This study was carried out to investigate the optimum medium and concentrations of growth regulators for induction of multiple shoot by meristem culture of floe otorefcenf Mill. MS medium supple-mented with 3${\mu}{\textrm}{m}$ TDZ was effective for induction of multiple shoot. Shoot multiplication was more ef-fective when 2mg/1 BA combined with 0.Img/1 IAA than when only BA were treated on medium. Halfstrength of MS medium supplemented with 2mg/L IAA was effective for rooting of shoots regenerated.When plantlets regenerated from meristem culture were transferred to pot, survival rate of plantletswas 80% on perlite and was 95% on vermiculite, respectively.
This study evaluated the efficiency and compared with different materials of loading vessels for vitrification-plastic/glass, copper grid and nylon. The loading method, vitrification, cryop-reservation and warming method of the oocytes were examined. The loading samples prepared in manual or company-made and sterilized, loaded the COCs selected on each samples and cultured for maturation during 40 hours, and then exposed sequentially to ethylene glycol solution. Thawing method was reversely treated and exposed for warmed oocytes. After oocytes were thawed, fertilized and cultured in vitro for 3-4 hours, rates of development and morphological appearance were examined. The results were as summarized: ㆍOPS from company-made or hand-made of the hematocrit micropipettes, NLS from fishing line and EMG from company-made for EM were used for loading oocytes, respectively. ㆍThe efficiency of freezing method and loading convenience were orderly higher in OPS, NLS and EMG. The optimal capacity per vessel was orderly lowered in NLS, EMG and OPS, respectively. ㆍAfter oocytes were warmed, the recovery rate, morphology and rate of development were orderly higher in OPS, NLS and EMG, respectively. ㆍIn conclusion, OPS has the advantages of achieving a little more survival and preserving results than other two loading methods.
Kim, Gyung-Tae;Bae, Hyoung-suk;Baek, Young-Jin;Lee, Hyung-Hoan
Microbiology and Biotechnology Letters
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v.22
no.3
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pp.322-328
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1994
Antitumor and immunoadjuvant activities of Bifidobacterium adolesentis ATCC-15703 were investigated against the ascites and solid forms of tumor induced by Sarcoma 180(S-180) in ICR mice. When 100 $\mu$g of the bacterium was intraperitonealy administered in the mice, the survival rate(T/C %) of the mice was 132% for 50 days after the inoculation of S-180, however the increment of their body weights was suppressed. When the 100 $\mu$g was subcutaneously adminis- tratered at the right grion, the suppresion rate of the tumor growth on the 21st day after inoculation of S-180 were 62.3%. Complete supression of the tumor growth was observed from 2 out of 8 test mice. The bacterium itself appeared to have noncytotoxic substance against the S-180 in vitro. The bacteria] administration markedly enhanced the activity of peritoneal macrophages. The num- ber of peritoneal macrophages at one day after the administration of the 100 $\mu$g increased about 8 times as much as that of the control, and the highest activity of acid phosphatase appeared at 2 days.
Jun, Shiyeol;Kim, Soo Young;Kim, Seok-Mo;Park, Ki Cheong;Kim, Hee Jun;Chang, Ho Jin;Lee, Yong Sang;Chang, Hang-Seok;Park, Cheong Soo
Korean Journal of Head & Neck Oncology
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v.35
no.2
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pp.19-25
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2019
Background/Objectives: Although anaplastic thyroid carcinoma (ATC) is rare, it is one of the deadliest forms of thyroid cancer. The fatality rate for ATC is high, and the survival rate at one year after diagnosis is <20%. The present study aimed to investigate the anti-tumor activities of paclitaxel, radiation, and tyrosine kinase inhibitor (TKI) combined therapy in anaplastic thyroid cancer cells both in vitro and in vivo and explore its effects on apoptotic cell death pathways. Materials & Methods: ATC cell line was exposed to TKI, lenvatinib in the presence or absence of paclitaxel with radiation, and cell viability was determined by MTT assay. Effects of the combined treatment on cell cycle and intracellular signaling pathways were assessed by flow cytometry and western blot analysis. The ATC cell line xenograft model was used to examine the anti-tumor activity in vivo. Results: Our data revealed that the combined administration of paclitaxel, TKI, and radiation decreased cell viability in ATC cells, and also significantly increased apoptotic cell death in these cells, as demonstrated by the cleavage of caspase-3 and DNA fragmentation. This combination therapy reduced anti-apoptotic factor levels in ATC cells, while significantly decreasing tumor volume and increasing survival in ATC xenografts. Conclusion: These results indicate that administering the combination of paclitaxel, TKI, and radiation therapy may exert significant anticancer effects in preclinical models, potentially suggesting a new clinical approach for treating patients with ATC.
Malignant glioma, also known as brain cancer, is the most common intracranial tumor, having an extremely high mortality and recurrence rate. The survival rate of the affected patients is very low and treatment is difficult. Hence, growth inhibition of glioma has become a hot topic in the study of brain cancer treatment. Among the various isothiocyanate compounds, it has been confirmed that benzyl isothiocyanate (BITC) can inhibit the growth of a variety of tumors, including leukemia, glioma and lung cancer, both inside and outside the body. This study explored inhibitory effects of BITC on human glioma U87MG cells, as well as potential mechanisms. It was found that BITC could inhibit proliferation, induce apoptosis and arrest cell cycling of U87MG cells. In addition, it inhibited the expression of SOD and GSH, and caused oxidative stress to tumor cells. Therefore, it is believed that BITC can inhibit the growth of U87MG cells outside the body. Its mechanism may be related to the fact that BITC can cause oxidative stress to tumor cells.
The effects of different protein sources (serum vs bovine serum albumin), growth factors (EGF and PDGF) and co-culture with various type of somatic cel1s (BOEC, MEF and BRL) on the in vitro development of in vitro matured / in vitro fertilized bovine oocytes were examined, and the viability of frozen/thawed embryos derived from IVM /IVF was examined. Cell numbers of blastocysts were also counted. In Experiment 1, CR$_1$aa with serum was superior to CR$_1$aa with BSA in producing morulae plus blastocysts from IVM /IVF oocytes(24.4% vs 30.4%, p>0.05). In Experiment 2, more morulae plus blastocysts(42.3%) were produced in CR$_1$aa containing long /ml EGF than in the control CR$_1$aa(33.3%). In Experiment 3, 2- to 8-cell embryos derived from IVM /IVF oocytes were randomly allotted to one of 4 culture groups : a) CR$_1$aa ; b) CR$_1$aa + ing /ml PDGF ; CR$_1$aa + Sng /ml PDGF ; CR$_1$aa + lOng /ml PDGF ; culture resulted in 21.3, 51.2, 41.4 and 45.9%(p<0.05), respectively, developing into morulae and blastocysts. In Experiment 4, 0 and Sng /ml PDGF added to CR$_1$aa coculture with BRL or BOEC yielded 47.5, 42.5, 33.8 and 41.6% morulae and blastocysts, respectively. In Experiment 5, the proportion of embryos into morulae and blastocysts was highest in CR$_1$aa with MEF coculture group(50.9%) compared to any other group(CR$_1$aa, 22.3%; CR$_1$aa+BRL, 32.9%; CR$_1$aa+BOEC, 33.8%, p>0.05). In Experiment 6, survival rate of blastocysts produced by in vitro fertilization when cryoprotectant was removed in 0.7M glycerol+0.7M sucrose and 0.7M sucrose solution for 10 min. after thawing at 2$0^{\circ}C$ (Exp. H, 58.8%) was slightly higher than when cryoprotectant was removed 10%, 6.7% and 3.3% glycerol for 10 min. after thawing at 37$^{\circ}C$ (Exp. I, 54.3%). These study indicate that growth factors and somatic cell co-culture can increase the proportion of embryos that develop into morulae and blastocysts without an increase in the cell number and frozen /thawed method employed this experiment was not different.
In vivo protective and in vitro inhibitory activities of Lactobacillus casei YIT 9018. against typical enteritis causing Salmonella enteritidis KU101 and IgA level after challenge have been determined. In order to identify the strains of lactobacilli the sequences of 16S-23S rRNA intergenic spacer region were determined. All the test strains of Lactobacillus spp. inhibited Salmonella enteritidis, the intensity varied depending upon the species of lactobacilli. Effects on the survival rate of the mouse after challenge with Salmonella enteritidis KU101 on feeding Lactobacillus spp. have shown the highest survival rate in L. helveticus CU 631 followed by L. casei YIT 9018 and L. johnsonii C-4 and the lowest in control mice. The higher level of total Ig A concentration in the intestinal fluid of lactobacilli fed mice than control mice was observed. The sequences of 16S-23S rRNA intergenic spacer region of seven strains of Lactobacillus casei could be utilized as a strain identification, those sequences showed some degree of difference in homology.
This study was devised to observe the cytotoxic activities of garlic extracts against various cancer cells, that is, murine leukemic lymphocyte(L1210 and P388) and human rectal(HRT-18) and colon cancer cells(HCT-48 and HT-29) in vitro, and murine ascitic tumor cell(S-180) in vivo. Each cell-line except S-180 was cultured in medium containing serial concentration of the garlic extract in vitro. Inhibitory effect n the growth rate of the cancer cells was stronger in extracts of petroleum ether than that of ethanol. A lipid soluble compound in the extracts of garlic was cytocidal to murine leukemic cells, human rectal and colon cancer cells in vitro. The growth rates of the cancer cells in medium containing garlic extracts were inhibited gradually to a significant degree in proportion to the increase of the extract concentration. The cytotoxic activity of garlic active fraction from TLC was about 2.3 times more potent than that of crude garlic extract, one unit of cytotoxic activity against L1210 cells being equivalent to 4.2$\mu\textrm{g}$ and 1.8$\mu\textrm{g}$ from the crude garlic and active fraction, respectively. The Rf value of the active fraction on silica-gel TLC was 0.18 in condition that petroleum ether/ethyl ether/acetic acid mixture(90:10:1, v/v/v) was used as a developing solvent. The survival times of mice inoculated with S-180 cells were extended about 1.5 to 2 times in the groups treated with garlic extract(through i.p. and oral administration) compared with their control group(no garlic extract treatment). Observations were carried out on S-180. Ethanol extracts of garlic injured markedly tumor cells within 3 hours after injection.
This study was to test whether the viability of bovine hatched blastocysts (HBs) can be maintained after vitrification and thawing. The HBs were produced in vitro at Day 9 and Day 10 after IVF, and they were classified to small (S-HBs; ø$\leq$300 ${\mu}{\textrm}{m}$) and large(L-HBs; ø>300 ${\mu}{\textrm}{m}$) on the basis of embryo diameter using eyepiece micrometer. As freezing solution, we used EFS35 which consisted of 35% ethylene glycol (EG), 18% ficoll, 0.3 M sucrose and 10% FBS added in mDPBS. Vitrification was taken by two-step method, the HBs were equilibrated in 10% EG for 5 minutes and then shortly exposed in EFS35 and plunged into L$N_2$for 30~45 sec. After thawing, the survival rates were assessed by the re-expansion of the blastocoel during 2 h and 16 h of culture. The results obtained in these experiments were summarized as follows; 1) When the blastocysts(40.8%) recovered at Day 8 after IVF were further cultured for 24 h(Day 9 after IVF) and 48 h(Day 10 after IVF), the rates of HBs were 20.5% and 6.7%, respectively. Also, the total cell number of HBs on Day 9 was significantly higher than that of HBs on Day 10 (p<0.01). 2) When the effects of freezing solution to the survival of Day 9 L-HBs were examined, the rate of vitrified group (75.7%) was significantly lower than 100% of control and exposed group(p<0.05). 3) When the survival rates of vitrified HBs according to size and developmental age were examined, the data of L-HBs (75.5%) and S-HBs(63.6%) on Day 9 were slightly higher than those of L-HBs(64.3%) and S-HBs(60.7%) on Day 10. 4) Also, when the in vitro survival of Day 9 HBs was evaluated under different culture condition after thawing, the result in culture medium only (79.3%) was significantly higher than 43.2% in co-culture group (p<0.05). These results demonstrated that bovine HBs can be successfully cryopreserved by two-step vitrification method using EFS35.
The in vitro regeneration was established, and the genetic stability among the mother plants (control) and the micropropagated green plants was evaluated using ISSR markers in Imperata cylindrica 'Rubra', Poaceae which containing important bioenergy plants. Green shoots were multiply induced from growing point culture via callus on MS medium supplemented with 0.01 mg/L NAA and 2 mg/L BA, and the shoots were proliferated on the MS medium with rooting. Rooted plantlets were transplanted to the pot with 100% survival rate. Using ISSR markers, somaclonal variation was analyzed in eight mother plants (control), ten green-regenerant cultivated at culture room (ReR) and ten green-regenerant cultivated at field condition (ReF). All ISSRs produced a total of 97 bands, and the scorable bands varied from one to seven with an average of 4.4 bands per primer. The polymorphism rate of ReRs and ReFs was 4.1% and 3.1% respectively, showing higher rate than that of control (0%). The genetic similarity matrix (GSM) among all accessions ranged from 0.919 to 1.0 with a mean of 0.972. According to the clustering analysis, ReFs and mother plants were divided into two independent groups. The results indicate that no clear genetic diversity was detected among regenerated plants, and ISSR markers were useful tool for identification of somaclonal variation of regenerants.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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