Soybean is the one of recalcitrant legume species for shoot induction. Shoot regeneration via direct organogenesis was investigated in five soybean cultivars, 'Dawon', 'Pungsan', 'Daewon', 'Taekwang' and 'Chongdoo 1' by using cotyledonary node explants. Out of 5 soybean cultivars, an efficient shoot regeneration condition was developed in the two soybean cultivars, 'Dawon' and 'Pungsan'. When various kinds of plant growth regulators with different concentration were estimated, the optimum medium condition for shoot induction in both soybean cultivars was MS + B5 vitamin supplemented with BA at concentration 2 mg/L. In addition, shoot formation efficiency was increased with 97.09% and 93.88% by the pretreatment of BA onto the explants before in vitro culture in both cultivars. Shoot induction in 'Dawon' cultivar was originated from epidermal tissue and sub-epidermal layers when histological changes were investigated under shoot regeneration after culturing cotyledonary node segments on shoot induction medium for 0 to 21 days. Especially, cell dedifferentiation was observed from parenchyma cells to meristematic cell in 3-day cultured segments.
The present study was carried out to investigate the effects of cryoprotectants, equilibration step, freezing rate, culture condition following in vitro fertilization, and age and development stage of embryo by freezing with conventional slow freezing and vitrification on survival of frozen-thawed Korean native cattle(KNC) blastocysts produced in vitro. The KNC blastocysts produced in vitro were equilibrated in 1.8M ethylene glycol or 1.4M glycerol and cooled from -6$^{\circ}C$ to -35$^{\circ}C$ at -0.3$^{\circ}C$ or -O.6$^{\circ}C$ /minute. When equilibrated in 1.8M ethylene glycol, survival rate of fiozen4hawed blastocysts was sarne in both -0. 3$^{\circ}C$ /min and -0.6$^{\circ}C$ /min cooling rate(71.4%). With the equilibration in 1.4M glycerol, survival rate was higher in -0.3$^{\circ}C$ /min(63.6%) than in -0.6$^{\circ}C$ /min cooling rate(53.8%). For vitrification of the KNC blastocysts produced in vitro, they were equilibrated in 2-step or 3-step exposure to vitrification solution(25% ethylene glycol + 25% glycerol). Survival rate was sirilar in both 2-step(45.0%) and 3-step exposure(47.4%). According to culture condition following in vitro fertilization, higher survival rate was obtained for blastocysts co-cultured with bovine oviductal epithelial cell(BOEC, 77.3%) than for those cultured with epidermal growth factor(EGF, 65.7%) or for those co-cultured with BOEG + EGF (54.8%). According to embryo age and development stage, higher survival rate was obtained for 7-day ernbryos(70.0%) than 8-day(56.8%) or 9-day(20.0%) for blastocyst stage and obtained for 8-day embryos(74.3%) than 7-day(62.5%) or 9-day(42.9%) for exponded blastocyst. In surnmary, higher survival rate of frozen4hawed KNC blastocysts produced in vitro were obtained by using ethylene glycol for cryoprotectant and -0.3$^{\circ}C$ /min for cooling rate. And higher survival rate were obtained with co-culture with BOEC for culture condition following in vitro fertilization and with 7-day blastocyst or 8-day expanded blasto cyst for embryo age and development stage.
In this review article, in vivo and in vitro wear test methods which measure the wear of tooth and restorative material were discribed. In vivo test, the criteria of each test were reviewed. The merits and limitations were also commented. In vitro tests, three dimensional scanning methods which scan the occlusal tooth surface three dimensionally were described. Profilometer method, Pin on disk method, laser scanner method were reviewed and the limitations of each test were commented. Additionally, the structer of the three dimensional scanner which has been developed in Zurich university and has been reputated as the most accurate one was described. This study was partly supported by 1997 post-doctoral foreign study program.
A Study was conducted to investigate comparison of in vitro tuberization between normal and transgenic potato plantlets harboring adenosine deaminase gene in potato cultivar of Desiree. In time course study of in vitro tuberization, the rate of tuberization in four lines were increased till 6 weeks. but maintained stil after 7 weeks. Microtuber initiation of transgenic lines, 43 and 39 were faster than other lines, but no difference was observed after 5 weeks compared with normal plantlets. In all transgenic lines, the majoirty of microtubers produced were small(less than 100 mg) and medium(100-200mg) size rather than large size(more than 200 mg). Among 4 lines , line 9 produced the highest number of microtubers per each culture vessel. The results of this experiment suggest that there is no significant difference in microtuber production efficiency between normal and transgenic potatoes.
본 연구는 체외성숙/체외수정 유래의 돼지 난자를 이용하여 체외발달시 배양액의 종류나 교체에 따른 영향을 구명하고자 수행하였다. mNCSU-23에서 체외성숙시킨 다음 mTBM에서 체외수정시킨 난자를 목적에 따라 두 가지로 나누어 실험한 결과는 다음과 같다. 1. 체외성숙/체외수정란을 NCSU-23에서 배양액 교체없이 7일 동안 배양하거나 CZB에서 4일 배양한 다음 Pig-MEM으로 옮겨서 나머지 3일간 배양한 결과, 난분할율은 배양액간 차이를 보이지 않은 반면, 추정수정란대 배반포 발달을(P<0.05)과 분할란대 배반포 발달율은 NCSU-23에서 배양된 것이 유의적으로 높았다(P<0.01). 그러나 배 반포의 ICM 세포수, TE 세포수 및 총세포수에서는 모두 차이가 없었다. 2. 체외성숙/체외수정란를 NCSU-23에서 배양액 교체없이 7일 동안 배양하거나 체외배양 5일째에 신선한 동일 배양액이나 0.4% BSA를 10% FBS로 대체한 배양액(mNCSU-23F)으로 완전히 교체하여 배양한 결과, 난분할율, 배반포발달율, 배반포의 ICM 세포수, TE 세포수 및 총세포수 모두 처리간 유의적인 차이를 보이지 않았다. 결과적으로, NCSU-23이 CZB/Pig-MEM보다 체외성숙/체외수정 유래의 난자를 체외발달시키는데 적합한 것으로 사료되며, 체외발달배양 과정에 신선한 배양액이나 일부 변경된 배양액으로의 교체에 대해서는 더 많은 연구가 필요할 것으로 사료된다.
본 연구는 반추위 보호 choline의 급여가 in vitro 반추위 발효특성과 착유우의 유생산성에 미치는 영향을 검토하기 위해 수행되었다. 시험구 배치는 기초사료 첨가구(T1), 기초사료 +23 g/일 보호처리를 하지 않은 choline과 부형제 첨가구(T2) 및 기초사료+ 25.56 g/일 보호 choline 첨가구(T3)의 3처리로 하였다. 보호 choline의 첨가가 in vitro 배양액의 pH에 미치는 영향은 3시간을 제외한 전 배양시간에서 없었으며, ammonia 농도에 대한 보호 choline의 영향도 배양 9시간을 제외한 전 배양시간에서 없었다. 보호 choline의 첨가가 acetate 및 total-VFA 농도에 미치는 영향은 없었으며, propionate 및 butyrate 농도의 경우 배양 6시간을 제외한 전 배양시간에서 보호 choline 첨가의 영향도 없었다. 보호 choline의 급여로 착유우의 산유량과 유지방 및 유당 함량이 증가되었으나(p<0.05), 보호 choline의 급여가 착유우의 유단백질, 무지고형분, 총고형물, MUN, 체세포 수 및 지방산에 미치는 영향은 없었다. 따라서 반추위 보호 choline은 in vitro 반추위 발효에 대한 별다른 영향 없이 산유량과 유지방 및 유당 함량을 증가시키는데 효과적인 것으로 판단된다.
The present study was to investigate in vitro antimicrobial effects of propolis against six different fish bacterial pathogens, Aeromonas hydrophila, Edwardsiella tarda, Vibrio vulnificus, V. parahaemolyticus, A. salmonicida subsp. masoucida, A. salmonicida subsp. salmonicida) using minimum inhibitory concentration (MIC) and minimum bacteriocidal concentration (MBC) tests. In the results, propolis exhibited antimicrobial activity against all bacteria used in the present study, but there was no marked difference in bacterial species except Vibrio species. Collectively, propolis was thought to be an usefulness antimicrobial substance for controlling bacterial diseases in the fish industry.
This study was conducted to assess a possible alternative method as replacements for in vivo test. The human fibroblasts were exposed to several photoxic chemicals (promethazine, neutral red, chlortetracyclone, amiodatone, bithional, 8-methyooxypsorale) and non-phototoxi substance, ammonium laureth sulfate and irradiatied with 5 J/$cm^2$ of UVA (3320~420nm). The cell viability was measured by NRU (neutral red uptake) assay. The photoxic potential of test chemicals in the NRU PT (phototoxicity test) was assessed by determining the PIF (photoirritancy Factor) by using a cut-off value of 5. The NRU PT responses of most chemicals showed a close agreement with in vivo response except bithinol. There was a relatively good agreement between in vitro NRU assay and in vivo data. These results suggest that NRU assay using fibroblast could be used to predict the phototoxicity.
Asthma is a chronic inflammatory disease of the lungs, characterized by increased sensitivity to bronchoconstriction associated with infiltration of immune cells and mucus hyper secretion. In South Africa, the indigenous plant Siphonochilus aethiopicus, is used by traditional health practitioners to treat colds and flu, wheezing of the chest, coughs, influenza, sinus problems and mild asthma. In this study we aimed to investigate the potential anti-inflammatory and immune-modulating properties of S. aethiopicus in vitro. The dried and powdered S. aethiopicus plant material was extracted with organic solvents. The dried extracts were screened in vitro in the transcription response, NF-${\kappa}B$ and a cytokine assay. Significant activity was observed for organic extracts of the plant in these assays. This study provides evidence that S. aethiopicus has anti-inflammatory and immune-suppressing properties in vitro. These findings may support anecdotal accounts of its effectiveness against allergic asthma.
본 연구는 체외성숙, 수정된 돼지 수정란의 체외발달에 다양한 단백질 공급원의 첨가 및 공배양이 미치는 영향을 조사하기 위해서 수행하였다 본 실험에서 얻은 결과들을 하면 다음과 같다. 1. 체외성숙, 수정된 돼지 수정란을 BSA의 농도가 각각 0.4, 0.8 및 3.2% 첨가된 NCSU 23 배양액 내에서 체외배양하였을 때, 배반포 단계까지의 발달율은 각각 22.9, 18.4 및 14.6%로서 BSA의 농도가 높을수록 체외발달율은 감소하는 경향을 나타내었다. 높은 농도의 BSA(3.2%)에서 발달한 배반포의 평균 세포수(36.1$\pm$11.8)는 0.4 및 0.8% BSA 그룹의 평균 세포수 (각자 53.2$\pm$27.4, 61.2$\pm$22.5)보다 유의적으로 적은 수를 나타내었다 (P<0.05). 이러한 결과는 높은 농도의 BSA가 돼지 체외수정란의 체외발달을 저해한다는 것을 시사하였다. 2. FBS의 농도가 10% 및 20%로 첨가된 배양액에서 배양된 돼지 체외 수정란의 체외발달율과 평균 세포수는 차이가 없었다. 3. 생쥐나 돼지 태아섬유아세포와의 공배양은 돼지 체외수정란의 체외발달에 오히려 부정적 효과를 나타내었다. 본 연구 결과는 돼지 수정란의 체외배양에 있어서 단백질 공급원인 BSA나 FBS의 첨가 농도에 따라서는 수정란의 발달 및 질적 향상을 도모할 수 없었으며, 섬유아세포와의 공배양도 돼지 체외수정란의 발달에 부정적 효과가 있다는 것을 제시하였다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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