Jin, Hee;Jin, Jung-Sook;Park, Ho-Sun;Kim, Sung-Kwang;Lee, Jai Youl;Kim, Hee-Sun
IMMUNE NETWORK
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v.2
no.1
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pp.12-18
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2002
Interferon-${\gamma}$ (IFN-${\gamma}$) is well known as a potent inducer in monokine induced by IFN-${\gamma}$ (Mig) mRNA expression. Although lipopolysaccharide (LPS) alone is weakly effective on Mig mRNA expression. the stimulation of LPS and IFN-${\gamma}$ (LPS/IFN-${\gamma}$ simultaneously has been shown to synergize to produce a high level of Mig mRNA in mouse peritoneal macrophages. In this study, interleukin-10 (IL-10) was found to suppress the LPS/IFN-${\gamma}$-induced Mig mRNA expression in cell type- and mouse strain-specific fashion, but IFN-${\gamma}$ alone-induced Mig mRNA was unaffected by IL-10 under identical experimental conditions. The IL-10-mediated suppression of LPS/IFN-${\gamma}$-stimulated Mig mRNA expression was dependent on the concentration of IL-10, and was prevented when the agent was added 2 hours after LPS/IFN-${\gamma}$ treatment. The suppressive action of IL-10 was dependent on a protein synthesis. However, IL-10 did not reduce the stability of LPS/IFN-${\gamma}$-induced Mig mRNA. These data may have important implications for a previously unrecognized role for IL-10 as a regulator of synergistic effect of LPS on the IFN-${\gamma}$-induced expression of the Mig gene in macrophages.
Recently, interleukin 34 (IL-34) was identified as the second functional ligand for macrophage colony-stimulating factor receptor (M-CSFR). IL-34 functions similarly to M-CSF through its binding to the M-CSFR. There is still insufficient information on IL-34 in chickens, which has until now been reported only through predicted sequences and not through experimental research. Thus, to confirm its expression and to determine its potent biological activity, several chicken lines and cell lines were used. Cloning of recombinant chicken IL-34 and M-CSF genes was performed to investigate their modulatory effects on proinflammatory cytokine expression in vitro. The expression levels of IL-34, M-CSF, and M-CSFR genes were upregulated in broiler chickens with leg dysfunction (cause unknown). However, IL-34 was downregulated in most pathogen-stimulated tissues. M-CSFR expression was enhanced by recombinant IL-34 and M-CSF proteins in vitro. IFN-γ expression was enhanced by recombinant IL-34, but not by M-CSF. However, IL-12 expression was not regulated in any of the treated cells, and IL-1β was decreased in all tissues. These results indicate that IL-34 and M-CSF have roles in both the classical and alternative macrophage activation pathways. Collectively, our findings demonstrate the expression of IL-34 in chickens for pathogenic trials, both in vitro and in vivo. Our results suggest that the IL-34 protein plays a role in both pro- and anti-inflammatory functions in macrophages. Therefore, further research is needed to determine the cytokines or chemokines that can be induced by IL-34 and to further elucidate the functions of IL-34 in the inflammatory pathway.
목적 - Inflammatory cytokine으로 알려진 interleukin 1$\beta$, tumor necrosis factor $\alpha$는 치수 및 치근단질환에서 주요한 역할을 하며, 골흡수를 자극하고 골형성을 방해하는 것으로 알려져 왔다. 이들 cytokine은 주로 단핵세포/대식세포가 형성하는 것으로 알려져 왔으나 최근 연구에 의하면, PMN도 또한 이 런 cytokine들을 형성할 수 있다는 것이 보고되었다. 오랫동안 염증반응이나 면역반응에서 PMN의 역할이 주로 포식작용 을 통해 병원균을 제거하는 것이라고만 생각되어져 왔던 것을 생각하면, 새로운 발견이라 할 수 있다. 또, PMN은 IL-1ra도 생성하는 것으로 보고되었는데, IL-1ra란 IL-1의 생물학적 작용을 방해하는 인자이므로, IL-1과 밀접한 관련을 가지는 질환의 발전에 있어서 IL-1과 IL-1ra의 balance가 매우 중요한 역할을 할 것으로 생각된다 즉, IL-1ra는 IL-1$\beta$의 proinflammatory effect를 제한할 수 있는 negative feedback mechanism이라고 할 수 있다. 이 연구의 목적은 치수 및 치근단 조직의 감염에 있어서 주요 원인균인 Porphyromonas endodontalis의 LPS가 PMN의 IL-1$\beta$, TNF-$\alpha$, IL-1ra생성에 미치는 영향을 단백질과 mRNA 수준에서 관찰하는 것이다. 잘 알려진 non-oral bacterium인 E. coli의 LPS를 positive control로 사용하였으며, IL-1ra가 IL-1$\beta$의 생물학적 작용을 방해하는 작용을 관찰하기 위해, IL-1의 biological assay도 시행하였다. 방법 - P. endodontalis ATCC 35406을 혐기성 조건에서 배양하고, hot phenol-water extraction의 방법으로 LPS를 추출(crude LPS)한 후, 제조회사로부터 구입한 E. coli의 crude LPS와 함께 정제하였다. 건강한 자원자들을 대상으로 말초혈액을 채취한 후 dextran sedimentaion을 거쳐 Lymphoprep을 이용하여 PMN층을 분리하였다. 얻어진 세포들은 RPMI 1640 (supplemented with fetal bovine serum antibiotics)에 5$\times$$10^{6}$cells/ml이 되도록 resuspend시킨 후 각기 다른 농도 (0, 0.01, 0.1, 1 and 10$\mu$g/ml)의 LPS를 처리하여, 각기 다른 시간(Northern blot : 1, 2, 4시간 ELISA : 2, 6, 12, 18시간)동안 37$^{\circ}C$ in 5% $CO_2$ 의 조건으로 배양하였다. 상층액은 -7$0^{\circ}C$에 보관하였다가 추후에 ELISA를 이용한 단백질 농도 측정과 IL-1 biological assay에 사용되어졌으며, 배양된 세포로부터 RNA를 추출하여 Northern hybridization을 통해 mRNA expression을 관찰하였다. (중략)
Ginseng saponin had an effect on the proliferation and viability of cultured murine thymocytes. When the thymocytes were cultured in various concentrations of ginseng saponin, the number of thymocytes increased at $10^{-5}$% ginseng saponin but decreased at $10^{-5}$%. There was little change in the number of thymocytes when cultured in IL 2(Interleukin 2), a factor known for its influence on the proliferation and maturation of thymocytes. When the thymocytes were cultured in various concentrations of IL 2 with $10^{-5}$% ginseng saponin, the number of total cells increased at 1.5% or 3% IL 2 when cultured for 9 hours, or at 6% IL 2 for 12, 24, or 48 hours. But there was little change in the number of viable cells. In vitro, ginseng saponin had an effect on the activity of ADA(Adenosine Deaminase), an enzyme known to affect the production of IL 2. There was a 25% increase in the activity of ADA in the presence of $10^{-5}$% ginseng saponin.
Park, Jeong-Ho;Sung, Haan-Woo;Yoon, Byung-Il;Pak, Son-Il;Kwon, Hyuk-Moo
Korean Journal of Microbiology
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v.45
no.2
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pp.91-98
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2009
Infectious bursal disease (IBD) caused by the infectious bursal disease virus (IBDV) has an important economic impact on the poultry industry worldwide. This study examined the adjuvant effects of a plasmid encoding chicken interleukin-6 (pcDNA-ChIL-6) and levamisole (LMS) on in ovo prime-boost vaccination using a genetic vaccine (pcDNA-VP243) to prime in chicken followed by a killed-vaccine boost. A pcDNA-VP243 was injected into the amniotic sac alone or in combination with a pcDNA-ChIL-6 or LMS at embryonation day 18, followed by an intramuscular injection of killed IBD vaccine at 1 week of age. The chicken were orally challenged with very virulent IBDV (vvIBDV) strain at 3 weeks of age and observed for 10 days. No mortality was observed in the groups that received the pcDNA-VP243 alone and pcDNA-VP243 plus pcDNA-ChIL-6 or LMS compared to 100% mortality in unvaccinated challenge control group. However, as determined by bursal damage (the presence of IBDV RNA, B/B ratio, and lesion score), a pcDNA-VP243 alone group was superior to pcDNA-VP243 plus pcDNA-ChIL-6 or LMS groups in the protection against post-challenge. These findings suggest that in ovo priming with genetic vaccine and boosting with killed vaccine is an effective strategy for protecting chicken against vvIBDV and the addition of pcDNA-ChIL-6 or LMS did not enhance protective immunity.
The hawthorn fruit (Crataegus pinnatifida Bunge var. typica Schneider) is used as a traditional medicine in Korea. The objective of this study was to understand the mechanisms of the anti-inflammatory effects of the water fractionated portion of hawthorn fruit on a lipopolysaccharide (LPS)-stimulated RAW 264.7 cellular model. The level of nitric oxide (NO) production in the water fraction and LPS-treated RAW 264.7 cells were determined with an ELISA. The cytotoxicity of the water fraction and LPS was measured with an MTT assay. Expression of nitric oxide synthase (iNOS), cyclooxygenase-2 (COX-2), tumor necrosis factor (TNF)-${\alpha}$, interleukin 6 (IL-6), and interleukin $1{\beta}$ (IL-$1{\beta}$) mRNA were analyzed with a reverse transcription polymerase chain reaction (RT-PCR). The water fraction of hawthorn fruit was determined to be safe and significantly inhibited NO production in LPS-stimulated RAW 264.7 cells and suppressed COX-2, (TNF)-${\alpha}$, IL-$1{\beta}$, and IL-6 expression. The observed anti-inflammatory effects of the water fraction of hawthorn fruit might be attributed to the down-regulation of COX-2, (TNF)-${\alpha}$, IL-$1{\beta}$, and IL-6 expression in LPS-stimulated RAW 264.7 cells.
Aim: We conducted a case-control matched study to investigate the role of IL-16 gene polymorphisms, rs4072111, rs1131445, rs4778889 and rs11556218, in the risk of gastric cancer in a Chinese population, also performing subgroup analysis by subsites. Methods: To test the hypothesis of involvement, we analyzed the four SNPs of IL16 in 347 cancer patients and 368 controls. Demographic data and other information were collected using a newly designed questionnaire. Genotyping of IL16 (rs4072111, rs1131445, rs4778889 and rs11556218) was performed in a 384-well plate format on the MassARRAY(R) platform. Results: In our study, we found the gastric cancer patients were more likely to be male and have a family history of cancer (P<0.05). We found the rs4778889 CC and rs11556218 GG genotype was significantly associated with 1.97 and 1.84-fold increased risk of non-cardia gastric cancer, while we did not find significant association between the four IL-16 SNPs and cardia gastric cancer. Conclusions: In conclusion, our study indicated that IL-16 rs4778889 CC and rs11556218 GG genotypes are associated with an increased risk of non-cardia gastric cancer in a Chinese population. Our results offer insights into the influence of IL-16 on development of gastric cancer.
Kim, Yun-Ha;Cho, Kwang-Ho;Shin, Sun-Ho;Lee, In;Kim, Eun-Sook;Youn, Myung-Ja;Kim, Jin-Kyung;Moon, Byung-Soon
The Journal of Korean Medicine
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v.30
no.6
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pp.35-43
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2009
Objectives: Hwangryunhaedok-tang (HRHDT), a prescription composed of four herbs, has been wi dely used in Oriental Medicine for the treatment of cerebral infarction. However, the mechanisms by which the herbal formula affects on the production of pro- and anti-inflammatory cytokines in cerebral infarction patients remain unknown yet. Methods: The levels of pro- and anti-inflammatory cytokines, including tumor necrosis factor (TNF)-a, interleukin (IL)-1b, and IL-6, IL-10, and TGF-${\beta}1$ were determined in peripheral blood mononuclear cells (PBMCs) from cerebral infarction patients under our experimental conditions. Results: The secretory levels of pro- and anti-inflammatory cytokines, including tumor necrosis factor (TNF)-a, interleukin (IL)-1b, and IL-6, and IL-10 were significantly increased in phytohemagglutinin (PHA)-stimulated peripheral blood mononuclear cells (PBMCs) from cerebral infarction patients. However, pretreatment with HRHDT significantly inhibited the secretion of pro- and anti-inflammatory in PBMCs. Also, HRHDT induced a significant increase of transforming growth factor (TGF)-b1 in PBMCs. Conclusions: These data indicate that HRHDT may be beneficial in the suppression of inflammatory processes of cerebral infarct through suppression of TNF-$\alpha$, IL-$1{\beta}$, IL-6, and IL-10 and induction of TGF-${\beta}1$.
Kim, Grace Yoon-Hee;Hong, Chang-Wan;Park, Jung-Hyun
IMMUNE NETWORK
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v.11
no.1
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pp.1-10
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2011
Interleukin-7 (IL-7) is an essential cytokine for T cells. However, IL-7 is not produced by T cells themselves such that T cells are dependent on extrinsic IL-7. In fact, in the absence of IL-7, T cell development in the thymus as well as survival of naive T cells in the periphery is severely impaired. Furthermore, modulating IL-7 availability in vivo either by genetic means or other experimental approaches determines the size, composition and function of the T cell pool. Consequently, understanding IL-7 expression is critical for understanding T cell immunity. Until most recently, however, the spatiotemporal expression of in vivo IL-7 has remained obscured. Shortage of such information was partly due to scarce expression of IL-7 itself but mainly due to the lack of adequate reagents to monitor IL-7 expression in vivo. This situation dramatically changed with a recent rush of four independent studies that describe the generation and characterization of IL-7 reporter mice, all utilizing bacterial artificial chromosome transgene technology. The emerging consensus of these studies confirmed thymic stromal cells as the major producers of IL-7 but also identified IL-7 reporter activities in various peripheral tissues including skin, intestine and lymph nodes. Strikingly, developmental and environmental cues actively modulated IL-7 reporter activities in vivo suggesting that IL-7 regulation might be a new mechanism of shaping T cell development and homeostasis. Collectively, the availability of these new tools opens up new venues to assess unanswered questions in IL-7 biology in T cells and beyond.
Purpose : To evaluate the chemokine expression in children with a non-productive cough. Materials and Methods : Six children with a non-productive cough who visited Yeungnam University Hospital were evaluated for the mRNA expression of interferon-${\gamma}$-inducible protein 10(IP-10), macrophage cationic protein 1 and 3 (MCP-1, 3), interleukin (IL)-8, regulated upon activation in normal T cells expressed and secreted (RANTES), eotaxin and growth-related oncogene-${\alpha}$ (Gro-${\alpha}$) using the reverse transcription polymerase chain reaction. Results : The chemokines IP-10 and MCP-3 were expressed in all samples. The chemokine RANTES was expressed in five cases, and IL-8 was expressed in three among them. However, eotaxin, Gro-${\alpha}$ and MCP-1 were not expressed at all. The expression of chemokine MCP-3, RANTES and IL-8 were suppressed after the resolution of coughing in just one available case. Conclusion : The chemokines MCP-3, RANTES and IL-8 may contribute to airway inflammation in children with a non-productive cough, whereas IP-10 is of secondary importance in this condition.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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