Kim, Deok-Hwan;Kim, Kyu-Jik;Noh, Jin-Yong;Lee, Sun-Hak;Song, Chang-Seon;Park, Hae Kyoung;Nahm, Sang-Soep
Korean Journal of Poultry Science
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v.47
no.4
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pp.229-235
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2020
Avian influenza virus infection, one of the most important diseases recognized in the poultry industry, is known to cause changes in cytokine and serum protein levels. However, the normal ranges and/or age-dependent changes in important cytokines and serum proteins associated with influenza infection have not been fully elucidated. In this study, the levels of cytokines (interleukin-1β, interleukin-6, and interferon-γ) and serum proteins (vitamin D binding protein and ovotransferrin) were determined in 1-week- to 4-week-old broilers at 1-week intervals after challenge with a low pathogenic influenza virus. The results showed that the physiological levels of cytokines and serum proteins varied with aging during the 4 weeks. The levels of interleukin-1β and interleukin-6 increased from 20% to 35% after influenza infection compared to those in the negative control group, indicating that these cytokines may be used to monitor disease progression.
Objective : The purpose of this study was to investigate the anti-inflammatory effects of Hwagae-san extract(HGSE) on the peritoneal macrophage. Methods : To evaluate anti-inflammatory effects of HGSE, We measured cytokines(interleukin-6; IL-6, interleukin-12; IL-12, tumor necrosis factor-${\alpha}$; TNF-${\alpha}$) and nitric oxide(NO) production in lipopolysaccharide(LPS)-induced macrophages. Furthermore, We examined molecular mechanism using western blot and also LPS-induced endotoxin shock. Results : 1. HGSE did not have any cytotoxic effect in the peritoneal macrophages. 2. HGSE reduced LPS-induced IL-6, TNF-${\alpha}$, IL-12 and NO production in peritoneal macrophages. 3. HGSE inhibited the activation of extracelluar signal-regulated kinase(ERK), C-Jun NH2-terminal kinase(JNK) but not of p38, degradation of IkB-${\alpha}$ in the LPS-stimulated peritoneal macrophages. 4. HGSE inhibited the production of TNF-$\alpha$, IL-6 and IL-12 in serum after LPS injection. Conclusion : These results suggest that HGSE may inhibit the production of TNF-${\alpha}$, IL-6, and IL-12 through inhibition of ERK and JNK activation, and that HGSE may be beneficial for inflammatory diseases.
Taurine (2-aminoethanesulfonic acid), one of bioactive amino acid in the mammalian brain, is known to exert inhibitory effects on neurons via GABA receptor. In the present study, we examined effects of taurine on glutamateinduced neurotoxicity on hippocampal neuron cell culture using cell counting method and lactate dehydrogenase (LDH) assay. After 10 d of culture, cells were stimulated with appropriate drugs. Only 43% of cultured neuronal cells survived at one day after stimulation with 500 uM L-glutamate for 10 min. Survival rate was enhanced by 82% in the presence of 10 mM taurine. LDH activity from the culture supernatant incubated with a combination of L-glutamate and taurine was less than half of that with L-glutamate alone. In the next series of experiments, interleukin-6 (IL-6) mRNA expression in cultured astrocytes was investigated using reverse tanscription-PCR (RT-PCR). IL-6 mRNA was detected in the astrocytes stimulated with L-glutamate in a dose-dependent manner, while not detected in the unstimulated control astrocytes. The expression of IL-6 mRNA caused by 10 mM glutamate was inhibited by taurine, but not by GABA. These findings demonstrated a neuroprotective action of taurine against glutamate-induced toxicity.
Journal of the Korean Society of Food Science and Nutrition
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v.32
no.1
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pp.149-154
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2003
The immunomodulatory activity of PJ-P, a polysaccharide fraction extracted from Paeonia japonica, were reported in our previous paper. In the present study, we investigated that PJ-P inhibited cancer growth through activation of macrophages. The activities of peritoneal macrophage to induce tumor necrosis factor (TNF)-$\alpha$, interleukin-1 (IL-1)$\beta$, interleukin-6 (IL-6) and interleukin-12 (IL-12) as well as to ingest fluorescence-latex microbeads were enhanced by treatment of PJ-P. Direct cytocidal activity of PJ-P against cancer cells was not shown. However, in vitro, peritoneal macrophages treated with PJ-P had an activity to kill cancer cells. Furthermore, PJ-P significantly prolonged the survival of mice implanted intraperitoneally with B16F0 mel-anoma cells. These results suggest that PJ-P could be a useful immunomodulator and assistant of anti-tumor agent.
A DNA vaccine methodology using eukaryote expression vectors to produce immunizing proteins in the vaccinated hosts is a novel approach to the development of vaccine and immuno-therapeutics, and it has achieved considerable success over several infectious diseases and various cancers. To further enhance its efficiency, attempts were made to develop novel plasmid vectors containing multiple immunostimulatory CpG motifs, for rapid and strong immune response. First, a 2.9 kb compact plasmid vector (pVAC), containing CMV promoter, polycloning site, BGH poly(A) terminator, ampicillin resistance gene and pBR322 origin was constructed. A pVAC-hEPO was also constructed, which contained a human erythropoietin gene, for evaluating the transfection efficiency of naked plasmid DNA both in vitro and in vivo. To examine the adjuvant effect of multi-CpG motifs on naked plasmid DNA, 22 and 44 enriched and unmethylated CpG motifs were introduced into pVAC to generate pVAC-ISS1 and pVAC-ISS2, respectively. $100{\mu}g$ of pSecTagB, pVAC, pVAC-ISS1 or pVAC-ISS2 were each injected intramuscularly into the tibilias anterior muscle of Balb/c mice. The level of interleukin-6 induced in the mice injected with pVAC-ISS1 and pVAC-ISS2 were significantly elevated after 12 hours, which were almost 2 and 2.5 times higher than that in the mice injected with pSecTagB, respectively. These results suggest that DNA vaccine plasmids with enriched CpG motifs can induce rapid secretion of interleukin-6 by lymphocytes. In conclusion, these vectors can contribute to the development of adjuvant-free DNA vaccinations against infectious diseases and various cancers.
The partitioning of recombinant human interleukin-2(rhII-2) in PEG 8000-dextran 38800 aqueous two-phase system has been investigated using three different sources of rhIL-2. In the case of pure rhIL-2, the solubility in a PEG-dextran two-phase system was low and most of rhIL-2 was partitioned into the bottom phase. For the recovery of rhIL-2 from insoluble protein aggregates, the inclusion bodies of recombinant E. coli were solubilized by the treatment with sodium dodecyl sulfate (SDS). The addition of SDS significantly enhanced not only the solubility of rhIL-2 but also the partitioning of rhIL-2 to the top phase. When the ratio of SDS to rhIL-2 was 2.0, the partition coefficient(K) and the recovery yield(Y) at the top phase were 4.5 and 88%, respectively, at pH 6.8. In order to reduce the recovery steps further, SDS was directly added to the intact recombinant E. coli cells and then partitioned into the PEG/dextran aqueous two-phase system. The observed partition coefficient ($K{\cong{3.0$) and recovery yield ($Y{\geq}80%$ )of this method were comparable to the rhIL-2 recovery from insoluble protein aggregates. The results obtained in this work indicate that PEG-dextran two-phase partitioning might provide a simple way for the recovery and partial purification of recombinant proteins which are produced as inclusion bodies.
Xue Yan;Liang Jin;Huifen Zhou;Haofang Wan;Haitong Wan;Jiehong Yang
Journal of Microbiology and Biotechnology
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v.33
no.10
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pp.1281-1291
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2023
Infectious diseases caused by drug-resistant Escherichia coli (E. coli) pose a critical concern for medical institutions as they can lead to high morbidity and mortality rates. In this study, amygdalin exhibited anti-inflammatory and antioxidant activities, as well as other potentials. However, whether it could influence the drug-resistant E. coli-infected cells remained unanswered. Amygdalin was therefore tested in a cellular model in which human macrophages were exposed to resistant E. coli. Apoptosis was measured by flow cytometry and the lactate dehydrogenase (LDH) assay. Western immunoblotting and quantitative reverse-transcription polymerase chain reaction (qRT-PCR) were used to quantify interleukin-18 (IL-18), interleukin-1β (IL-1β), and interleukin-6 (IL-6). The production of reactive oxygen species (ROS) in macrophages was detected by ROS kit. The expression of pan-apoptotic proteins in macrophages was measured by qRT-PCR and Western immunoblotting. Drug-Resistant E. coli inhibited cell viability and enhanced apoptosis in the cellular model. In cells treated with amygdalin, this compound can inhibit cell apoptosis and reduce the expression of pro - inflammatory cytokines such as IL-1β, IL-18 and IL-6. Additionally, it decreases the production of PANoptosis proteins, Furthermore, amygdalin lowered the levels of reactive oxygen species induced by drug-resistant E. coli, in cells, demonstrating its antioxidant effects. Amygdalin, a drug with a protective role, alleviated cell damage caused by drug-resistant E. coli in human macrophages by inhibiting the PANoptosis signaling pathway.
Bifidobacteria has been suggested to exert health promoting effects on the host by maintaining microbial flora and modulating immune functions in the human intestine. We assessed modulatory effects of the different cell fractions of Bifidobacterium sp. BGN4 on macrophage cells and other immune cells from the spleen and Peyer's patches (PP) of mouse. Cell free extracts (CFE) of the BGN4 fractions induced well-developed morphological changes in the macrophages and increased the phagocytic activity more effectively than other fractions in the mouse peritoneal cells. Nitric oxide (NO) production was significantly reduced by both the cell walls (CW) and CFE in the cultured cells from the spleen and PP. The production of interleukin-6 (IL-6) and interleukin-10 (IL-10) was eminent in the spleen cells treated with experimental BGN4 cell fractions. However, in the PP cells, IL-6 was slightly decreased by the treatment with the whole cell (WC) and CW, whereas IL-10 was significantly increased by the treatment with the CW and CFE. These results suggest that different types of bifidobacterial cell fractions may have differential immunomodulatory activities depending on their location within the host immune system.
Enzyme-assisted hydrolysis is frequently used as a cost-effective and efficient method to obtain functional ingredients from bioresources. This study involved the enzyme-assisted hydrolyzation and purification of fucoidan from Ecklonia maxima stipe and the investigation of its anti-inflammatory activity in lipopolysaccharide (LPS)-induced RAW 264.7 cells. Fucoidans of Viscozyme-assisted hydrolysate from E. maxima (EMSFs) harvested in Jeju, Korea. Structural and chemical characterizations were performed using fourier transform infrared spectroscopy, scanning electron microscope, and monosaccharide analysis. Among fucoidans, EMSF6 was rich in fucose and sulfate and had a similar structural character to commercial fucoidan. EMSF6 showed a strong inhibitory effect on nitric oxide generation in LPS-induced RAW 264.7 cells and significantly decreased the production of LPS-induced pro-inflammatory cytokines, including interleukin-6, interleukin-1β, and tumor necrosis factor α. The anti-inflammatory potential of EMSF6 was mediated through the downregulation of inducible nitric oxide synthase and cyclooxygenase-2 expression. Thus, fucoidans from E. maxima stipe are promising candidates for functional food products.
Lee, Keum Hwa;Oh, Ji Young;Seong, Su-Bin;Ha, Tae-Sun;Shin, Jae Il
Childhood Kidney Diseases
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v.22
no.1
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pp.22-27
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2018
Purpose: Podocytes are important architectures that maintain the crucial roles of glomerular filtration barrier functions. Despite this structural importance, however, the mechanisms of the changes in podocytes that can be an important pathogenesis of minimal change nephrotic syndrome (MCNS) are not clear yet. The aim of this study was to investigate whether apoptosis is induced by interleukin (IL)-13 in cultured human podocytes. Methods: Human podocytes were treated with different IL-13 doses and apoptotic cells were analyzed using terminal deoxynucleotidyl transferase dUTP nick-end labeling (TUNEL assay) and fluorescence-activated cell sorting (FACS). Results: The IL-13 increased the number of TUNEL-positive cells in a dose-dependent manner at 6 and 18 hours (P<0.05 and P<0.05, respectively). The apoptosis rate was appeared to be increased slightly in the IL-13-stimulated podocytes (8.63%, 13.02%, and 14.46%; 3, 10 and 30 ng/mL, respectively) than in the control cells (7.66%) at 12 hours by FACS assay. Conclusion: Our study revealed that IL-13 expression may increase podocyte apoptosis. Blocking the IL-13 signal pathway can potentially play an important role in regulating the apoptosis of podocytes.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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