The release of genetically modified organisms ($GMO_{s}$) into the environment has the potential risks regarding the possibility of gene transfer from $GMO_{s}$ to natural organisms and this needs to be evaluated. This study was conducted to monitor the possible horizontal gene transfer from herbicide-resistant zoysiagrass (Zoysia japonica Steud.) to indigenous microorganisms. We have first examined the effect of field-released GM zoysiagrass on the microbial flora in the gut of locust (Locusts mlgratoria). The microbial flora was analyzed through determining the 165 rDHA sequences of microorganisms. The comparison of the microbial flora in the gut of locusts that were captured at the field of GM zoysiagrass and of wild-type revealed that there is no noticeable difference between these two groups. This result indicates that the GM zoysiagrass does not have negative impact on microbial flora in the gut of locust. We then investigated whether the horizontal gene transfer occurred from GM zoysiagrass to microbes in soil, rhizosphere and faecal pellets from locusts by utilizing molecular tools such as Southern hybridization and polymerase chain reaction (PCR). When the total DNAs isolated from microbes in GM zoysiagrass and in wild-type zoysiagrass fields were hybridized with probes for bar or hpt gene, no hybridization signal was detected from both field isolates, while the probes were hybridized with DNA from the positive control. Absence of these genes in the FNAs of soil microorganisms as well as microbes in the gut of locust was further confirmed by PCR. Taken together, our data showed that horizontal gene transfer did not occur in this system. These results further indicate that frequencies of transfer of engineered plant DNA to bacteria are likely to be negligible.
본 연구에서는 디젤오염토양에서 활성화된 토착미생물을 이용한 DBM을 포한한 디젤첨가제와 유사한 물리화학적 특성을 갖는 가솔린첨가제를 대상으로 호기성 조건에서의 생분해성 평가를 수행하였다. Toluene, Ethanol 등이 가장 높은 활성도를 보였고, 일차분해상수는 $0.11{\sim}0.3day^{-1}$의 범위를 보여주었다. 반면에, 가솔린첨가제인 MTBE는 낮은 분해 특성을 보여주어 토양미생물에 제한적인 분해기질로 나타났다. 이와 더불어, DBM과 TGME를 대상으로 초기농도의 증가에 따른 분해 특성을 조사한 결과 초기농도 증가에 따라 분해속도는 감소하는 것으로 관찰되었다. 또한 DBM과 TGME의 생분해도를 평가하기 위한 방안으로 디젤첨가제의 저감과 동시에 $CO_2$ 생성 모니터링과 조류에 의한 독성 변화를 조사한 결과, 디젤첨가제의 농도 감소와 더불어 $CO_2$ 생성량의 증가는 DBM과 TGME의 무기화를 간접적으로 보여주고 있으나, DBM과 TGME이 완전히 분해되었음에도 불구하고 조류에 의한 잔류 독성이 남아있는 결과는 완전 무기화가 일어나지 않고 중간 부산물이 생성된 것으로 추정된다. 그럼에도 불구하고, DBM과 TGME를 포한한 디젤첨가제에 대한 생물학적 분해 연구는 국내에서 처음 보여주는 결과로 국내 유류오염지역의 생물학적 자연저감의 원리를 적용한 현장적용 타당성을 좀 더 높여주는 결과라고 판단된다.
In this study, uptake and translocation of 2,4,6-trinitrotoluene(TNT) by plant in a hydroponic culture was quantified with two indigenous plant species, Aeschynomene indica and Abutilon avicennae on various initial concentrations of TNT ranging from 20 to 80 mgTNT/L. Experiments were sterilized to exclude the activity of microorganisms and conducted in duplicate. Weight loss of two plant species in added TNT culture media was higher than in control. At over 2OmgTNTIL, there appeared to be phytotoxicity from TNT as indicated by severe yellow-chlorosis and increase of falling leaves. TNT removal rate normalized(K) to the plant fresh weight of Abutilon avicennae and Aeschynomene indica was that the higher TNT concentrations resulted in lower TNT removal rate normalized(K) to the plant fresh weight. Approximately 96% of the TNT in viable microflora-hydroponic culture was removed after 96h of the experiments.
본 연구는 현장 관측정 자연표류 실험 (SWNDT, Single-Well Natural Drift Test) 을 이용하여 트리클로로에틸렌 (TCE, trichloroethylene) 으로 오염된 지하수의 생물학적 복원 가능성 조사 방법 및 결과 해석법을 제시하였다. 현장 SWNDT 실험에 사용한 용액은 일정 양의 추적자 (브롬이온), 생분해 기질 (톨루엔, 에틸렌, 용존산소, 질산성질소) 을 현장 지하수에 용해시켜 준비한다. 준비된 실험용액을 대수층에 주입하고, 주입 시 시료를 채취하여 추적자와 생 분해 기질들의 초기 농도를 측정한다 주업 후 시간에 따라서 시료를 채취하여 추적자, 생분해 기질, 생분해 부산물들의 농도를 측정한다. 현장 SWNDT 실험은 생분해 기질과 추적자의 상대적 거동을 평가하기 위한 Push-pull Transport Test (PPTT), 토착 미생물의 양과 활성도를 증가시키기 위한 Drift Biostimulation Test (DBT), 트리클로로에틸렌과 미생물 반응이 유사하리라 예상되는 기질을 시험하기 위한 Drift Surrogate Activity Test (DSAT) 순으로 진행되었다 SWNDT 실험 양수 시 추적자로 사용한 브롬이용의 농도변화 곡선은 톨루엔, 에틸렌, 용존산소, 질산성 질소 농도변화와 유사한 경향을 나타냈다. 즉 대수층에서의 생분해 기질들의 이송이 추적자와 유사함을 나타내는 결과이다. 토착 톨루엔산화 미생물의 존재를 톨루엔 농도의 감소에 따른 이산화탄소의 발생 및 용존산소 농도의 감소로 확인하였고, 그 톨루엔 산화 미생물은 트리클로로에틸렌 생분해 유사기질로 사용된 에틸렌을 분해하며, 부산물로 산화에틸렌 (ethylene oxide) 을 생성하였다. 이는 DBT 실험을 통하여 활성화된 톨루엔 분해 미생물이 트리클로로에틸렌 분해능이 있음을 나타낸다. 본 연구에서 제시한 현장 SWNDT 실험 방법 및 결과 해석 방법은 트리클로로에틸렌으로 대표되는 염화 지방족 탄회수소화합물(Chlorinated Aliphatic Hydrocarbons, CAHs)로 오염된 지하수의 생물학적 복원 타당성 평가를 위한 경제적이고 용이한 현장 실험 방법이다.
The removal of toxic Cr(VI) by microorganisms is a promising approach for Cr(VI) pollution remediation. In the present study, four indigenous bacteria, named LY1, LY2, LY6, and LY7, were isolated from Cr(VI)-contaminated soil. Among the four Cr(VI)-resistant isolates, strain LY6 displayed the highest Cr(VI)-removing ability, with 100 mg/l Cr(VI) being completely removed within 144 h. It could effectively remove Cr(VI) over a wide pH range from 5.5 to 9.5, with the optimal pH of 8.5. The amount of Cr(VI) removed increased with initial Cr(VI) concentration. Data from the time-course analysis of Cr(VI) removal by strain LY6 followed first-order kinetics. Based on the 16S rRNA gene sequence, strain LY6 was identified as Pseudochrobactrum asaccharolyticum, a species that had never been reported for Cr(VI) removal before. Transmission electron microscopy and energy dispersive X-ray spectroscopy analysis further confirmed that strain LY6 could accumulate chromium within the cell while conducting Cr(VI) removal. The results suggested that the indigenous bacterial strain LY6 would be a new candidate for potential application in Cr(VI) pollution bioremediation.
Park, Shin-Young;Yoo, Mi-Young;Choi, Jae-Ho;Ha, Sang-Do;Moon, Kwang-Deok;Oh, Deog-Hwan
Food Science and Biotechnology
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제14권6호
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pp.803-807
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2005
This study examined the effects of ozone exposure alone (1, 3, and 5 ppm) as well as in combination with 1% acetic acid, citric acid, or lactic acid on the growth of indigenous microorganisms in enoki mushrooms. Populations of mesophilic bacteria, yeasts and molds in enoki mushrooms appeared to be decreased by stepwise increases in concentration (1 to 5 ppm) or exposure time (0.5 to 5 min) to ozone. Compared to untreated (control) enoki mushrooms, there were reductions of 1.03 to $2.61\;\log_{10}\;CFU/g$ in mesophilic bacteria and of 1.21 to $2.7\;\log_{10}\;CFU/g$ in yeasts and molds in all ozone- treated enoki mushrooms. Combination of 3 ppm ozone and 1% citric acid (p<0.05) synergistically brought about significant reductions in both mesophilic bacteria ($3.52\;\log_{10}\;CFU/g$) and fungi (yeasts and molds) ($2.77\;\log_{10}\;CFU/g$) from enoki mushrooms. The results of this study show that low concentrations of ozone inhibit indigenous microflora populations in enoki mushrooms. Combination treatments of 3 ppm ozone with 1% citric acid showed greater antimicrobial effectiveness than either 3 ppm ozone or 1% citric acid alone.
Bae, Yeoung-Seuk;Guy R. Kundsen;Louise-Marie C. Dandurand
The Plant Pathology Journal
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제18권1호
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pp.30-35
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2002
The hyphal growth and biocontrol efficacy of Trichodemo harzianum in soil may depend on its interactions with biotic components of the soil environment. The effect of soil microbial biomass on growth and biocontrol efficacy of T. hanianum isolate ThzIDl-M3 (green fluorescent protein transformant) was investigated using artificially prepared different levels of soil microbial biomass (153,328, or 517ug biomass carbon per g of dry soil; BC). The hyphal growth of T. harzanum was significantly inhibited in the soil with 328 or 517 $\mu$g BC compared with 153 ug BC. When ThzIDl-M3 was added to the soils as an alginate pellet formulation, the recoverable population of ThzIDl-M3 varied, but the highest population occurred in 517ug BC. Addition of alginate pellets of ThzIDl-M3 to the soils (10 per 50 g) resulted in increased indigenous microbial populations (total fungi, bacterial fluorescent Pseudomonas app., and actinomycetes). Furthermore, colonizing ability of ThzIDl-M3 on sclerotia of Sclerotinia sclerotiorum was significantly reduced in the soil with high revel of BC. These results suggest that increased soil microbial biomass contributes to increased interactions between introduced T. harzianum and soil microorganisms, consequently reducing the biocontrol efficacy of 1T. harzianum.
The degradation of phenanthrene, a model PAH compound, by microorganisms either in the mixed culture or individual strain, isolated from oil-contaminated soil in oil refmery vicinity sites, was examined. The effects of pH, temperature, initial concentration of phenanthrene, and the addition of carbon sources on biodegradation potential were also investigated. Results showed that soil samples collected from four oil refinery sites in Korea had different degrees of PAH contamination and different indigenous phenanthrene-degrading microorganisms. The optimal conditions for phenanthrene biodegradation were determined to be 30$^{circ}C$ and pH 7.0. A significantly positive relationship was observed between the microbial growth and the rate of phenanthrene degradation. However, the phenanthrene biodegradation capability of the mixed culture was not related to the degree of PAH contamination in soil. In low phenanthrene concentration, the growth and biodegradation rates of the mixed cultures did not increase over those of the individual strain, especially IC10. High concentration of phenanthrene inhibited the growth of microbial strains and biodegradation of phenanthrene, but was less inhibitory on the mixed culture. Finally, when non-ionic surfactants such as Brij 30 and Brij 35 were present at the level above critical micelle concentrations (CMCs), phenanthrene degradation was completely inhibited and delayed by the addition of Triton X100 and Triton N101.
Intensive taxonomical studies of the Aspergilli have long been made. Altogether 132 species and 18 varieties are recognized in the book "The Genus Aspergillus" written by Raper and Fennell (1965), in contrast to 77 species, 8 varieties and 4 mutations in " A Manual of Aspergilli" written 20 years earlier by Thom and Raper (1945). Classification of the Asperilli by Thom and Raper (1945) and by Raper and Fenell (1965). Classification of the Aspergilli by Thom and Raper (1945) and by Rapher and Fenell (1965) have been based mainly upon morphological and cultural detail both physiological and biochemical activities. In Korean there are many kinds of foods fermented natrually without the employment of selected microorganisms, and there are, of course, many different microorganisms serving in the fermentation fermented foods than other countries, the distribution and biological properties of the Asperigilli, in Korea are more variable. Taxonominical studies with 36 strains of Asperilli were based upon the examinations of morphological, cultural, and physiological characteristics. nineteen strains indigenous to Korea were selected from a lot of strains which had been isolated from meju and kokja and one strain from soil. They were identified according to the group key of Raper and Fennell. Ten strains were donated by Dr.Hesseltine of the Northern Utilization Research and Development Division in the U.S.A. From the Asp. japonicus supplied by Dr.Hesseltine, a white mutant was isolated and also studied. Two strains were donated by Dr. Murakami of the Research Institute of Brewing in Japan, and four strains came from Korean industrial companies.ndustrial companies.
높은 함량의 비소로 오염된 지역으로부터 분리해 낸 토착미생물들이 비소 지구화학에 미치는 영향을 조사하였다. Arsenite는 arsenate에 비하여 더욱 높은 미생물 성장 저해효과를 나타내었다. Arsenate를 함유한 배양액에 분리된 미생물들을 24시간 동안 배양한 결과, arsenate의 함량이 높을수록 미생물들의 성장은 감소하였으며 150mM 이상의 arsenate 조건에서는 성장이 확연히 중단되었다. 그러나, 동일 배양액에서 4일간에 걸쳐 추가 배양한 결과 미생물들의 성장이 다시 관찰되었으며 이는 미생물들이 비소를 해독하고 성장을 유지할 수 있도록 그들의 생화학적 기능을 조절하였음을 의미한다. 분리된 것 중 두 종의 미생물을 arsenate를 함유한 배양액에서 20시간 가량 배양한 결과, arsenate를 arsenite로 환원시켰음이 관찰되었고 이는 해독기제에 의한 것으로 추측된다. 또한 동일조건의 배양액에서 4일간 추가 배양한 결과 총 용존 비소함량의 감소가 관찰되었다. 미생물은 자연조건에서 비소의 화학종 결정에 영향을 미치며 이러한 특성은 비소로 오염된 지역의 복구에 유용하게 사용되어 질 수 있을 것으로 예상된다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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