Influeza type A virus have been worldwide problematic in animals as well as in humans. In this study, the use of reverse-transcriptase polymerase chain reaction (RT-PCR) was described for detecting influenza virus type A. The primer of RT-PCR was designed from an nonstructural (NS) gene of Influenza A virus. By RT-PCR, a product with the size of 189 bp was detected only when influenza virus type A was used as template. No products could be detected with Influenza virus type B as well as other respiratory pathogens. The detection limit of the RT-PCR was up to $10^{0.3}TCID_{50}$ which is comparable to the sensitivity of cell culture method. The RT-PCR could detect the influenza A virus from nasal turbinates of the ferrets infected with influenza virus type A not type B.
Objective : Lonicerae Flos has detoxifying properties and been used as antipyretic, antibacterial and antitumor. Fermentation of herbal medicine is known to increase the absorption, enhance effectiveness, decrease herbal toxicity and reduce side-effects. This study was performed to measure the effects of fermented Lonicerae Flos on influenza A/WSN (H1N1) virus replication. Material and Methods : Lonicerae Flos was fermented by Lactobacillus casei PM1. Fermented Lonicerae Flos was treated for 12 hours to MDCK (Mardin Darby canine kidney) cells, then cell-virulence was observed by MTT assay for 12 hours, 24 hours, and 36 hours after treatment. Following cases were conducted for 0, 10, 100, and $1000{\mu}g/ml$ concentrations of fermented Lonicerae Flos under the same time-frame; the fermented Lonicerae Flos was treated to MDCK cells before and after contamination by A-type influenza virus. The fermented Lonicerae Flos and the virus were mixed directly. The influence was observed by MTT assay and plaque assay. Results : These findings suggest that the fermented Lonicerae Flos inhibited the virulence of influenza A virus in MDCK cells and suppressed the plaque forming colonies induced by influenza A virus. Furthermore, pretreatment with fermented Lonicerae Flos was more effective than post-treatment. The titer of influenza virus was reduced for all before and after influenza A virus inoculation.
In order to search for anti-influenza virus type A agents from Korean traditional prescriptions (herb complexes), we selected 63 traditional prescriptions, based on a review of the Korean traditional medicine books. Both methanol extracts and boiling-water extracts were tested, by means of the Haemagglutination Inhibition Test (HIT). Three of the 63 methanol extracts: CM-22, CM-26, CM-48 (see explanation of nomenclature below), showed efficacy against influenza virus type ACM-22 showed anti-influenza virus type A activity at the range of $313{\mu}g/ml$ to $9.75{\mu}g/ml$, CM-26 showed antiviral activity at the range of $156{\mu}l/ml$ to $4.87{\mu}g/ml$, CM-48 showed anti-influenza virus type A activity at the range of $625{\mu}g/ml$ to $19.5{\mu}g/ml$, respectively. Three of the water extracts: CW-14, CW-34, CW-61 were active. CW-14 showed anti-influenza virus type A activity at the range of l0mg/ml to $78{\mu}g/ml$, CW-34 showed antiviral activity at the range of 10mg/ml to $625{\mu}g/ml$ and CW-61 showed anti-influenza virus type A activity at the range of l0mg/ml to $313{\mu}g/ml$, respectively. In order to determine cytotoxicity of each extracts, chicken red blood cells were incubated with the various concentration of extracts of Korean traditional prescriptions. CW-14, CW-34 and CW-61 did not show cytotoxic effect against red blood cells whereas CM-22, CM-26 and CM-48 showed cytotoxic effect against red blood cells at the range of l0mg/ml to $625{\mu}g/ml$, 10mg/ml to $313{\mu}g/ml$ and 10mg/ml to $313{\mu}g/ml$, respectively. These results indicated that Korean traditional pres criptions may be inhibit either attachment of virus to cell surface receptor or penetration of the virus into cell during the initial stage of infection.
Investigate the epidemics for influenza outbreaks. The outbreak pattern of the internal patients housed in the 10 designated hospitals was monitered to investigate and the characteristics of the virus isolates are as follows. 232 strains of influenza virus was isolated from the oral specimen of 1,320 respiratory disease patients in Pusan from Oct. 1998 to Jun. 1999. Among these isolates, 222 strains were A-type and the rest were B-type. The outbreak pattern for sex-and age-groups is as follows. The male outbreak was similar to the female outbreak: male outbreak, 47.4% and female outbreak, 52.5%. Most of the patients were less than 10 years old. The monthly influenza outbreak was consistent from Dec. 1998 to Apr. 1999. and The 113 strains from the A-type isolates were A/ Sydney/05/97(H3N2)-like, the 109 strains were A/Beijing/262/95(H1N1)-like, and all of the 10 B-type isolates were B/Harbin/07/94-like.
Boiled-water extracts from 101 Korean medicinal plants were tested in vitro for their inhibitory activity against influenza virus type A by means of a modified hemagglutination inhibition test. Thirteen of the 101 extracts exhibited strong anti-influenza virus type A activity at concentrations of less than $780\;{\mu}g/ml$. Out of the above 13 extracts, MW-40 (Chaenomeles speciosa), MW-88 (Citrus junos), and MW-100 (Zingiber officinale) exhibited marked antiviral activity in the concentration range of $0.195\;{\mu}g/ml$ to 100 mg/ml, $0.0487\;{\mu}g/ml$ to 100 mg/ml, and $0.0487\;{\mu}g/ml$ to 100 mg/ml, respectively. The extracts MW-88 and MW-100 were not cytotoxic to red blood cells, whereas MW-40 showed very weak cytotoxicity in the concentration range of 50 mg/ml to 100 mg/ml. Therefore, the present results demonstrate that boiled water extracts of 2 Korean medicinal plants, MW-88 and MW-100, have strong anti-influenza virus type A activity and no cytotoxic effects, and they may inhibit attachment of the virus to the cell and may be used for prophylaxis.
The outbreak patterns of the internal and external and external patients in the 20 designated hospitals and in 16 health centers were monitored to investigate and the characteristics of the virus isolates were as follows. Two hundreds and thirteen strains of influenza virus were isolated from the oral specimens of 1,686 patients with respiratory disease in Pusan. 1999. Among these isolates, 203 strains were A-type and the rest were B-type. The outbreak patterns for sex and age group were as follows. The male outbreak was similar to the female outbreak: male outbreak, 45.5% and female outbreak, 54.5%. Most of the patients were less than 10 days old. The monthly influenza outbreak was consistent from Jan. to Dec in 1999. The 96 strains from the A-type isolates were A/Sydney/05/97(H3N2)-like, the 107 strains were A/Beijing/262/95(H1N)-like, and all of the 10 B-type isolates were B/Harbin/07/94-like.
In order to search for anti-influenza virus type A agents from Korean medicinal herbs, we selected 100 medicinal herbs, based on a review of the Korean traditional medicine books. Four of 100 Korean medicinal herbs, MM-40, MM-55, MM-63, MM-110, exhibited very strong anti-influenza virus activity. The fractions of four medicinal herbs, which had very strong anti-influenza virus activity, were tested for antiviral activity by means of Haemagglutination inhibition test(HTT), 40% MeOH fraction of MM-40, $H_2O$ fraction of MM-55, 20% fraction of MM-63 3nd $H_2O$ fraction of MM-110 had strong anti-influenza virus activity at the range of $78{\mu}g/ml$ to $156{\mu}g/ml$, 1.56mg/ml to 100mg/ml, 6.25mg/ml to 50mg/ml and $48.7{\mu}g/ml$ to $780{\mu}g/ml$, respectively. These results of HIT indicated that fractions of Korean medicinal herbs might inhibit either attachment of virus to cell surface receptor or penetration of virus into cell during the initial stage of infection. In the cytotoxicity of fractions against red blood cells, 40% MeOH fraction of MM-40, 20% fraction of MM-63 and $H_2O$ fraction of MM-110 showed cytotoxicity at the range of $78{\mu}g/ml$ to 10mg/ml, 50mg/ml to 100mg/ml and $195{\mu}g/ml$ to 100mg/ml, respectively, whereas $H_2O$ fraction of MM-55 did not show cytotoxicity. In order to establish influenza virus adapted animal model, influenza virus type A were passaged 3 and 4 times successively in Balb/c mouse. As a result, we had 4 HA unit titers on the 5 days of 3rd passages and 7 days of 4th passages after infection, respectively.
To evaluate anti-influenza virus activity of 113 specimens of Korean traditional medicine both water and methanol extracts were examined using haemagglutination inhibition test. The water extract from Citrus junos was found to inhibit influenza virus A/Taiwan/l/86(H1N1). The survival rates of virus were determined by in situ cellular enzyme-linked immunosorbent assay. The water extract of Citrus junos was fractionated by chromatographic separating using Amberlite XAD-4, 40% MeOH and 60% MeOH layer had antiviral activity. The half inhibition concentration $(IC_{50})$ of 40% MeOH layer on survival of influenza virus was $MIC>361.5{\mu}g/ml$ and $IC_{50}$ value of fr. 40-4 fractionated from 40% MeOH layer was $677.19{\mu}g/ml$. These results suggested that the fractions of Citus junos have potent anti-influenza A virus activity.
Eun-Jung Song;Erica Espano;Jeong-Hyun Nam;Jiyeon Kim;Kyu-Suk Shim;Eunju Shin;Young In Park;Chong-Kil Lee;Jeong-Ki Kim
IMMUNE NETWORK
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v.20
no.4
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pp.31.1-31.14
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2020
The effectiveness of current influenza vaccines is considered suboptimal, and 1 way to improve the vaccines is using adjuvants. However, the current pool of adjuvants used in influenza vaccination is limited due to safety concerns. Aloe vera, or aloe, has been shown to have immunomodulatory functions and to be safe for oral intake. In this study, we explored the potential of orally administered processed Aloe vera gel (PAG) as an adjuvant for influenza vaccines in C57BL/6 mice. We first evaluated its adjuvanticity with a split-type pandemic H1N1 (pH1N1) Ag by subjecting the mice to lethal homologous influenza challenge. Oral PAG administration with the pH1N1 Ag increased survival rates in mice to levels similar to those of alum and MF59, which are currently used as adjuvants in influenza vaccine formulations. Similarly, oral PAG administration improved the survival of mice immunized with a commercial trivalent influenza vaccine against lethal homologous and heterologous virus challenge. PAG also increased hemagglutination inhibition and virus neutralization Ab titers against homologous and heterologous influenza strains following immunization with the split-type pH1N1 Ag or the commercial trivalent vaccine. Therefore, this study demonstrates that PAG may potentially be used as an adjuvant for influenza vaccines.
Type A influenza virus is circulating in wild birds and can infect wide ranges of hosts such as humans, pigs, domestic birds, and other mammals. Many subtypes of avian influenza viruses are circulating in aquatic birds. Most avian influenza viruses found in aquatic birds are low pathogenic avian influenza viruses. Highly pathogenic avian influenza viruses have been found in waterfowls since 2005. It is known that H5 and H7 subtypes of avian influenza viruses can be mutated into highly pathogenic avian influenza viruses in domestic poultry. In this study, we isolated novel reassortant H7N7 avian influenza virus from the fecal materials of migratory birds in the Western part of South Korea in 2016, and analyzed the sequences of all its eight genes. The genetic analysis of our isolate, A/waterfowl/Korea/S017/2016 (H7N7) indicates that it was reassortant avian influenza virus containing genes of both avian influenza viruses of wild birds and domestic ducks. Phylogenetic analysis showed that our isolate belongs to Eurasian lineage of avian influenza virus. Since avian influenza viruses continue to evolve, and H7-subtype avian influenza virus can mutate into the highly pathogenic avian influenza viruses, which cause the great threat to humans and animals, we closely survey the infections in both wild birds, and domestic poultry, and mammals.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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