• Journal of Periodontal and Implant Science
• /
• 제30권2호
• /
• pp.335-347
• /
• 2000

치주질환의 진행에 따른 치주조직파괴에 있어 치주조직내 다양한 세포외기질성분을 분해하는 matrix metalloproteinase-3(MMP-3)는 염증반응에 관여하는 세포들로부터 분비된 interleukin-$1{\beta}$(IL-$1{\beta}$)에 의해 유도될 수 있다. 이전 연구에서 치주인대세포에서의 MMP-3 생성이 tetracycline 및 tetracycline 유도체에 의하여 억제될 수 있음이 보고되었다. 이 연구의 목적은 metronidazole 및 doxycycline-HCl을 적용한 후 치은섬유아세포에 IL $1{\beta}$를 적용하여 MMP-3의 생성을 유도한 후 이들 약물들이 치은섬유아세포의 MMP-3 생성에 미치는 영향을 조사하기 위한 것이다. 건강한 성인으로부터 치주질환이 이환되지않은 상악 제2대구치 후방의 건강한 치은결합 조직을 절취하여 치은섬유아세포를 배양한 후 다양한 농도의 metronidazole (10-$200{\mu}g/m{\ell}$) 및 doxycyline-HCl(10-$200{\mu}g/m{\ell}$)을 각각 적용하여 1시간 배양하고 proMMP-3의 활성화를 유도하기 위하여 25ng/ml의 IL-$1{\beta}$을 투여한 후 24시간 배양하여 배양된 세포의 상층 배양액을 추출하고 proMMP-3 ELISA kit를 이용하여 비색정량하였다. 비색정량을 통하여 얻어진 자료들은 독립 t-test와 일원분산분석(ANOVA) 및 사후검정으로 Duncan test를 시행하여 다음과 같은 결과를 얻었다. 1. Metronidazole 경우 10-$200{\mu}g/ml$의 모든 농도군에서 proMMP-3의 활성도가 억제되었다(p<0.05). 2. Doxycycline-HCl의 경우 $100{\mu}g/ml$ 이하의 농도군에서는 proMMP-3의 활성도가 억제되었으나(p<0.05), $200{\mu}g/ml$ 농도에서는 proMMP-3의 활성도가 상승되었다(p<0.05). 3. Metronidazole과 doxycycline-HCl의 대조군에 대한 각 실험농도군의 proMMP-3 생성의 감소비율 비교시 모든 농도군에서 metronidazole이 doxycycline-HCl보다 더 높은 감소율을 보였다. 이상과 같은 결과는 metronidazole(10-$200{\mu}g/ml$)이 doxycycline-HCl($100{\mu}g/ml$ 이하) 보다 더 광범위한 혈중농도에서 IL-$1{\beta}$의한 인체치은섬유아세포내 MMP-3의 활성도를 효과적으로 억제할 수 있음을 시사하였다.

• 대한치과의사협회지
• /
• 제46권12호
• /
• pp.742-754
• /
• 2008

이 연구의 목적은 초기 및 중등도 치주염 환자에서 전동칫솔을 사용할 경우 임상 지수의 향상 정도와 치주원인균의 정량적 감소 효과를 12주의 연구 기간 동안 평가하는 것이다. $25{\sim}55$세의 환자 80명을 대상으로 12주 동안 진행하였으며, 치태지수 0.5 이상, 치은지수 0.5 이상을 나타내는 대상에서 일반 칫솔 혹은 전동칫솔 ($Sonicare^{(R)}$ Elite, Philips Oral Healthcare Inc., Snoqualmie, Washington, USA) 사용 군을 임의로 선정하였다. 하루 2회, 매 회 2분 간 사용하고, 각 군의 칫솔 사용을 교육하였다. 임상지수는 치태지수 (PI; Silness & $L{\ddot{o}}e$), 치은지수 (GI; $L{\ddot{o}}e$ & Silness), 탐침 후 출혈 부위 (%), 치주낭 깊이 부착소실을 초진 1, 4, 12주에 측정하였다. Interleukin-1 (IL-1), MMP-8과 치은연하치태샘플에서 채취한 4 종류의 치주원인균 (Actinomyces visco년, Porphyromonas gingivalis, Streptococcus sanguis, Tannerella forsythensis)에 대한 16S rRNA test는 초진, 1주, 12주에 측정하였다. 측정 결과 전동칫솔과 일반 칫솔 모두 임상지수의 유의한 감소가 나타났으며, 치은지수는 일반칫솔에 비해 전동칫솔에서 감소효과가 통계적으로 더 우수하게 나타났다 (p<0.001). 탐침 후 출혈의 감소는 전동칫솔에서 76.73%, 일반칫솔에서 44.57% 정도로 전동칫솔 군이 더 우수하게 나타났다. 치주낭 깊이 감소는 초진에 비해 전동칫솔 군에서 18.55%, 일반칫솔 군에서 14.81% 정도로 나타났으며, 초진과 비교하였을 때 부착수준의 향상 정도는 전동칫솔 25.24%, 일반 칫솔 16.94% 정도로 두 군 모두 통계적으로 유의하게 개선되었다 (p < 0.001). 두 군 모두 IL-1 beta, MMP-8 농도의 감소가 있었으며, 치주원인균 중 A.viscosus, P.gingivalis, T.forsythensis 역시 두 군 모두에서 초진에 비해 12주에 유의한 감소를 나타내었으나, S.sanguis는 전동칫솔 군에서만 12주에 유의한 감소가 있었다. 이상의 결과에서 12주 간의 연구 기간 동안 초기 및 중등도 치주염 환자에서 소니케어 전동칫솔의 사용은 임상지수 및 치주 원인균 감소에 통계적으로 유의한 개선 효과를 나타내었다.

• 동의생리병리학회지
• /
• 제18권3호
• /
• pp.880-886
• /
• 2004

Phellinus igniarius has been clinically used for the treatment of hemorrhoidal fistula, dysmenorrhea and the prevention of cancer in traditional oriental medicine. Recent studies showed that Phellinus igniarius produced anti-cancer, anti-metastasis and immuno-modulatory effects, There is lack of studies regarding the effects of Phellinus igniarius on the immunological activities. The present study was conducted to evaluate the effect of Phellinus igniarius on the regulatory mechanism of cytokines and nitric oxide (NO) for the immunological activities in Raw 264,7 cells. After the treatment of Phellinus igniarius water extract, cell viability was measured by MTT assay, NO production was monitored by measuring the nitrite content in culture medium. COX-2 and iNOS were determined by Immunoblot analysis, and levels of cytokine were analyzed by sandwich immunoassays. Results provided evidence that Phellinus igniarius inhibited the production of nitrite and nitrate (NO), inducible nitric oxide synthase (iNOS), interleukin-1β (IL-1β) and interleukin-6 (IL-6), and the activation of phospholylation of inhibitor κBα (p-IκBα) in Raw 264.7 cells activated with lipopolysaccharide (LPS). These findings suggest that Phellinus igniarius can produce anti-inflammatory effect, which may play a role in adjunctive therapy in Gram-negative bacterial infections.

• Journal of Ginseng Research
• /
• 제42권1호
• /
• pp.50-56
• /
• 2018

Background: Saponins from Panax japonicus (SPJ) are the most abundant and main active components of P. japonicus, which replaces ginseng roots in treatment for many kinds of diseases in the minority ethnic group in China. Our previous studies have demonstrated that SPJ has the effects of anti-inflammation through the mitogen-activated protein kinase (MAPK) and nuclear factor kappa B (NF-${\kappa}B$) signaling pathways. The present study was designed to investigate whether SPJ can modulate intestinal tight junction barrier in aging rats and further to explore the potential mechanism. Methods: Aging rats had been treated with different doses (10 mg/kg, 30 mg/kg, and 60 mg/kg) of SPJ for 6 mo since they were 18 mo old. After the rats were euthanized, the colonic samples were harvested. Levels of tight junctions (claudin-1 and occludin) were determined by immunohistochemical staining. Levels of proinflammatory cytokines (interleukin-$1{\beta}$ and tumor necrosis factor-${\alpha}$) were examined by Western blot. NF-${\kappa}B$ and phosphorylation of MAPK signaling pathways were also determined by Western blot. Results: We found that SPJ increased the expression of the tight junction proteins claudin-1 and occludin in the colon of aging rats. Treatment with SPJ decreased the levels of interleukin-$1{\beta}$ and tumor necrosis factor-${\alpha}$, reduced the phosphorylation of three MAPK isoforms, and inhibited the expression of NF-${\kappa}B$ in the colon of aging rats. Conclusion: The studies demonstrated that SPJ modulates the damage of intestinal epithelial tight junction in aging rats, inhibits inflammation, and downregulates the phosphorylation of the MAPK and $NF-{\kappa}B$ signaling pathways.

• Tuberculosis and Respiratory Diseases
• /
• 제45권4호
• /
• pp.861-869
• /
• 1998

연구배경: 조식의 손상에의한 염증반응후 회복과정에서 정상조직으로 환원되지 않고 일부는 결체조직으로 대체되어 섬유화가 일어난다. 이 비정상적 섬유화에 의해 섬유화증이 일어나 조직의 원래 기능을 상설하기도 한다. 이때 염증에 관계되는 세포로부터 분비된 여러종류의 cytokine들이 섬유모세포의 증식과 교원질 합성을 조절한다. 이에 관계된 cytokine들의 상호 관련성과 섬유모세포증식에의 영향을 알아내어 조절함으로써 섬유화증을 예방하고 치료하는데 도움을 줄 수 있다. 본 연구에서는 proinflammatory cytokine인 TNF-$\alpha$, IL-1$\beta$, IL-6와 섬유모세포의 증식에 큰 영향을 미치는 TGF-$\beta$의 상호 관련성을 알아보고자 하였다. 방 법: 섬유모세포는 사람 태아의 섬유모세포주인 MRC-5를 사용하였으며, 0, 0.5, 1, 5, 10, 20%의 우태아 혈청을 첨가하여 1, 2, 3, 4, 5일째의 MRC-5 증식을 측정하여, 최소한으로 MRC-5의 증식을 억제하면서 생존을 유지시킬 수 있는 배양액중 혈청농도를 먼저 확정한 후, TGF-$\beta$, TNF-$\alpha$, IL-1$\beta$, IL-6를 각각 RPMI 배지에 첨가하여 $37^{\circ}C$, 5% $CO_2$ 보온기에서 96 시간동안 배양하여 0.5 % naphthol blue black으로 염색한 뒤, 50mM의 NaOH로 naphthol blue black을 유리시켜 630nm에서의 분광흡수를 잼으로써 MRC-5의 수를 측정하였다. 또한 TGF-$\beta$와 다른 cytokine의 관련성을 알아보기위해 TGF-$\beta$와 함께 IL-1$\beta$, IL-6, TNF-$\alpha$를 각각 배지에 첨가하여 96 시간 배양 후, 위와 동일한 방법으로 MRC-5의 수를 측정하였으며, TNF-$\alpha$와 IL-1$\beta$, IL-6의 상호 관련성을 알아보기 위해 TNF-$\alpha$와 함께 IL-1$\beta$, IL-6를 각각 배지에 첨가하여 96 시간 배양한 뒤 위와 동일한 방법으로 MRC-5의 수를 측정하였고, 마지막으로 TGF-$\beta$와 TNF-$\alpha$의 섬유모세포 증식에 미치는 상호 관련성을 알아보기 위하여 TGF-$\beta$와 TNF-$\alpha$를 함께 배지에 첨가하여 96 시간 배양 후, MRC-5의 수를 역시 통일한 방법으로 측정하였다. 결 과: 1. 최소한으로 MRC-5의 증식을 억제하면서 생존을 유지할 수 있는 배양액중 혈청 농도를 측정한 결과, 0.5% 혈청 농도에서 MRC-5의 증식이 50% 증가된 상태로 배양 6일째 까지 유지되었다. 따라서 이후의 실험에서 사용된 배양액에는 0.5%의 우태아혈청을 포함시켰다. 2. 각 cytokine이 MRC-5 증식에 미치는 영향 0.5%의 우태아혈청만이 있는 상태에서의 MRC-5 증식 정도를 100%로 기준하였을 때, IL-1$\beta$는 50 ng/ml의 농도에서만 45%의 증식 촉진효과를 보였고, IL-6는 영향이 없었으며, TGF-$\beta$와 TNF-$\alpha$는 농도에 의존성을 보이며 MRC-5의 증식을 최고 160% 까지 증가시켰다. 3. TGF-$\beta$에 의한 MRC-5 증식능증가에 IL-1$\beta$, IL-6, TNF-$\alpha$가 미치는 영향 50 ng/ml의 TGF-$\beta$ 단독 자극에 비하여, IL-1$\beta$ 혼합배양시 농도에 의존성으로 보이며 최고 64% 까지, TNF-$\alpha$ 혼합배양시 농도에 의존성을 보이며 최고 159% 까지 MRC-5의 증식을 증가시켰다. IL-6는 약한 억제효과를 보였으나 TGF-$\beta$에 의한 MRC-5 증식능 증가에 영향을 미치지 못하였다. 4. TNF-$\alpha$에 의한 MRC-5 증식능 증가에 IL-1$\beta$, IL-6가 미치는영향 50 ng/ml의 TNF-$\alpha$ 단독자극에 비하여, IL-1$\beta$을 혼합 배양하였을때 농도에 의존성을 보이며 최고 50%까지 MRC-5의 증식을 억제하였고, IL-6는 영향을 미치지 못하였다. 5. TNF-$\alpha$와 TGF-$\beta$의 MRC-5 증식능 증가에서의 상호관련성 50 ng/ml의 TGF-$\beta$와 TNF-$\alpha$는 MRC-5의 증식을 각각 89%, 135% 증가시켰으며, TGF-$\beta$와 TNF-$\alpha$ 공존시에는 MRC-5의 증식을 222% 증가시켰다. 결 론: TNF-$\alpha$ TGF-$\beta$, IL-1$\beta$의 순서로 MRC-5에 대한 증식 자극효과가 있으며 IL-6는 증식을 억제하는 효과가 있었다. TGF-$\beta$의 MRC-5에 대한 증식 자극효과는 IL-1과 TNF-$\alpha$에 의해 첨가효과를 관찰할 수 있었고, TNF-$\alpha$의 MRC-5 증식 자극효과는 IL-1$\beta$에 의하여 억제되었다.

• BMB Reports
• /
• 제51권6호
• /
• pp.308-313
• /
• 2018

Small-molecule inhibitors are widely used to treat a variety of inflammatory diseases. In this study, we found a novel anti-inflammatory compound, 1-[(2R,4S)-2-methyl-4-(phenylamino)-1,2,3,4-tetrahydroquinolin-1-yl]prop-2-en-1-one (MPQP). It showed strong anti-inflammatory effects in lipopolysaccharide (LPS)-stimulated RAW 264.7 macrophages. These effects were exerted through the inhibition of the production of NO and pro-inflammatory cytokines, such as interleukin (IL)-6, $IL-1{\beta}$, and tumor necrosis $factor-{\alpha}$ ($TNF-{\alpha}$). Furthermore, MPQP decreased the expression levels of inducible NO synthase (iNOS) and cyclooxygenase 2 (COX-2). Additionally, it mediated the inhibition of the phosphorylation of p38, c-Jun N-terminal kinase (JNK), the inhibitor of ${\kappa}B{\alpha}$ ($I{\kappa}B{\alpha}$), and their upstream kinases, $I{\kappa}B$ kinase (IKK) ${\alpha}/{\beta}$, mitogen-activated protein kinase kinase (MKK) 3/6, and MKK4. Furthermore, the expression of IL-1 receptor-associated kinase 1 (IRAK1) that regulates $NF-{\kappa}B$, p38, and the JNK signaling pathways, was also increased by MPQP. These results indicate that MPQP regulates the IRAK1-mediated inflammatory signaling pathways by targeting IRAK1 or its upstream factors.

• Journal of Periodontal and Implant Science
• /
• 제23권1호
• /
• pp.109-126
• /
• 1993

Refractory periodontitis manifest progressive attachment loss in a rapid and unrelenting manner regardless of the type or frequency of therapy applied. The purpose of this study was ta evaluate the relation between the level of cytokines in GCF and periodontopathic microflora with disease activity of refractory periodontitis. Selection of patients with refractory periodontitis (7 males, 3 females) were made by long term clinical observation including conventional clinical history and parameters. Teeth that showed pocket depth greater than 6mm were selected as sample teeth. Subjects were examined at baseline and after 3 months. Prior to baseline test, individual acrylic stent was fabricated. Reference grooves were made on each sample tooth site. Pocket depth and attachment loss were measured by Florida Probe. Gingival index was measured at 4 sites each sample teeth. Disease activity was defined as attachment loss of ${\ge}$ 2.1mm, as determined by sequential probing and tolerance method. The pattern and amount of alveolar bone resorption was observed with quantitative digital subtraction image processing radiography. Morphological analysis of subgingival bacteria was taken by phase contrast microscopy. Predominant cultivable bacterial distribution and frequency were compared between disease-active and disease-inactive site using immunofluorescence microscopy and selective microbial culturing. Levels of $interleukin-l{\beta}$, 2, 4, 6 and $TNF-{\alpha}$ in GCF and blood serum sample were quantified by ELISA. In active sites, P. intermedia was significantly increased to compare with inactive site. $IL-1{\beta}$, IL-2, IL-6 and $TNF-{\alpha}$ in GCF were increased in active sites and IL-2 in serum was increased in active patients significantly. Alveolar bone loss in active site was correlated with $IL-1{\beta}$, IL-2 in GCF. And loss of attachment in active site was correlated with IL-2 in GCF. These results demonstrate that IL-2 in serum, $IL-1{\beta}$, IL-2, IL-6 and $TNF-{\alpha}$ in GCF, P, intermedia might be used as possible predictors of disease activity in refractory periodontitis before it is clinically expressed as attachment loss and quantitative alveolar bone change.

• IMMUNE NETWORK
• /
• 제6권1호
• /
• pp.27-32
• /
• 2006

Background: Chronic inflammation in the brain has known to be associated with the development of a various neurological diseases including dementia. In general, the characteristic of neuro-inflammation is the activated microglia over the brain where the pathogenesis occurs. Pro-inflammatory repertoires, interleukin-1${\beta}$ (IL-1${\beta}$) and nitric oxide (NO), are the main causes of neuro-degenerative disease, particularly in Alzheimer's disease (AD) which is caused by neuronal destruction. Those pro-inflammatory repertoires may lead the brain to chronic inflammatory status, and thus we hypothesized that chronic inflammation would be inhibited when pro-inflammatory repertoires are to be well controlled by inactivating the signal transduction associated with inflammation. Methods: In the present study, we examined whether biphenyl dimethyl dicarboxylate (DDB), an active compound from Schizandra chinensis Baillon, inhibits the NO production by a direct method using Griess reagent and by RT-PCR in the gene expression of inducible nitric oxide synthase (iNOS) and IL-1${\beta}$. Western blots were also used for the analysis of NF-${\kappa}B$ and I${\kappa}B$. Results: In the study, we found that DDB effectively inhibited IL-1${\beta}$ as well as NO production in BV-2 microglial cell, and the translocation of NF-${\kappa}B$ was comparably inhibited in the presence of DDB comparing those to the positive control, lipopolysaccharide. Conclusion: The data suggested that the DDB from Schizandra chinensis Baillon may play an effective role in inhibiting the pro-inflammatory repertoires which may cause neurodegeneration and the results imply that the compound suppresses a cue signal of the microglial activation which can induce the brain pathogenesis such as Alzheimer's disease.

• 대한예방한의학회지
• /
• 제15권1호
• /
• pp.49-69
• /
• 2011

Objective : The object of this study was to observe the effects of Lonicerae Flos (LF) aqueous extracts on lipopolysaccharide (LPS)-induced rat acute lung injury. Method : Five different dosages of LF extracts were orally administered once a day for 28 days before LPS treatments, and then all rats were sacrificed after 5 hour-treatment of LPS. Eight groups of 16 rats each were used in the present study. The following parameters caused by LPS treatment were observed ; body weights, lung weights, pulmonary transcapillary albumin transit, arterial gas parameters (pH, $PaO_2$ and $PaCO_2$) bronchoalveolar lavage fluid (BALF) protein lactate dehydrogenase (LDH), and proinflammatory cytokines tumor necrosis factor-${\alpha}$ (TNF-${\alpha}$), interleukin-$1{\beta}$ (IL-$1{\beta}$) contents, total cell numbers, neutrophil and alveolar macrophage ratios, lung malondialdehyde (MDA), myeloperoxidase (MPO), proinflammatory cytokines TNF-${\alpha}$ and IL-$1{\beta}$ contents. In addition, the histopathologic changes were observed in the lung in terms of luminal surface of alveolus, thickness of alveolar septum, number of polymorphonuclear neutrophils. Result : As results of LPS-injection, dramatical increases in lung weights, pulmonary transcapillary albumin transit increases, increases in $PaCO_2$, decreases in pH of arterial blood and $PaO_2$, increases of BALF protein, LDH, TNF-${\alpha}$ and IL-$1{\beta}$ contents, total cells, neutrophil and alveolar macrophage ratios, TNF-${\alpha}$ and IL-$1{\beta}$ contents increases were detected with decreases in LSA and increases of alveolar septum and PMNs numbers, respectively as compared with intact control. These are means that acute lung injuries (resembling acute respiratory distress syndrome) are induced by treatment of LPS mediated by inflammatory responses, oxidative stress and related lipid peroxidation in the present study. However, these LPS-induced acute lung injuries were inhibited by 28 days continuous pretreatment of 250 and 500mg/kg of LF extracts. Because of lower three dosages of LF treated groups, 31.25 and 62.5 and 125mg/kg did not showed any favorable effects as compared with LPS control, the effective dosages of LF in LPS-induced acute lung injuries in the present study, is considered as about 125mg/kg. The effects of 250mg/kg of LF extracts showed almost similar effects with ${\alpha}$-lipoic acid 60mg/kg in preventing LPS-induced acute lung injuries. Conclusion : It seems that LF play a role in protecting the acute respiratory distress syndrome caused by LPS.

• Tuberculosis and Respiratory Diseases
• /
• 제60권5호
• /
• pp.554-563
• /
• 2006

연구 배경: 대도시의 대기오염은 점차 악화되어 시민의 건강을 위협하고, 심 폐 질환의 발병률과 이 로 인한 사망률을 증가시키고 있다. 서울시 도로가의 PM이 $TNF-{\alpha}$와 $IL-1{\beta}$의 생성에 직접적으로 어떠한 영향을 미치는지와 PM의 노출이 LPS의 $TNF-{\alpha}$와 $IL-1{\beta}$의 생성효과에는 어떠한 영향을 미치는지를 평가하고자 하였다. 방 법: 폐렴이 있는 흰쥐와 SPF 흰쥐의 폐포대식세포 각각에 PM을 농도별로 처리하여 분비되는 $TNF-{\alpha}$와 $IL-1{\beta}$의 농도를 측정하였다. 측정 방법으로는 western blot, ELISA 및 세포면역화학염색법을 이용하였다. 또한 동일 PM 농도에서 배양시간을 달리하여 위와 같이 측정하였다. 결 과: SPF인 흰쥐에서 분리된 페포대식세포에 PM을 단독으로 투여하였을 때 대조군에 비해서 $TNF-{\alpha}$와 $IL-1{\beta}$의 생성도가 모든 투여군에서 유의하게 증가하였으나, 투여용량의 증가에 따른 유의성은 없었다. 그러나 염증성인 쥐에서 분리된 폐포대식세포에서는 모든 투여군에서 대조군에 비하여 통계학적으로 유의하게 증가하였으며, PM 투여농도의 증가에 따른 생성량도 유의하게 증가하였다. 결 론: PM을 장기간 혹은 일정 농도 이상으로 흡입할 경우 폐포대식세포의 $TNF-{\alpha}$와 $IL-1{\beta}$의 분비에 영향을 미쳐 새로운 폐질환을 유발할 수 있다. 그러므로 기존에 염증성 폐질환이나 기관지천식이 있는 환자가 미세먼지를 흡입할 경우에는 $TNF-{\alpha}$와 $IL-1{\beta}$의 생성에 커다란 영향을 미쳐 호흡기 질환을 더욱 악화시킬 가능성이 있을 것으로 추정된다.