol extraction, and MeOH extract by reflux method showed significantly highest intestinal immune system modulating activity (1.30-fold) in vitro. The intestinal immune system modulating effect of orally administered PD-M fractionated from pine needles also were studied in mice. Analyzing intestinal immune system modulating activity mediated Peyer's patch cells from C3H/He mice which had been fed with PD-M at different doses for 7 days, 1.0 g/kg of BW/day indicated that the bone marrow cells had proliferated (3.65-fold of 3% EtOH administered group). In addition, the amounts of IL-6 in the culture supernatant of Peyer's patch cells at 1.0 g/kg of BW/day were increased (1.13-fold) whereas the production of GM-CSF was not dose dependent. These results indicate that oral administration of PD-M enhances the secretion of hematopoietic growth factors such as GM-CSF and IL-6 from Peyer's patch cells, and these cytokines also act on modulator of bone marrow cell proliferation.
Anaerobic growth-inhibiting and acaricidal activities of 2'-hydroxy-5'-methoxyacetophenone derived from Cyanachum paniculatum oil and its derivatives against five intestinal bacteria (Bifidobacterium bifidum, B. longum, Clostridium pefringens, Escherichia coli and Lactobacillus casei) and Haemaphysalis longicornis were examined. In the packet test against the larvae of H. longicornis, none of the C. paniculatum oil exhibited acaricidal activity, while the C. paniculatum oil showed only antimicrobial activity against five intestinal bacteria in the disc diffusion method. Based on the inhibition zones and MIC values, 2',4'-dimethoxyacetophenone, 2',5'-dimethoxyacetophenone, 2'-hydroxy-4'-methoxyacetophenone, 2'-hydroxy-5'-methoxyacetophenone, 2'-methoxyacetophenone, and 4'-methoxyacetophenone, containing a methyl group on the acetophenone skeleton, possessed growthinhibiting activities against C. perfringens and E. coli. However, acetophenone, 2'-hydroxyacetophenone, 4'-hydroxyacetophenone, 2',4'-hydroxyacetophenone and 2',5'-hydroxyacetophenone, which contained a hydroxyl group on the acetophenone skeleton, had no growth-inhibiting activity against intestinal bacteria. These results indicated that 2'-hydroxy-5'-methoxyacetophenone and its derivatives could potentially be developed as natural antimicrobial agents to specific control of C. perfringens and E. coli.
This study was conducted to investigate the effect of feed particle size and feed form on growth performance, nutrient metabolizability and intestinal morphology in broiler chickens. This experiment was a 2${\times}$2 factorial arrangement including two feed particle sizes (fine and coarse) and two feed forms (mash and pellet). A total of two hundred and eighty eight day-old male Arbor Acre broilers were used in this six week experiment. Birds were randomly allotted to four dietary treatments with six replicates per treatment and twelve birds per replicate. The results showed that pelleting diets resulted in greater ADG (p<0.01), greater ADFI (p<0.01) and lower feed to gain ratio (F/G) (p<0.05) during starter, grower and overall period. Also, pelleting improved both apparent metabolizable energy (AME) (p<0.01) and the apparent metabolizability of crude protein (p<0.05) and organic matter (p<0.05) regardless of the phase. Reduction of feed particle size enhanced AME (p<0.05) during d 19 to 21. Increased villus height (p<0.05) and crypt depth ratio (p< 0.05) within duodenum, jejunum, and ileum were observed in birds fed the pellet diet compared with those given the mash diet. In conclusion, results indicated that feed pellets might enhance performance by improving nutrient metabolizability and digestive tract development.
The response of broiler chicks to intubation of nutrients (starch, casein, soybean oil or their combinations) into the crop immediately after hatch was evaluated for performance, intestinal development, meat yield and immune competence up to 35 d of age. A control group with no access to feed and two test groups fed either inert material (sawdust) or starter diet for the initial 24 h after hatch were compared with nutrient intubated groups (n = 7). A total of 300 broiler chicks were equally distributed to 10 dietary groups with 6 replicates of 5 chicks each. After 24 h of hatch, all groups were fed ad libitum the starter (0-21 d) and finisher diets (22-35 d). Results indicated that post-hatch intubation of starch into the crop significantly (p${\leq}$0.05) improved body weight (at 14 and 35 d of age), readyto-cook meat yields, weights of breast muscle and small intestine segments, cell-mediated immune response, ND titers and weight of bursa compared to chicks starved or fed sawdust during the initial 24 h after hatch. However, chicks with access to feed immediately after hatch or intubation of starch, soybean oil, starch+casein, starch+soybean oil or starch+casein+soybean oil exhibited similar positive effects. Intubation of casein either alone or in combination with soybean oil was superior to the starved or sawdust fed groups, but inferior to other groups for all the parameters studied. It was concluded from the study that intubation of starch individually or in combination with casein and/or soybean oil effectively circumvented the negative effects of post-hatch starvation for 24 h. Among the nutrients intubated, carbohydrate (starch) was better utilized by the chicks than protein (casein) or fat during the initial post-hatch period.
Objective : In order to develop a novel nerve guidance channel using porcine small intestinal submucosa (SIS) for nerve regeneration, we investigated the possibility of SIS, a tissue consisting of acellular collagen material without cellular immunogenicity, and containing many kinds of growth factors, as a natural material with a new bioactive functionality. Methods : Left sciatic nerves were cut 5 mm in length, in 14 Sprague-Dawley rats. Grafts between the cut nerve ends were performed with a silicone tube (Silicon group, n=7) and rolled porcine SIS (SIS group, n=7). All rats underwent a motor function test and an electromyography (EMG) study on 4 and 10 weeks after grafting. After last EMG studies, the grafts, including proximal and distal nerve segments, were retrieved for histological analysis. Results : Foot ulcers, due to hypesthesia, were fewer in SIS group than in Silicon group. The run time tests for motor function study were 2.67 seconds in Silicon group and 5.92 seconds in SIS group. Rats in SIS group showed a better EMG response for distal motor latency and amplitude than in Silicon group. Histologically, all grafts contained some axons and myelination. However, the number of axons and the degree of myelination were significantly higher in SIS group than Silicon group. Conclusion : These results show that the porcine SIS was an excellent option as a natural biomaterial for peripheral nerve regeneration since this material contains many kinds of nerve growth factors. Furthermore, it could be used as a biocompatible barrier covering neural tissue.
Journal of the Korean Society of Food Science and Nutrition
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v.26
no.1
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pp.130-136
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1997
Total parenteral nutritional effect was induced by surgical creation of Thiry-Vella fistula(TVFs) in rats. Glutamine, glycine or nucleosides/nucleotide mixture in solution was injected into the loops for 2, 4, 6, 8 days. Control animals received a 0.9% saline solution. Results include weight gain, total protein, DNA, [$^3$H] thymidine incorporation into DNA, morphometry of the intestine in both TVFs and intestine in continuity. Perfusion of nucleosides/nucleotide mixture into the bypassed loops caused an increase in total protein, DNA content, villous height, villous surface area in loops. The injection of glycine into loops caused an increase in [$^3$H] thymidine incorporation but the mean values of the protein and DNA contents were not significantly different from those in group Cont and group Nuc. Overall values for group Gln were slightly higher than those of the control but the differences were not statistically significant. This study suggests that this animal model may be useful for studying the effect of dietary factors on intestinal growth and maturation, separating the direct effect of diet from systemic effect on the intestine.
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