홉은 맥주 생산에서 풍미와 쓴 맛을 제공하며 방부제의 역할을 한다. 최근 수제 맥주 호황에 의해 외국의 홉 품종을 도입하여 국내 재배 및 생산을 도모하고 있으나, 효율적인 무병묘 생산에 있어 어려움을 겪고 있다. 이에 따라 본 연구는 홉(Humulus lupulus L.) Cascade 품종을 대상으로 조직배양 기술을 통한 효율적인 기내 증식 방법과 우량묘 생산기술을 개발하고자 수행되었다. 실험에 사용된 식물 생장조절제는 MS 배지에 auxin 계열 IAA와 cytokinin 계열의 2iP, zeatin, BAP, TDZ을 사용하였다. 식물 재료는 신초를 대상으로 정단에서 3마디를 제거하고 사용하였다. 홉 기내배양 시 재분화율은 IAA만 첨가한 조건에서 가장 높았으며, cytokinin을 함께 사용했을 때 보다 약 21% 높았다. 하지만 IAA 0.1 mg/L + BAP 1 mg/L 조건에서 재분화율이 약 91%로 우세하였다. 초장은 IAA 0.1 mg/L + BAP 1 mg/L를 사용하는 것이 유리하다. TDZ가 첨가된 배지에서 다경 유도가 이루어졌으며, control이나 IAA만 첨가된 조건의 경우 callus 형성이 이루어지지 않고 지상부와 뿌리 생장이 진행되었다. Cytokinin을 첨가한 배지에서 callus가 형성되며 무게가 증가하였다. 홉 조직배양묘의 순화 시 생존율을 높이기 위한 실험 결과, 배양병에 멸균된 상토를 넣고 상대습도를 100%로 맞추어 준 다음점진적으로 기내의 상대습도를 낮추어 가며 21일 이후 야외로 나갔을 때 90%의 생존율을 확인하였다. 이러한 연구 결과는 다른 홉 품종에도 적용하여 각 품종별로 적합한 배지 조성을 찾거나 callus 및 다경 유도를 통한 무병묘 증식이나 육종 연구 등 사용자의 필요에 따라 적합한 조직배양 배지 조성을 찾는데 도움이 될 것으로 판단된다.
CHO Jung-Hwa;CHUNG Woo-Suk;SONG Kyoung-Ju;NA Byoung-Kuk;KANG Seung-Won;SONG Chul-Yong;KIM Tong-Soo
Parasites, Hosts and Diseases
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제43권1호
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pp.19-25
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2005
Protective efficacy of vaccination with Neospora caninum multiple recombinant antigens against N. caninum infection was evaluated in vitro and in vivo. Two major immunodominant surface antigens (NcSAG1 and NcSRS2) and two dense granule proteins (NcDG1 and NcDG2) of N. caninum tachyzoites were expressed in E. coli, respectively. An in vitro neutralization assay using polyclonal antisera raised against each recombinant antigen showed inhibitory effects on the invasion of N. caninum tachyzoites into host cells. Separate groups of gerbils were immunized with the purified recombinant proteins singly or in combinations and animals were then challenged with N. caninum. Following these experimental challenges, the protective efficacy of each vaccination was determined by assessing animal survival rate. All experimental groups showed protective effects of different degrees against experimental infection. The highest protection efficacy was observed for combined vaccination with NcSRS2 and NcDG1. Our results indicate that combined vaccination with the N. caninum recombinant antigens, NcSRS2 and NcDG1, induces the highest protective effect against N. caninum infection in vitro and in vivo.
재배상황버섯의 in vivo에서의 항암효과와 in vitro에서 암세포에 대해 세포독성을 조사하였다. 재배상항버섯의 물추출물과 이 물추출물의 50% cold acetone 침전분획에 대해 암세포에 대한 세포독성은 거의 없거나 아주 약하였다. 그러나, sarcoma 180을 복수에 이식하여 만든 복수암 생쥐에 대한 항암효과를 관찰한 결과는 물추출물과 acetone 침전분획 모두에서 생명연장효과와 생존율을 높였다. 또한 sarcoma 180을 생쥐의 안와에 이식하여 만든 고암암 모델 동물에서 재배 상황버섯의 물추출물분획은 고형암의 성정억제율이 약하였으나 acetone 침전분획물에서는 아주 높은 고형암 성장억제효과를 나타냈다. 이러한 결과로 보아 재배상황버섯의 항암효과는 암세포에 직접 작용하여 항암효과를 나타내기보다는 기존의 버섯들과 마찬가지로 생체의 면역능을 활성화 시킴으로써 항암효과를 발휘하는 것으로 생각된다.
This cepseiment was carried out to cerify the effect of thawing methods and preservative temperature on the sperm motility and fertility after thawing semen with plastic straws in fresh and warm water. Sperm motility in vitro stored at room temperature after thawing were conducted by the various storage hours. A field trial after thawing semen with warmed water in straws from Cheju native cows involving 4 technicians and 800 cows first (or second) services gave the following results. The thawing methods of warmed water for one minute in semen motility were considerably higher than that in iced water during 12 hours after thawing semen, however, the sperm survival index of ice-water shwed a better results according as the time passed away, but not significant differences. Preservative temperaure at 5$^{\circ}C$ (iced water) after thawing gave significantly better results than that of thawed at 3$0^{\circ}C$ (warmed water). The N R rate to 175 inseminations with semen thawed at 15-2$0^{\circ}C$ (fresh water) was 82.8%, 80.9% for 610 inseminations thawed in warm water. Conception rate ofthe semen thawed in warm water for 10-60 secs gave no significant difference among storage hours, because the semen used to be inseminated within one hour almost, but in decreased when semen thawed at the period of one minute over.
Yang Byeong-Hoon;Kim Hyun-Tae;Park Ju-Yong;Park Young-Goo
한국자원식물학회지
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제19권3호
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pp.385-391
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2006
In vitro-grown axillary buds of Melia aredarach were successfully cryopreserved by vitrification. On the MS medium supplemented with BA 1 mg/L, multiple shoots were developed within $4{\sim}5$ weeks. Plantlets of Melia azedarach were cold-hardened at $10^{\circ}C$ for a 16-hr photo-period for 6 weeks. Excised axillary shoot-tips from hardened plantlets were precultured on a solidified Murashige & Skoog agar medium (MS) supplemented with 0.7 M sucrose for 1 day at $25^{\circ}C$. Axillary shoot-tip meristems wert dehydrated using a highly concentrated vitrification solution (PVS2) for 60 min at $0^{\circ}C$ prior to a direct plunge into liquid nitrogen (LN). The PVS2 vitrification solution consisted of 30% glycerol (w/v), 15% ethylene glycol (w/v), 15% DMSO (w/v) in MS medium containing 0.4M sucrose. After short-term warming in a water bath at $40^{\circ}C$, the meristems were transferred into 2 ml of MS medium containing 1.2M sucrose for 15 min and then planted on solidified MS culture medium. Successfully vitrified and warmed meristems resumed growth within 2 weeks and directly developed shoots without intermediary callus formation. The survival rate of cold-hardened plantlets for 3 and 4 weeks was 90%. We did not find any difference in PCR-band patterns between control and cryopreserved plants. This method appears to be a promising technique for cryopreserving axillary shoot-tips from in vitro-grown plantlets of Medicinal plants.
Objective : We investigate toxicity of Aconiti ciliare tuber and antioxidant activity of Aconiti ciliare tuber Pharmacopuncture to develop safe Aconiti ciliare tuber Pharmacopuncture and find out the effect. Methods : In order to investigate toxicity of Aconiti ciliare tuberm, we administered Aconiti ciliare tuberm orally to rats and examined the survival rate, comparing with the survival rate of rats administered by Radix aconitum simmered with Semen Glycine and Radix Glycyrrhizae. We examined the in vitro biological activity of Aconiti ciliare tuber Pharmacopuncture, including the total polyphenol content, and ABTS radical scavenging. Results and Conclusions : The $LD_{50}$ of Radix aconitum simmered with Semen Glycine and Radix Glycyrrhizae was 9.0g/kg, on the other hand, the $LD_{50}$ of Aconiti ciliare tuberm was more than 15g/kg. The total polyphenol contents of Aconiti ciliare tuberm Pharmacopuncture was 2.31mg/L. The 2,2'-azinobis-3-ehtlbezothiazoline-6-sulfonic acid radical decolorization (ABTS) was 10.26%. We conclude that Aconiti ciliare tuberm is not highly toxic, Aconiti ciliare tuber Pharmacopuncture has a little antioxidant effect.
본 실험은 식물생장조절제인 TDZ, BA, TAh, IBA, zeatin, GA$_3$가 사과대목 M.25의 기내증식에 미치는 영향을 구명하기 위해서 실시하였다. 또한 시토카닌과 오옥신의 역할을 동시에 하는 것으로 알려진 potassium humate가 뿌리형성에 미치는 효과를 알아보기 위해서 몇가지 농도로 배지에 첨가했다. 생장점 배양으로부터 건전한 산소를 얻기 위해서 BA, TDB, zeatin을 단독으로 기본배지에 첨가한 결과, zeatin 1.0 mg/L 첨가한 배지에서 100% 생존을을 나타냈고 신초생장 또한 양정하였다. 생장점 배양을 통해서 얻은 신초의 증식을 위해서 여러 종류의 생장조절제를 다양한 농도로 처리했을때 NAA 0.5 + TDZ 0.2 mg/L이 첨가된 배지에서 증식된 신소재가 평균 12.1개로 증식율이 가장 높았다. 형성된 신초로부터 발근유도는 IBA 0.6 mg/L이 첨가된 배지에서 가장 효과적이었다. 이러한 발근유도 배지에 potassium humate 250 mg/L이 첨가된 처리구에서 발근율과 부정근 돈는 IBA 0.5 mg/L 단독 처리구보다 각각 30%와 350% 이상 증가되었다.
Objectives In this study, the author intended to investigate whether Gami-cheongpetang (GCP), Gagam-jeongkitang (GJG), Gami-samooltang (GSM) and Gami-ijoongtang (GIJ) significantly affect in vivo (animal model) and in vitro (cultured cells) mucin secretion and MUC5AC gene expression in airway epithelial cells. Methods For in vivo experiment, the author induced hypersecretion of airway mucin in rats by introducing SO2 for 3 weeks. Enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) was used to assess the effects of orally-administered GCP, GJG, GSM and GIJ in vivo mucin secretion from tracheal goblet cells of rats after 1 week. Also, the effects of the agents on TNF- or EGF-induced MUC5AC gene expression in human airway epithelial cells (NCI-H292) were investigated. Possible cytotoxicities of the agents were assessed by examining the rate of survival and proliferation of NCI-H292 cells. Results (1) GCP and GJG significantly inhibited hypersecretion of in vivo mucin, although GSM and GIJ did not affect hypersecretion of in vivo mucin; (2) GCP and GJG significantly increased in vitro mucin secretion from cultured HTSE cells. However, GSM and GIJ did not affect in vitro mucin secretion from HTSE cells; (3) GCP and GJG significantly inhibited the expression levels of EGF-induced MUC5AC gene in NCI-H292 cells. However, GSM and GIJ increased the expression levels of EGF-induced MUC 5AC gene in NCI-H292 cells; (4) GCP, GJG, GSM and GIJ did not significantly inhibit the survival and proliferation of NCI-H292 cells. Conclusions These results suggest that GCP, GJG, GSM and GIJ can not only affect the secretion of mucin but also affect the expression of mucin gene. The author suggests that the effects of GCP, GJG, GSM and GIJ with their components should be further investigated by using animal experimental models that simulate the diverse pathophysiology of pulmonary diseases.
This study was carried out to investigate the optimum medium and concentrations of growth regulators for induction of multiple shoot by meristem culture of floe otorefcenf Mill. MS medium supple-mented with 3${\mu}{\textrm}{m}$ TDZ was effective for induction of multiple shoot. Shoot multiplication was more ef-fective when 2mg/1 BA combined with 0.Img/1 IAA than when only BA were treated on medium. Halfstrength of MS medium supplemented with 2mg/L IAA was effective for rooting of shoots regenerated.When plantlets regenerated from meristem culture were transferred to pot, survival rate of plantletswas 80% on perlite and was 95% on vermiculite, respectively.
This study evaluated the efficiency and compared with different materials of loading vessels for vitrification-plastic/glass, copper grid and nylon. The loading method, vitrification, cryop-reservation and warming method of the oocytes were examined. The loading samples prepared in manual or company-made and sterilized, loaded the COCs selected on each samples and cultured for maturation during 40 hours, and then exposed sequentially to ethylene glycol solution. Thawing method was reversely treated and exposed for warmed oocytes. After oocytes were thawed, fertilized and cultured in vitro for 3-4 hours, rates of development and morphological appearance were examined. The results were as summarized: ㆍOPS from company-made or hand-made of the hematocrit micropipettes, NLS from fishing line and EMG from company-made for EM were used for loading oocytes, respectively. ㆍThe efficiency of freezing method and loading convenience were orderly higher in OPS, NLS and EMG. The optimal capacity per vessel was orderly lowered in NLS, EMG and OPS, respectively. ㆍAfter oocytes were warmed, the recovery rate, morphology and rate of development were orderly higher in OPS, NLS and EMG, respectively. ㆍIn conclusion, OPS has the advantages of achieving a little more survival and preserving results than other two loading methods.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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